博士科研启动基金(2011ZD23)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：吴胜昔蔡家利曾政吴玉章任康康更多>>
- 相关机构：重庆理工大学重庆市动物疫病预防控制中心第三军医大学更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白的原核表达及单克隆抗体制备被引量：1
- 2013年
- 目的获得原核表达的PRRSV N蛋白,并制备N蛋白的单克隆抗体。方法将已构建的含有PRRSV N蛋白基因的重组表达载体阳性菌,在37℃条件下,用终浓度1 mmol/L的IPTG诱导表达4 h。经SDS-PAGE分析,表明N基因在大肠杆菌中得到了高效表达。经镍柱亲和层析纯化,以此蛋白作为抗原采用长程免疫法免疫Balb/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合。结果获得了纯度较高、免疫学活性较好的N蛋白,细胞融合率为81.3%。建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体。初检阳性率为17.3%,经2次亚克隆反复筛选获得了2株分泌抗PRRSV单抗的杂交瘤细胞株,命名为4G10和2F9。ELISA证实所获得的单抗是特异性针对PRRSV共同的抗原表位,4G10和2F9经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体。结论成功制备出高效价的抗PRRSV N蛋白的单克隆抗体,为建立一种快速、特异的PRRSV检测方法奠定了基础。
- 吴胜昔邵烈刚曾政陈晶刘人菊袁丽萍熊仲良蔡家利
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白单克隆抗体
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白B细胞表位预测与分析
- 2014年
- 为了预测高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP—PRRSV）GP5蛋白B细胞表位，试验以HP—PRRSVGP5基因组序列为基础，采用Kyte—Doolittle方案、Emini方案和Jameson—wolf方案，辅以Gamier—Robson方法、Chou—Fasman方法和Karplus—Schulz方法对HP—PRRSVGP5蛋白的二级结构柔性区域进行分析，预测HP—PRRSVGP5蛋白B细胞表位，并与相关文献报道的表位进行比对。结果表明：最有可能的B细胞表位位于GP5蛋白N端第31～37，51～56，136～141，148～156，163—166，193～200区段，并发现了新的表位。
- 吴胜昔徐斌蔡家利吴玉章
- 关键词：GP5蛋白B细胞表位
- 猪圆环病毒2型CAP蛋白B细胞表位预测与分析被引量：1
- 2014年
- 基于PCV2 CAP蛋白的氨基酸序列，采用Kyte-Doolittle的亲水性方案、Emini方案、Karplus方案和Jameson-wolf抗原指数方案，辅以对PCV2 CAP蛋白的二级结构柔性区域分析，并结合吴玉章氨基酸抗原指数计算方法预测CAP蛋白的B细胞表位。结果表明，最有可能的B细胞优势表位位于CAP蛋白N端第4～18，23～28，32～41，57～64，96～103，175～182区段和第224～233区段。本研究用多参数预测PCV2 CAP蛋白的B细胞表位，为多肽疫苗的设计提供理论依据。
- 吴胜昔曾政蔡家利任康康王远强梁望旺蔺露吴玉章
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白B细胞表位
