湖北省科技攻关计划(2006AA301A05)
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 相关作者：姜蕊于世英陶凯雄舒晓刚童强更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 短发卡RNA对人胃癌细胞STAT3基因的沉默作用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨STAT3基因小发夹RNA(shRNA)表达质粒对胃癌MKN-45细胞STAT3基因的干扰作用。方法根据STAT3 mRNA编码序列,设计RNA干扰靶点,构建STAT3基因的特异性小RNA干扰质粒(psiRNA-H1/STAT3),使用脂质体转染人胃癌细胞系(MKN-45细胞)。实验分为对照(A)组,psiRNA-H1转染(B)组和psiRNA-H1/STAT3转染(C)组。通过RT-PCR和Western Blot检测STAT3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达的影响。结果psiRNA-H1/STAT3经限制性酶切及部分序列分析证明基因插入正确,并经测序证实。将其成功转染MKN-45细胞后,该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论将成功构建的针对STAT3基因的shRNA表达载体转染MKN-45细胞,能有效抑制该细胞的STAT3 mRNA和蛋白表达,为STAT3基因靶向治疗提供一定的实验依据。
- 童强舒晓刚卢晓明黎维勇陶凯雄陈道达王国斌
- 关键词：STAT3转录因子RNA干扰
- 非小细胞肺癌中基质金属蛋白酶13和其抑制剂1表达及与预后的关系研究被引量：6
- 2008年
- 目的研究非小细胞肺癌MMP-13、TIMP-1蛋白表达,探讨其与淋巴结转移及预后的关系。方法应用免疫组织化学检测99例非小细胞肺癌组织以及32例正常肺组织中MMP-13、TIMP-1蛋白的表达。结果①MMP-13、TIMP-1蛋白在非小细胞肺癌组织的阳性率分别为51.5%(51/99)和59.6%(59/99),较正常肺组织中阳性率0%(0/32)和15.6%(5/32)显著增高(P<0.05)。MMP-13、TIMP-1蛋白表达在不同性别、年龄、组织学类型之间无显著性差异,而与淋巴结转移以及临床分期显著相关(P<0.01)。MMP-13蛋白表达与临床分期以及淋巴结转移呈正相关(P<0.01);TIMP-1蛋白表达与临床分期以及淋巴结转移呈负相关(P<0.01)。②Kaplan-Meier法显示MMP-13、TIMP-1蛋白与非小细胞肺癌预后相关,Cox多因素模型分析显示MMP-13蛋白表达可以作为非小细胞肺癌独立的预后因子,其过表达提示预后不良;而TIMP-1不能作为独立的预后因子。结论MMP-13是影响预后的独立指标;TIMP-1是影响预后有意义的指标。
- 姜蕊吴翠环于世英
- 关键词：非小细胞肺癌基质金属蛋白酶预后
- 非小细胞肺癌中Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化检测被引量：4
- 2009年
- 目的探讨Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子在非小细胞肺癌(NSCLC)中的异常甲基化状态及其与临床病理资料的联系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation Specific-PCR,MSP)技术检测60例NSCLC以及癌旁正常组织中Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化状态。结果Reprimo以及14-3-3 Σ基因启动子异常甲基化在NSCLC组织中发生频率分别为36.67%(22/60)和28.33%(17/60),与癌旁正常组织具有显著性差异(P值分别为0.000和0.002)。Reprimo基因启动子异常甲基化频率与吸烟习惯以及年龄相关;14-3-3 Σ启动子异常甲基化与年龄、吸烟习惯、性别、病理类型和临床分期以及淋巴结转移等无相关。结论NSCLC中存在Reprimo和14-3-3 Σ等基因启动子较高频率的异常甲基化。
- 姜蕊于世英
- 关键词：肺癌甲基化
- STAT3基因短发卡RNA表达质粒的构建及其对胃癌细胞生长和侵袭的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的构建信号传导及转录活化因子3(STAT3)基因短发夹RNA(shRNA)表达质粒,探讨STAT3抑制后对胃癌MKN-45细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法根据STAT3 mRNA编码序列,设计RNA干扰靶点,构建STAT3基因的特异性小RNA干扰质粒(psiRNA-H1/STAT3),使用脂质体转染MKN-45细胞,实验分为对照组、psiRNA-H1转染组和psiRNA-H1/STAT3转染组。通过RT-PCR和Western blot检测STAT3特异性小RNA干扰基因对胃癌细胞STAT3 mRNA和蛋白表达的影响;MTT比色法检测细胞的生长抑制率;采用流式细胞术检测转染后对MKN-45细胞凋亡的影响;采用Boyden小室侵袭实验检测转染后MKN-45细胞侵袭力的变化。结果成功转染重组体的MKN-45细胞中STAT3 mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05)。psiRNA-H1/STAT3转染组各时相均明显抑制MKN-45细胞生长,且MKN-45细胞凋亡率为34.26%,相比对照组(3.75%)和psiRNA-H1转染组(4.43%)明显升高(P<0.01)。另外,psiRNA-H1/STAT3转染组MKN-45细胞侵袭力较另外2组明显减弱(P<0.01)。结论成功构建了针对STAT3基因的shRNA表达载体,通过转染MKN-45细胞,在体外能有效抑制人胃癌细胞STAT3mRNA和蛋白表达,细胞增殖、侵袭能力减弱并且促进细胞凋亡,为STAT3基因靶向治疗提供一定的实验依据。
- 童强舒晓刚卢晓明肖勇牛彦锋黎维勇陶凯雄王国斌
- 关键词：短发夹RNA胃癌
- 畸胎瘤细胞源性生长因子对雌激素受体阴性乳腺癌细胞雌激素依赖性的影响被引量：1
- 2007年
- 目的分析乳腺癌细胞雌激素依赖性与畸胎瘤细胞源性生长因子(PC-cell derivedgrowth factor,PCDGF)表达之间的关系,探讨雌激素受体(ER)阴性乳腺癌患者接受内分泌治疗的可能性。方法荧光定量聚合酶链反应检测乳腺癌细胞系 MCF-7、MDA-MB-231、T47D、MDA-MB-435s中 PCDGF 的表达,CCK-8法检测不同浓度雌激素培养条件下细胞的存活情况。以 ER 阳性乳腺癌细胞系 MCF-7为对照,用 RNA 干扰技术抑制 ER 阴性乳腺癌细胞系 MDA-MB-231中 PCDGF 基因的表达,观察抑制前后雌激素依赖性的变化。结果 PCDGF 在4株乳腺癌细胞系中均有不同程度的表达,其中在 MDA-MB-435s 中表达量最高,PCDGF 高表达的乳腺癌细胞系的雌激素依赖性较高,PCDGF shRNA 可以有效抑制乳腺癌细胞系 MCF-7和 MDA-MB-213中 PCDGF 的表达(抑制率分别为81.1%和86.7%)。MDA-MB-231细胞系雌激素依赖性增加的程度高于 MCF-7细胞系(P<0.05)。结论 PCDGF 高表达于 ER 阴性乳腺癌细胞,抑制其表达可能会更好的逆转内分泌治疗的耐药性。
- 石岚宋海平刘春萍黄韬
- 关键词：受体雌激素内分泌治疗
