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国家自然科学基金(30971402)
作品数:
1
被引量:4
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相关作者:
杨永升
刘悦
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许望翔
詹轶群
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刘悦
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杨永升
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南方医科大学...
年份
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2012
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人甘油激酶慢病毒干涉载体的构建和表达
被引量:4
2012年
目的构建人甘油激酶(GK)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,获得稳定下调GK表达的慢病毒。方法将具有干涉效果的siRNA序列克隆入慢病毒核心质粒pSicoR中,并转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并应用FACS测定病毒滴度。以GK干涉慢病毒感染人肝细胞系L02细胞后,应用Western blotting方法检测GK的表达。结果成功构建GK干涉慢病毒pSicoR-GK载体并获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达3×107pfu/ml,GK蛋白质表达水平下调至对照的约20%。结论成功构建人GK基因RNAi慢病毒,为后续GK生物学功能研究奠定基础。
刘悦
郝玉娥
詹轶群
许望翔
杨永升
葛常辉
关键词:
慢病毒
肝细胞
重组质粒
RNA干扰
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