国家公益性行业科研专项(200803016)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 相关作者：陆承平王贵平余炜烈李春玲孙俊颖更多>>
- 相关机构：南京农业大学广东省农业科学院华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项广东省粤港关键领域重点突破项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- H1N1亚型猪流感病毒重组HA1蛋白iELISA方法的建立被引量：1
- 2013年
- 将合成的猪流感病毒(SIV)H1N1 HA1片段插入原核表达载体pET28b(+),构建重组表达质粒pET28b(+)-H1HA1。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,诱导表达HA1蛋白。以HA1重组蛋白作为包被抗原,建立了间接ELISA方法用于检测SIV H1N1抗体。用该方法检测猪瘟病毒(HCV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和SIV H3N2阳性血清反应呈阴性。批内和批间重复性试验结果变异系数均值分别为2.76%和5.28%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。对200份血清样品进行检测,检测结果阳性率为47%,与标准试剂盒检测结果对比,符合率为85%,表明本试验建立的间接ELISA方法具有较高的敏感性,适于大规模检测SIV H1N1血清抗体的流行病学调查。
- 许家荣刘世超陆承平
- 关键词：间接ELISA
- 猪链球菌扁桃体分离株的毒力因子分布特征与致病性被引量：10
- 2009年
- 本研究设计并合成7对引物,用PCR方法对猪链球菌7种主要毒力因子,包括谷氨酸脱氢酶(gdh)、溶血素(sly)、胞外蛋白因子(ef)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、纤连蛋白/血纤蛋白原结合蛋白(fpbs)、三磷酸甘油醛脱氢酶(gadph)和毒力相关序列orf2进行检测,分析了29株猪链球菌扁桃体分离株的毒力因子分布特征。在被检的25株2型菌株中,共检测出7个基因型。其中10株(40%)的基因型为cps2/gdh+/sly+/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,7株(28%)表现为cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,4株(16%)表现为cps2/gdh+/sly-/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+,基因型表现为cps2/gdh+/sly+/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2-、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp+/fbps+/gadph+/orf2-、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp*/fbps+/gadph+/orf2+、cps2/gdh+/sly-/ef-/mrp-/fbps-/gadph+/orf2-各1株;1株猪链球菌7型(SS7)分离株,基因型表现为cps7/gdh+/sly+/ef-/mrp-/fbps+/gadph+/orf2+;3株猪链球菌9型(SS9)扁桃体分离株,均表现为cps9/gdh+/sly-/ef-/mrp-/fbps+/gadph+/orf2+。可见我国SS分离株的毒力基因分布较为复杂,而且SS2的优势流行菌株是同时具有多种毒力因子的高致病菌株。通过对不同毒力基因型毒株对西藏小型猪的感染试验发现:毒力基因型为cps2/gdh+/sly-/ef+/mrp+/fbps+/gadph+/orf2+的健康扁桃体分离株SH06-21D对西藏小型猪有较强的致病性,仅次于标准株HA9801,而基因型为sly-/ef-/mrp-/fbps-/gadph+/orf2-的健康扁桃体分离株GZ06-122B对西藏小型猪不表现明显的致病性。
- 李春玲余炜烈王贵平贾爱卿孙俊颖陆承平
- 关键词：猪链球菌毒力因子基因型PCR
- 猪链球菌2型溶血素基因缺失菌株的构建及生物学特性的研究被引量：6
- 2010年
- 溶血素(SLY)在猪链球菌2型(SS2)侵入和裂解细胞的过程中发挥重要作用,被认为是SS2的一种重要的毒力相关因子。为了探讨SLY在2005年中国四川资阳分离强毒株SS205ZY致病过程中的作用,作者利用同源重组基因敲除法成功构建了SS205ZY的sly基因敲除突变菌株(Δsly)。并比较了菌株的溶血能力以及对小鼠的致病力。结果表明sly基因敲除后可导致猪链球菌裂解红细胞的能力显著下降,对小鼠的致病力也有一定程度的减弱,但仍表现较高的致病力。本研究结果提示SLY是猪链球菌裂解细胞的重要毒力相关因子,但造成SS205ZY的高致病性很显然与多种毒力相关因子的协同作用有关。
- 王雅张安定李冉胡攀刘成陈焕春金梅林
- 关键词：猪链球菌2型溶血素溶血活性致病力
