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上海市卫生局青年科研基金(2010Y021)

作品数:2 被引量:1H指数:1
相关作者:郭睿李彪张敏薛丽喆苗莹更多>>
相关机构:上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
发文基金:上海市卫生局青年科研基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇启动子
  • 2篇肿瘤
  • 2篇肿瘤靶向
  • 2篇肿瘤靶向治疗
  • 2篇转运体
  • 2篇靶向
  • 2篇靶向治疗
  • 1篇碘放射性同位...
  • 1篇碘转运体
  • 1篇端粒
  • 1篇端粒酶
  • 1篇端粒酶反转录...
  • 1篇双启动子
  • 1篇启动子调控
  • 1篇人端粒酶
  • 1篇人端粒酶反转...
  • 1篇转录
  • 1篇转录酶
  • 1篇转移酶
  • 1篇末端转移酶

机构

  • 2篇上海交通大学...

作者

  • 2篇张敏
  • 2篇李彪
  • 2篇郭睿
  • 1篇徐昊平
  • 1篇石朔
  • 1篇苗莹
  • 1篇薛丽喆

传媒

  • 1篇诊断学理论与...
  • 1篇中华核医学与...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2012
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
人端粒酶反转录酶启动子调控人钠碘同向转运体基因肿瘤靶向治疗的实验研究被引量:1
2012年
目的:探讨肿瘤特异性人端粒酶反转录酶(hTERT)启动子调控的人钠碘同向转运体(hNIS)的特异性抗肿瘤作用。方法:将质粒pcDNA3.1-CMV-hNIS中的hNIS cDNA亚克隆至含hTERT核心启动子的质粒载体pGL3-hTERT-luc中,以构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,并以质粒pGL3-hTERT-luc及pcDNA3.1-CMV-hNIS分别作为阴性对照及阳性对照,然后采用脂质体将其转染至人胚肺成纤维细胞MRC-5及肿瘤细胞HeLa、A549和U87中,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测hNIS mRNA水平;免疫细胞化学法及流式细胞术(FCM)检测hNIS蛋白的表达情况;摄碘实验验证hNIS蛋白的功能;同时采用MTT观察131I的细胞杀伤作用。结果:成功构建质粒pGL3-hTERT-hNIS,转染4种细胞后,3种肿瘤细胞的hNIS mRNA水平明显高于MRC-5细胞(P<0.05)。3种肿瘤细胞均可表达hNIS蛋白,而MRC-5细胞不表达。与Na125I孵育30 min时HeLa、A549和U87细胞的摄碘量分别是阴性对照组的25倍、20倍和18倍。131I照射7 h后,3种肿瘤细胞的相对存活率显著下降(P<0.05)。结论:hTERT启动子调控hNIS基因在肿瘤细胞中特异性表达,这些细胞可特异性摄碘并被其有效杀伤,为行进一步体内实验奠定基础。
薛丽喆张敏郭睿李彪
关键词:核心启动子
双启动子杆状病毒介导131I肿瘤靶向治疗的实验研究
2014年
目的构建由人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控的N1S基因以及由早期生长应答因子1(Egr1)启动子调控的人纤溶酶原Kringle5(K5)基因的双启动子重组杆状病毒载体,探讨同时靶向肿瘤细胞与血管内皮细胞的基因治疗模式的可行性。方法将hTERT启动子和N1S基因片段以及Egr1启动子和麟基因片段分别亚克隆至杆状病毒载体,经草地贪夜蛾卵巢细胞(Sf9)包装并扩增得到重组杆状病毒(Bac—hTERT-N1S—Egr1-K5),同时将CMV启动子调控的重组杆状病毒(Bac—CMV-NIS—Egr1-K5)以及不含NIS基因或不含硒基因的重组杆状病毒(Bac—hTERT-O—Egrl-K5、Bac-hTERT-NIS—Egr1-0)作为对照组。采用荧光定量PCR及Westernblot分析NISmRNA和蛋白在人宫颈癌细胞HeLa中的靶向表达,以及131I辐射对K5mRNA和蛋白的表达调控。通过摄碘实验、NaClO4抑制实验以及细胞增殖抑制实验验证NIS蛋白的功能及由其介导的131I抑瘤作用。通过细胞凋亡实验评估K5蛋白对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的促凋亡作用。统计学检验采用方差分析。结果成功构建重组杆状病毒Bac—hTERT-NIS—Egr1-K5。荧光定量PCR及Westernblot显示肿瘤特异性启动子hTERT介导的NIS基因仅在HeLa细胞中有表达,而在正常肺纤维细胞MRC5中无表达。131I可以调控辐射敏感启动子Egr1下游您基因的转录和翻译。细胞摄碘实验显示Bac-hTERT-NIS—Egr1-K5感染的HeLa细胞摄碘增加了5.6倍,与未加NaClO4组比,其摄碘能被NaClO4显著抑制(F=199.296,P〈0.05)。131I对Bac—hTERT-NIS—Egr1-K5感染的HeLa细胞的抑制效果明显,细胞存活率仅为38.3%。Bac—hTERT-NIS—Egrl一K5感染的HUVEC细胞在131I照射下的凋亡率(30.8%)显著高于Bac.hTERT-NIS—Egr1-0组和未加病毒组(11.2%和10.9%,F=19.926、45.409,均P〈0.05)。结论重组杆状病毒Bac-hTERT-NIS—Egrl.K5可使NIS基因在肿瘤细胞�
张敏郭睿石朔苗莹徐昊平李彪
关键词:末端转移酶钠碘转运体碘放射性同位素
共1页<1>
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