国家自然科学基金(81273816)
- 作品数：15 被引量：154H指数：8
- 相关作者：李劲平曾英杨岩冰莫新民李伟娟更多>>
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- 壮骨止痛方抗骨质疏松症组方合理性实验研究被引量：3
- 2016年
- 目的观察壮骨止痛胶囊拆方组治疗去卵巢骨质疏松型大鼠的作用特点,探讨其组方的合理性。方法 SD雌性大鼠,分为假手术组、模型组、壮骨止痛胶囊组、补阴组、补阳组、活血组,处理13周后检测各组大鼠L2~L4腰椎,右侧股骨骨密度,检测胫骨骨生物力学变化及血清E2水平。将60只小鼠随机分为正常组、模型组、壮骨止痛胶囊组、补阴组、补阳组、活血组。连续给药10天后,正常组小鼠腹腔注射生理盐水（0.0002L/10g）,其它各组小鼠腹腔注射致痛剂（0.6%醋酸溶液,0.0002L/10g）,记录疼痛潜伏期（开始扭体的时间）和15min内扭体次数。结果与模型组比较,壮骨止痛胶囊组、补阴组、补阳组均能改善腰椎及股骨骨密度,具有显著或非常显著统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组比较,壮骨止痛胶囊组及各拆方组均能提高胫骨的最大抗弯强度与最大弹性应力,改善骨生物力学性能,具有显著或非常显著统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组比较,壮骨止痛胶囊组,补阴组,补阳组均能提高血清中E2的浓度,具有非常显著统计学意义（P〈0.01）;与模型组小鼠比较,壮骨止痛胶囊组能显著延长小鼠庝痛潜伏期和降低扭体次数（P〈0.05）,方中活血组能显著延长小鼠庝痛潜伏期和降低扭体次数（P〈0.05）。结论壮骨止痛胶囊拆方组各组均有改善去卵巢骨质疏松型大鼠骨生物力学特性的功效,补阳组及补阴组可增加去卵巢骨质疏松型大鼠骨密度及提高血清中E2浓度的作用,补阳组功效优于补阴组。活血组药物对于醋酸扭体庝痛小鼠具有非常显著镇痛作用,三组药物共奏补益肝肾、壮骨止痛的功效。
- 杨岩冰曾英李劲平雷晓明王文杰杨琳刘珊莫新民
- 关键词：壮骨止痛方骨质疏松症组方合理性
- 壮骨止痛方调节OPG/RANKL平衡抗绝经后骨质疏松作用被引量：14
- 2017年
- 目的研究壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和NF-?B受体活化因子(receptor activator of NF-?B,RANK)/RANK配体(RANK ligand,RANKL)的影响,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法 72只SD大鼠按体质量随机抽出假手术组12只,造模组60只,造模组采用双侧去卵巢法造模,假手术组只切除卵巢周围相应等量的脂肪。术后造模组大鼠按体质量随机分为模型组、壮骨止痛方高剂量组(13.2 g·kg^(-1))、中剂量组(6.6 g·kg^(-1))、低剂量组(3.3 g·kg^(-1))和戊酸雌二醇组,每组12只。术后第5天开始药物干预,模型组和假手术组给予相应体积的纯净水,持续13周。给药结束后,股骨进行病理组织检测,酶联免疫法检测大鼠血清和骨组织OPG、RANKL含量,免疫组化法检测大鼠骨组织OPG、RANKL蛋白表达。结果模型组大鼠股骨骨小梁面积率显著降低,血清和骨组织OPG含量显著下降,RANKL含量显著增加,OPG/RANKL比值显著降低,骨组织OPG蛋白表达显著下调,RANKL蛋白表达显著增强,OPG/RANKL比值显著降低,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。壮骨止痛方各剂量组大鼠股骨骨小梁面积率显著增加,显示其具有良好的抗骨质疏松作用;血清和骨组织OPG含量显著增加,RANKL含量显著下降,OPG/RANKL比值升高;骨组织OPG蛋白表达显著增强,RANKL蛋白表达显著下调,OPG/RANKL比值显著升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论去卵巢大鼠OPG/RANKL比值显著降低,壮骨止痛方能显著升高去卵巢大鼠OPG/RANKL比值,调节OPG/RANKL平衡是壮骨止痛方抗绝经后骨质疏松的作用机制之一。
- 甘国兴李劲平刘毓胡德志张国民汤海燕
- 关键词：骨质疏松壮骨止痛方骨保护素RANKLOPG/RANKL
- 从ERα/RANK通路探讨淫羊藿苷抑制破骨细胞分化作用被引量：48
- 2017年
- 目的:通过检测淫羊藿苷对破骨细胞诱导分化过程中雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα),核转录因子-κB受体(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)mRNA表达的影响,探讨淫羊藿苷抑制破骨细胞分化作用机制。方法:50μg·L^(-1)核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)体外诱导RAW264.7细胞分化成破骨细胞,利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和骨吸收陷窝对破骨细胞进行鉴定。用不同浓度的淫羊藿苷(1×10-5,1×10-6,1×10-7mol·L^(-1))分别处理5 d和9 d后,进行TRAP染色和骨吸收陷窝分析,处理6 d后,利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9),组织蛋白酶K(cathepsin-K,CK),TRAP,ERα,RANK mRNA表达水平,用雌激素受体阻断剂ICI182780阻断雌激素受体通路验证淫羊藿苷对ERα/RANK通路的调节作用。结果:与RANKL诱导组比较,淫羊藿苷可以显著抑制破骨细胞形成数量和骨吸收陷窝数(P<0.05,P<0.01),同时显著下调破骨细胞MMP-9,CK,TRAP,RANK mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01),上调ERαmRNA表达水平(P<0.05)。ICI182780可抑制淫羊藿苷上调破骨细胞的ERαmRNA表达水平和下调RANK mRNA表达水平的作用(P<0.05)。结论:淫羊藿苷能抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化和骨吸收活性,该作用可能通过上调破骨细胞的ERαmRNA表达进而下调RANK mRNA表达实现的。
- 李伟娟谢保平石丽颖李劲平曾英张杰雷晓明
- 关键词：淫羊藿苷RAW264.7细胞破骨细胞雌激素受体Α
- 基于雌激素信号通路的壮骨止痛胶囊治法组方机理探讨被引量：2
- 2017年
- 目的通过检测壮骨止痛胶囊不同治法配伍对去卵巢骨质疏松大鼠骨组织E_2和ER_β的影响,探讨壮骨止痛胶囊的治则组方机理,为临床治疗绝经后骨质疏松症的配伍组方提供指导。方法根据壮骨止痛胶囊补益肝肾、活血止痛治法将处方拆方分为补阳组、补阴组、活血组、阴阳双补组、活血补阳组、活血补阴组。90只8月龄SD雌鼠随机分为假手术组、模型组、壮骨止痛胶囊组、补阳组、补阴组、活血组、阴阳双补组、活血补阳组、活血补阴组,每组10只。假手术组大鼠保留卵巢而只去除卵巢附近部分脂肪组织,其余各组雌鼠双侧去卵巢复制绝经后骨质疏松动物模型,术后1周灌胃给药18周,最后1次给药1 h后腹腔注射水合氯醛麻醉(0.35ml/100g),腹主动脉放血处死,取左股骨检测E_2水平,取右股骨检测骨密度和骨生物力学,快速取右胫骨RT-PCR检测ER_βmRNA的表达,取左胫骨病理切片免疫组化染色检测ER_β蛋白水平。结果活血组对骨密度没有显著影响,但能显著增强骨生物力学,其它配伍组均能显著增加骨密度和改善骨生物力学(P<0.05或P<0.01),其改善作用从高到低依次为全方组>阴阳双补组>活血补阳组>活血补阴组>补阳组>补阴组>活血组。除活血组外的其它各配伍组均显著提高模型大鼠骨组织E_2水平(P<0.05或P<0.01)。所有配伍组能显著增强骨组织ER_β的基因和蛋白表达(P<0.05或P<0.01),作用依次为全方组>阴阳双补组>活血组>活血补阳组>活血补阴组>补阳组>补阴组。结论壮骨止痛胶囊中的活血组药物主要增强骨组织对雌激素的敏感性,补阳组和补阴组药物主要促进机体合成雌激素,提高骨组织的雌激素水平,同时提高骨组织的雌激素敏感性。治疗绝经后骨质疏松治法以补益肝肾为主,辅以活血化瘀,有助于取得更好疗效。
- 曾英章文娟李伟娟李劲平
- 关键词：壮骨止痛胶囊雌激素治法
- 补骨脂素通过调控CD4^+T细胞分化抑制RAW264.7向破骨细胞分化和骨吸收被引量：20
- 2018年
- 探讨补骨脂素（psoralen）是否通过调控CIM^＋T细胞分化抑制RANKL诱导RAW264．7向破骨细胞分化及骨吸收作用，初步阐明补骨脂素抗骨质疏松作用的骨免疫学机制。采用免疫磁珠分选法从Balb／c小鼠脾脏细胞分离制备CD4^＋T细胞，分为空白组和补骨脂素组接种于74孑L板，加入补骨脂素诱导培养3d，第4天收集各组细胞用于共培养实验。共培养实验分为RAW264．7细胞组（a组）、RAW264．7细胞^＋psoralen-^＋CD4^＋T细胞组（b组）、RAW264．7细胞＋补骨脂素组（终浓度为10μmol·L^-1，C组）、RAW264．7细胞＋psoralen^＋CIM^＋T细胞组（d组）等4组，共培养5d后，TRAP染色检测破骨细胞数目，共培养8d后，骨片用甲苯胺蓝染色评价骨吸收情况，RT．PCR检测CIM^＋T细胞RORTt，Foxp3，IL-17，TNF-α，TGF-β和IL-10等基因的表达，以及破骨细胞相关基因MMP-9，TRAP和Cat-K的表达，ELlSA试剂盒检测1L-17，TNF-α，TGF-β和IL-10等细胞因子的水平。结果显示，补骨脂素显著促进CD4^＋T细胞的Foxp3，TGF-β和IL-10的表达，抑制CIM’T细胞的RORTt，IL-17和TNF-α的表达。psoralen-CD4＋T细胞能显著促进RANKL诱导RAW264．7向破骨细胞分化，psoralen＋CIM＋T细胞能显著抑制RANKL诱导RAW264．7向破骨细胞分化及骨吸收作用。补骨脂素通过促进CD4^＋T细胞中CD4^＋CD25’Treg／Thl7平衡向CD4^＋CD25^＋Treg发展，从而抑制RANKL诱导RAW264．7向破骨细胞分化及骨吸收作用。
- 李劲平谢保平章文娟石丽颖李伟娟曾英甘国兴厉宇红
- 关键词：补骨脂素CD4^+T细胞破骨细胞辅助性T细胞17
- 壮骨止痛胶囊抗绝经后骨质疏松的ERRα作用机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的通过检测ERRα特异抑制剂XCT790对壮骨止痛胶囊(Zhuanggu Zhitong Capsule,ZGZTC)抗骨质疏松作用的影响,探讨ZGZTC抗骨质疏松作用机理。方法 70只8月龄SD大鼠随机分为假手术组、模型组、XCT790组、ZGZTC组、XCT790高剂量+ZGZTC组、XCT790中剂量+ZGZTC组、XCT790低剂量+ZGZTC组,每组10只,切除卵巢后1周,XCT790组每隔3 d皮下注射XCT790橄榄油溶液,非XCT790组皮下注射无菌橄榄油,ZGZTC组每天灌胃给药1次,连续12周,最后一次给药后1 h腹腔注射水合氯醛麻醉,腹主动脉放血处死,取右股骨检测骨密度和骨生物力学,左股骨ELISA检测ERRα蛋白水平,左胫骨RT-PCR检测ERRαm RNA的表达,右胫骨病理切片免疫组化染色检测ERRα蛋白水平。结果 XCT790显著降低去卵巢大鼠骨密度和骨生物力学强度(P<0.05),轻微降低骨组织ERRα表达水平。ZGZTC显著提高去卵巢大鼠骨密度和骨生物力学强度(P<0.05),且该作用可被XCT790剂量依赖性降低。ZGZTC能显著增强去卵巢大鼠骨组织ERRα表达水平(P<0.05),且这种促进作用可被XCT790明显降低。结论 ZGZTC可通过调节雌激素相关受体信号通路发挥抗骨质疏松作用。
- 李劲平李伟娟曾英章文娟莫新民
- 关键词：壮骨止痛胶囊雌激素雌激素相关受体
- 壮骨止痛方对去势雌鼠ERRα基因表达及血清E_2水平的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:从雌激素/雌激素相关受体信号通路探讨壮骨止痛方抗绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:将60只雌性SD大鼠建立去卵巢骨质疏松症病理模型,将其随机分为壮骨止痛方高、中、低剂量组,模型组,雌二醇组,每组12只;另将12只雌性SD大鼠只切除卵巢附近等体积的脂肪组织作为假手术组。各组分别采用相对应药物进行灌胃治疗,治疗13周后各组随机选取6只雌鼠提取股骨组织mRNA样本进行PCR反应检测ERRα基因的表达,选取8只雌鼠经腹主动脉采血,凝固后离心分离出血清,应用雌二醇(E2)ELISA试剂盒检测血清E2水平。结果:与假手术组比较,模型组E2浓度及骨组织ERRα基因表达均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,壮骨止痛方高、中剂量组及阳性对照组血清E2浓度及骨组织ERRα基因表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),壮骨止痛方低剂量组较模型组升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:壮骨止痛方通过同时提高去势雌鼠血清E2水平和骨组织ERRαmRNA表达来发挥抗绝经后骨质疏松症的作用。
- 王文杰曾英李劲平张国民刘珊杨琳杨岩冰莫新民
- 关键词：绝经后骨质疏松症壮骨止痛方
- 壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠CGRP及β_2-AR的影响
- 2018年
- 目的探讨壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠血清降钙素基因相关肽(CGRP)及骨组织β_2-AR表达的影响。方法 72只SPF级雌性SD大鼠随机选出12只,摘除卵巢周围相应质量脂肪后作为假手术组。其余60只采用双侧去卵巢法制备骨质疏松病理模型,随机分为模型组、壮骨止痛方高剂量组(13.2 g/kg)、中剂量组(6.6 g/kg)、低剂量组(3.3 g/kg)和戊酸雌二醇组(2.1×10^(-5)g/kg),每组各12只。模型组及假手术组给予等体积纯净水,均干预13周。采用ELISA法检测血清CGRP含量,免疫组化法检测骨组织β_2-AR蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血清CGRP含量显著减少,骨组织β_2-AR蛋白表达显著下调,差异均有高度统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,戊酸雌二醇组及壮骨止痛方各剂量组大鼠血清CGRP含量显著增加,骨组织β_2-AR蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。壮骨止痛方不同剂量组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论壮骨止痛方能够促进去卵巢骨质疏松模型大鼠CGRP表达,上调骨组织β2-AR蛋白表达,这可能是其抗骨质疏松的作用机制之一。
- 甘国兴刘毓李劲平张国民易仲媛
- 关键词：骨质疏松壮骨止痛方降钙素基因相关肽
- 女贞子-枸杞子对去势雌鼠血清中IL-10、IL-17水平的影响被引量：5
- 2017年
- 目的:观察"女贞子-枸杞子"对去卵巢骨质疏松症大鼠血清中IL-10、IL-17水平的影响,探讨补阴药防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:3月龄SD雌性大鼠60只,分为假手术组、模型组、阳性对照组、壮骨止痛胶囊组、女贞子-枸杞子组,对除假手术组外的其余组大鼠去卵巢3个月,制备绝经后骨质疏松症病理模型,手术后1周灌胃给药,连续13周。检测比较各组大鼠血清IL-10、IL-17水平。结果:与模型组比较,壮骨止痛胶囊组、女贞子-枸杞子组血清IL-10水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);各给药组IL-17水平均有明显降低趋势,但与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:女贞子-枸杞子能明显升高骨质疏松模型雌鼠血清IL-10水平,且能小幅度提高其IL-17水平,从而达到抗绝经后骨质疏松的目的。
- 张佳宁雷晓明李劲平杨岩冰李伟娟章文娟
- 关键词：女贞子枸杞子IL-10IL-17
- 补骨脂-淫羊藿药对对去卵巢骨质疏松型大鼠血清IL-10、TNF-α水平的影响被引量：11
- 2016年
- 目的:观察补骨脂-淫羊藿药对对去卵巢骨质疏松型大鼠血清中IL-10、TNF-α水平的影响,探讨补骨脂-淫羊藿药对防治绝经后骨质疏松症的作用机制。方法:3月龄SD雌性大鼠40只,分为假手术组、模型组、壮骨止痛胶囊组、阳性对照组、补骨脂-淫羊藿药对组,采用去卵巢3个月制备绝经后骨质疏松大鼠模型,连续灌胃13周后检测比较各组大鼠血清IL-10、TNF-α水平。结果:与模型组比较,补骨脂-淫羊藿药对组能提高骨质疏松模型大鼠血清IL-10水平,但差异无统计学意义(P>0.05);补骨脂-淫羊藿药对组能显著降低模型大鼠血清TNF-α水平,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:补骨脂-淫羊藿药对可以抑制骨吸收,调节成骨细胞与破骨细胞的功能活动,使成骨细胞活动加剧,破骨细胞活动减弱,从而使骨吸收/骨形成代谢保持动态平衡。
- 杨岩冰曾英李劲平雷晓明王文杰杨琳刘珊莫新民
- 关键词：绝经后骨质疏松症
