浙江省自然科学基金(M303743)
- 作品数：6 被引量：8H指数：3
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- 相关机构：浙江大学医学院附属第一医院杭州师范大学浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HBsAg重组腺病毒转染的树突状细胞诱导BALB／c小鼠抗HBV免疫的研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究HBsAg重组腺病毒转染的小鼠树突状细胞(DC)体内外免疫刺激活性和诱导小鼠抗HBV免疫的特点。方法BALB／c小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染HBsAg重组腺病毒Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,流式细胞术分析DC的表型,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC的刺激活性;或与pcDNA3．1(+)-S质粒分别免疫小鼠后,LDH法测定脾细胞CTL活性,放免法检测血清抗- HBs;流式细胞术分析体外自体MLR中及免疫后小鼠脾脏T细胞内细胞因子。结果DC／Ad-S、DC／HBsAg和各对照组DC之间的表型和MLR差异无统计学意义,并均刺激TH和Tc分泌IFN-γ。DC／Ad-S免疫后2周能诱导比DNA疫苗更强产生IFN-γ的TH(P<0．05),以及比DC／HBsAg和DNA疫苗更强分泌IFN-γ的Tc(均P<0．01)和特异性CTL(P<0．05,P<0．01)。但DC／Ad-S和DC/HBsAg诱导的CTL反应及Tc分泌IFN-γ在免疫后4周均明显减弱,且诱导抗-HBs作用弱于DNA疫苗。结论HBsAg重组腺病毒转染的DC比HBsAg冲击的DC及DNA疫苗能诱导更强的TH1／Tc1(Ⅰ型)细胞免疫和特异性CTL反应,是诱导抗HBV细胞免疫的有效刺激细胞。
- 黄茵陈智贾红宇吴伟蔡玲斐周承
- 关键词：乙肝表面抗原树突状细胞腺病毒细胞毒性T淋巴细胞
- 单链抗体在抗肿瘤和抗感染免疫治疗中的应用被引量：3
- 2007年
- 单链抗体(single-chain antibody fragment,scFv)是保持了亲本抗体的抗原识别特异性及亲和活性的最小功能性抗体片段,其良好的可塑性及广泛作用已使之成为研究的热点。scFv相关的研究成果不仅改进了已有的肿瘤和病毒感染诊治方法,还提出了新颖的抗肿瘤、抗感染思路,如靶向肿瘤新生血管及细胞外基质相关蛋白的提出改变了以往仅针对肿瘤细胞的狭隘治疗思维。文章综述了scFv在抗肿瘤和抗感染方面的研究及应用。
- 田锋彭国平
- 关键词：单链抗体肿瘤
- HBsAg重组腺病毒载体的构建及在树突状细胞的表达被引量：3
- 2006年
- 目的构建能高效转导HBsAg基因的重组腺病毒Ad-S,证实其能在小鼠树突状细胞内表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTMXL腺病毒载体系统,首先将HBV S基因克隆到p-shuttle-CMV形成重组穿梭载体,用PmeⅠ酶切使之线性化,电转化到BJ5183-AD-1细胞中形成重组腺病毒Ad-S质粒,后者以PacⅠ酶切线性化,转染到AD293细胞包装为重组腺病毒Ad-S。Ad-GFP或Ad-S以MOI为100转染经GM-CSF、IL-4和TNF-α等细胞因子诱导培养的小鼠骨髓来源的树突状细胞,用流式细胞仪分析细胞荧光表达,Western blot、RIA和ELISA法检测HBsAg的表达。结果PCR、序列测定和酶切鉴定证明HBsAg重组腺病毒Ad-S构建正确,扩增到的病毒颗粒滴度为108/ml;流式细胞仪分析细胞荧光表达率为(92.93±2.35)%,荧光强度达236.67±45.72;Western blot、RIA和ELISA法均检测到Ad-S转染的树突状细胞能表达HBsAg。结论HBsAg重组腺病毒Ad-S构建正确并能高效转染树突状细胞和表达HBsAg,为进一步研究腺病毒介导HBsAg基因修饰的DC疫苗的免疫治疗作用奠定了基础。
- 黄茵陈智贾红宇蔡玲斐
- 关键词：乙型肝炎表面抗原树突状细胞腺病毒基因转染
- 新型负性共刺激分子-BTLA的研究进展
- 2008年
- BTLA（Band Tlymphocyte attenuator）是近年发现的免疫球蛋白表面分子家族成员，其与细胞毒T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）、程序坏死因子-1（PD-1）构成了一组抑制性受体，主要在T、B淋巴细胞上表达。BTLA4与其配体结合后，对活化的T细胞可产生抑制效应，从而防止过强的细胞免疫应答，维持耐受，保护机体免受自身免疫反应的损伤。目前对于BTLA的配体，以及BTLA与配体相互作用的确切机制尚未完全明确，故就近年来关于BTLA的分子结构，表达与分布情况，配体分子，及其在免疫应答中作用的研究进展作一综述。
- 彭国平王明陈智
- 关键词：BTLAT淋巴细胞免疫应答
- HBSAg基因修饰的树突状细胞诱导HBV转基因小鼠的免疫应答被引量：3
- 2006年
- 目的探讨HBsAg重组腺病毒Ad-S转染的小鼠树突状细胞(DC)诱导HBV转基因(Tg)小鼠免疫应答的作用特点及其可能的治疗作用。方法Tg小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,与pcDNA3．1(+)-S质粒分别免疫Tg鼠,用流式细胞术、乳酸脱氢酶释放法、酶联免疫分析(ELISA)、荧光定量聚合酶链反应(PCR)等分别检测脾脏T细胞内细胞因子和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性、血清HBsAg、抗-HBs、HBV DNA及丙氨酸转氨酶(ALT)水平；病理和免疫组化分析肝脏组织学及HBsAg和HBcAg表达。结果免疫后1～2周,DC/Ad-S比DC/HBsAg和pcDNA3．1(+)-S诱导Tc分泌干扰索γ(IFN-γ)和特异性CTL均显著增强,而DC/ HBsAg组CTL较pcDNA3．1(+)-S组增强(P＜0．05)；DC/HBsAg免疫后1、2、4周CTL迅速减弱,DC/Ad-S在1、2周CTL差异不明显,但至4周时明显减弱。免疫后1～4周,对Tg鼠血清HBsAg、HBV DNA及肝组织HBcAg和HBsAg表达的抑制作用最强为DC/Ad-S免疫,其次为DC/HBsAg,显著强于pcDNA3．1(+)-s(P＜0．05或P＜0．01)。肝脏组织学、血清抗-HBs和ALT水平各组差异无统计学意义。结论Ad-S转染的DC比HBsAR冲击的DC和DNA疫苗诱导更强的Tcl和CTL应答,能较迅速抑制HBV转基因小鼠血清HBsAg、HBV DNA和肝脏HBcAg和HBsAg表达。
- 黄茵陈智贾红宇吴炜蔡玲斐周承
- 关键词：树突细胞腺病毒科
- CTLA-4调节作用的机制及其在抗感染免疫治疗中的应用研究
- 2005年
- 适应性免疫的T细胞必须谨慎调节以防止发生对自身成分不必要的应答。一个重要的外周调节作用是共刺激,包括CD28激活信号和CTLA-4抑制信号,它们与T细胞抗原受体(TCR)信号协同决定T细胞对抗原的应答结果。本文主要论述近年CTLA-4调节作用的细胞和分子机制的研究进展及其作为感染性疾病免疫治疗策略的应用研究。
- 黄茵陈智
- 关键词：CTLA-4免疫治疗抗感染T细胞抗原受体疾病免疫共刺激
