国家科技支撑计划(2012BA137B01)
- 作品数：7 被引量：66H指数：5
- 相关作者：潘柏申郭玮张捷崔丽艳吴炯更多>>
- 相关机构：复旦大学北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对缺氧/复氧肾小管上皮HK-2细胞自噬作用的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对缺氧/复氧肾小管上皮细胞HK-2自噬水平的影响,探讨NGAL在肾小管上皮细胞缺氧/复氧过程中发挥的作用。方法构建高表达NGAL的载体pcDNA3.1(-)/myc-His B-NGAL,并转染HK-2细胞。将HK-2细胞分为未转染组和转染组,每组再分为缺氧/复氧处理组和未处理组。用western blot法检测转染后NGAL蛋白表达水平和缺氧/复氧后细胞自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)表达水平,并用CellTiter-Blue细胞活性检测系统检测细胞活力。结果成功构建高表达NGAL的载体pcDNA3.1(-)/myc-His B-NGAL,转染HK-2细胞后,细胞NGAL蛋白表达水平高于未转染组(t=8.959,P<0.05)。缺氧1 h/复氧24 h后,转染组细胞LC3-Ⅱ表达水平高于未转染组(t=21.721,P<0.05),而细胞活力低于未转染组(t=-6.238,P<0.05)。结论在HK-2细胞缺氧/复氧状态下,NGAL能增强细胞自噬水平,导致细胞损伤加重甚至死亡。
- 张文静崔丽艳杨硕张捷
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白自噬缺氧复氧
- 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在急性肾损伤中的保护作用被引量：25
- 2015年
- 急性肾损伤(AKI)在临床上较为常见,且预后较差,需及早干预,但是目前临床上常用的诊断方法主要依赖于功能性指标,如血清肌酐(SCr)检测。然而由于检测技术的局限,SCr异常出现较晚,且其检测结果亦有可能出现一定的偏差,这对于临床上及时诊断及干预AKI非常不利。因此迫切需要一种能明确早期肾脏损伤的生物标志物。近年来,许多学者在寻找早期AKI的生物学标记物方面做了一定的探索,逐渐发现一些有潜在应用价值的指标,如中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)等,其中NGAL作为早期AKI生物标志物的研究倍受关注。一些研究显示NGAL在肾脏保护、炎症反应、肿瘤发生等方面亦发挥重要作用,但其具体作用机制目前尚未完全阐明。文章仅就NGAL在AKI发生过程中所发挥的保护作用及其参与机制做相关综述。
- 张雅丽崔丽艳张捷
- 关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白急性肾损伤凋亡自噬
- 液相色谱－串联质谱检测血浆变肾上腺素和去甲变肾上腺素方法的建立被引量：5
- 2015年
- 目的：建立一种稳定的血浆变肾上腺素（ MN）和去甲变肾上腺素（ NMN）的液相色谱－串联质谱检测方法（ LC－MS／MS）。方法方法学建立。自2012年1月至12月于复旦大学附属中山医院体检中心招募126名健康人，同时在中山医院就诊的泌尿外科和内分泌科患者中入组疾病组21例（嗜铬细胞瘤17例，异位嗜铬细胞瘤4例），高血压组108例，疾病对照组84例。以同位素氘代作为内标，采用BEH HILIC色谱柱进行分离。流动相为甲酸铵缓冲液（100 mmol／L，pH3）和纯乙腈，梯度洗脱；柱温：35℃；使用Waters Xevo^TM TQ MS ACQUITY UPLC System建立方法，并对该方法的线性，回收率，精密度，最低检测下限进行性能评价。比较各组同健康人组MN和NMN水平的差异。结果该方法通过了线性，回收率，精密度和最低检测下限的性能评价。嗜铬细胞瘤组同健康人组的MN和NMN水平有显著统计学差异。结论建立的LC－MS／MS方法检测MN和NMN，适合于临床应用。（中华检验医学杂志，2015，38：605－608）
- 陈方俊吴炯郭玮彭颖斐秦嘉倩徐雯潘柏申
- 关键词：串联质谱法嗜铬细胞瘤
- 常规生化检验项目生物学变异的研究被引量：11
- 2012年
- 目的通过研究中国人32项常规检验项目的生物学变异数据，计算检验质量目标，为制定我国临床检验质量标准提供依据。方法参考国外同行的生物学变异实验设计和计算方法，通过对22名上海中山医院检验科工作人员（男12名，女10名，年龄20～40岁，中位年龄30岁）短期（1d内5个时间点为采血时间：8：00、10：00、12：00、14：00和16：00）、长期（连续6周，每周早晨8：00为采血时间）以及对照血清（体检健康人的新鲜混合血清）的检测，计算生物学变异数据、个体指数（Ⅱ）及质量目标。结果（1）得到了32项常规检验项目的短期和长期生物学变异数据以及以长期生物学变异数据为基础的Ⅱ和质量目标。（2）发现饮食对部分检验项目的生物学变异有一定影响，其中最明显的是游离脂肪酸，餐后相对餐前的检测值平均偏低约30％。其次是超敏C反应蛋白，餐后相对餐前的检测值平均偏低约20％。但三酰甘油，餐后相对餐前的检测值平均偏高约10％。（3）得出的质量目标允许总误差适宜值与欧洲生物学允许总误差适宜值和美国临床实验室改进修正案室问质量评估指标之间存在一定差异。结论（1）本研究中载脂蛋白E和游离脂肪酸的实验结果弥补了欧洲生物学变异数据库的不足。（2）32项常规检验项目中仅少部分受到饮食因素的影响。（3）以中国人生物学变异数据为基础设立的分析质量目标和欧洲生物学质量目标基本一致，但也有少部分项目存在差异。（4）使用生物学变异数据设立分析质量目标比使用CLIA室间评估指标更实际有效。
- 陈政君张晨宋斌斌吴炯王蓓丽张春燕郭玮潘柏申
- 关键词：临床化学试验
- 尿白蛋白检测标准化进展及实验室应注意的问题被引量：3
- 2015年
- 尿白蛋白检测不仅作为评估肾脏功能的重要标志物被广泛应用于临床，而且也可作为心血管疾病及全因死亡率的风险预测指标。本文关注尿白蛋白分析前－分析中－分析后的整个检测过程，着重探讨尿白蛋白检测的标准化进展以及实验室人员在临床检验工作中亟需重视的问题。（中华检验医学杂志，2015，38：577－579）
- 郭玮潘柏申
- 关键词：尿白蛋白心血管疾病
- 尿白蛋白检测及其临床应用被引量：7
- 2014年
- 尿白蛋白是肾脏疾病诊断的重要检测指标，但在临床应用中依然存在诸多问题。尿液标本类型、判断阈值的确立、检测系统标准化等多个方面有待加强。（中华检验医学杂志，2014，37：420-424）
- 唐文佳吴炯郭玮潘柏申
- 关键词：白蛋白尿白蛋白类
- 自噬对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及机制被引量：14
- 2015年
- 目的观察大鼠肾脏缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)损伤中肾小管上皮细胞的自噬激活情况,探讨其对肾脏I/R损伤发挥保护性作用的分子机制。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(Sham)、I/R组、氯喹干预组(I/R+CQ)和雷帕霉素干预组(I/R+Rap)。常规方法建立大鼠肾脏I/R损伤模型,再灌注24 h后留取各组大鼠血和肾脏标本。血标本用于尿素氮(BUN)和血肌酐(Scre)含量检测;肾组织标本行HE染色,观察病理学损伤情况;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡的改变;采用免疫组化法检测Beclin-1和Caspase-3蛋白表达,透射电镜观察大鼠肾脏自噬泡的形成情况。结果与I/R组相比,I/R+CQ组BUN和Scre明显升高(P<0.05,P<0.01),肾组织损伤积分增加(P<0.01),TUNEL阳性细胞数增多(P<0.05),Beclin-1蛋白表达减弱(P<0.01),Caspase-3蛋白表达增强(P<0.01),电镜下自噬泡数量较少(P<0.05);I/R+Rap组BUN和Scre显著降低(P<0.01),肾组织损伤积分减低(P<0.05),TUNEL阳性细胞数减少(P<0.05),Beclin-1蛋白表达增强(P<0.01),Caspase-3蛋白表达减弱(P<0.01),自噬泡数量明显增多(P<0.01)。结论自噬激活在肾脏I/R损伤过程中可通过抑制凋亡而发挥的保护作用,其机制可能涉及Beclin-1及Caspase-3等蛋白的表达调控。
- 张雅丽崔丽艳杨硕周剑锁张文静张捷
- 关键词：自噬缺血再灌注免疫组织化学超微结构
