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CML细胞抗原相关TCR Vα13/Vβ21和Vα18/Vβ21寡克隆T细胞及其CDR3序列特点被引量：3: 2008年; 目的:分析慢性粒细胞白血病(CML)病人的克隆性增殖T细胞及其CDR3序列的特点。方法:利用RT-PCR和基因扫描分析1例CML患者外周血单个核细胞中的TCR Vα和Vβ基因的互补决定区(CDR3),了解各Vα和Vβ亚家族的限制性表达情况和T细胞克隆性增殖特点,寡克隆的PCR产物再进行序列分析。结果:该病人外周血T细胞表达18个TCR Vα和12个TCR Vβ亚家族,其中Vα13、Vα18、Vβ1和Vβ21亚家族呈寡克隆性。CDR3序列分析获得3个TCR克隆基因序列,分别为Vα13NJα49、Vα18NJα50和Vβ21NDβNJβ2.7。结论:获得1例CML病人外周血克隆性增殖αβ+T细胞的3个TCR基因CDR3序列,提示病人可能存在与CML细胞抗原相关的Vα13/Vβ21或Vα18/Vβ21T细胞克隆。; 查显丰李扬秋陈少华杨力建卢育洪张涛; 关键词：基因扫描 CDR3 克隆性

CD3ζ链基因在脐带血T细胞及其CD4＋和CD8＋T细胞亚群中的表达特点被引量：9: 2008年; 目的了解脐带血T细胞及其CD4+和CD8+T细胞亚群的信号传导分子CD3ζ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测60例脐带血单个核细胞和12例纯化脐带血CD4+及CD8+T细胞的CD3ζ基因的表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算CD3ζ基因相对mRNA表达量,60例健康成人作为对照。并根据荧光定量PCR熔解曲线特点和序列分析了解CD3ζ基因突变情况。结果全部脐带血和健康成人外周血单个核细胞均表达CD3ζ基因,不同个体CD3ζ基因表达量有所差异,脐带血T细胞CD3ζ基因相对mRNA表达量为6.7%±5.56%,CD4+和CD8+T细胞的CD3ζ基因相对mRNA表达量分别为6.74%±2.0%和6.88%±1.76%,三者CD3ζ基因表达量均明显高于健康成人(P=0.000,P=0.034,P=0.000)。序列分析结果显示尚未发现国外文献所报道的ζ链剪接异构体。结论本研究率先报道了脐带血T细胞及其CD4+和CD8+T细胞亚群的CD3ζ基因mRNA的表达水平,为进一步了解脐带血T细胞免疫学特点提供新的基础资料。; 陈少华李扬秋杨力建陈思林锦绒; 关键词：脐带血 T细胞

多发性骨髓瘤患者外周血T细胞中T细胞受体ξ链基因表达特点被引量：4: 2009年; 目的分析多发性骨髓瘤（MM）患者外周血T细胞中T细胞受体（TCR）ξ链基因表达水平，了解患者T细胞活化过程的相关变化情况。方法采用SYBR Green Ⅰ相对定量PCR方法分别检测24例MM患者和24名健康人的外周血单个核细胞（PBMC）的TCRξ链基因表达情况，以β2微球蛋白基因（β2M）作为内参照，根据相对定量公式（2^-△Ω×100％）分别计算TCRξ链基因表达量。结果MM患者外周血TCRξ链基因表达水平为（1．83±1．72）％，低于健康人的（3．46±2．75）％（P=0．019）。TCRξ链基因表达水平的变化与患者年龄无相关性（r=0．151，P=0．525）。结论首先报道MM患者TCRξ链表达的变化特点，TCRξ链基因表达水平以降低为主，可能与T细胞免疫缺陷有关。; 陈思李扬秋陈少华杨力建; 关键词：多发性骨髓瘤基因实时定量PCR

T-ALL患者外周血TCRγ/δ T细胞的分布和增殖特点被引量：1: 2008年; 目的:了解T细胞急性淋巴白血病(T-cell acute lymphocytic leukemia,T-ALL)患者外周血TCR Vγ和Vδ亚家族T细胞的分布和克隆情况。方法:利用RT-PCR扩增9例T-ALL患者和10例正常人外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个Vδ亚家族基因的互补决定区3(CDR3),了解TCR亚家族Vγ和Vδ亚家族细胞的分布;阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性。结果:9例T-ALL患者3个Vγ亚家族的表达率都明显低于正常人Vγ亚家族的表达率(P<0.05);Vδ亚家族中只有Vδ1和Vδ3的表达率低于正常人(P<0.05)。3例T-ALL患者出现克隆性增殖的γ/δT淋巴细胞。结论:T-ALL患者外周血TCR Vγ和部分Vδ亚家族谱系出现限制性表达和克隆性增殖。同时存在克隆性增殖γδ+ T细胞提示可能为γδ+白血病性T细胞克隆。; 查显丰李扬秋陈少华杨力建李萡郁志; 关键词：克隆性

慢性苯中毒患者外周血TCR Vδ亚家族T细胞分布和克隆性研究被引量：4: 2008年; 目的：了解慢性苯中毒患者外周血T细胞的TCRVδ基因谱系及其克隆性增殖情况。方法：利用RT-PCR方法扩增10例慢性苯中毒患者外周血单个核细胞中8个TCR Vδ基因的互补决定区3（CDR3）,PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果：8例健康人平均表达（6.63±0.52）个Vδ亚家族,外周血中未检测到Vδ4和Vδ5亚家族,慢性苯中毒患者工人表达（1.10±0.57）个Vδ亚家族（1例重度苯中毒工人8个Vδ亚家族均未表达）,外周血中未检测到Vδ1、Vδ3、Vδ4和Vδ8亚家族,与健康人比较有显著性差异（P〈0.01）。6例慢性苯中毒患者存在1-2个Vδα亚家族T细胞出现克隆性增殖。结论：慢性苯中毒患者外周血出现TCR Vδ亚家族倾斜性分布和克隆性增殖T细胞,这可能是苯中毒后所引起的机体特异性免疫反应。; 李萡李扬秋陈少华杨力建余卫刘薇薇陈嘉榆; 关键词：TCR 克隆性T细胞

接触苯及苯中毒工人外周血T细胞中CD3ζ基因的表达与分析被引量：4: 2007年; 目的了解接触苯及苯中毒工人外周血中T细胞信号传导分子CD3ζ基因表达水平。方法利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR分别检测28例苯接触工人、45例苯中毒工人和30例正常人外周血单个核细胞的CD3ζ基因表达情况,以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参,根据相对定量公式(2-△△Ct)计算苯接触、苯中毒工人与正常人CD3ζ基因表达差异倍数。结果根据相对定量公式(2-△△Ct)分析显示苯接触工人外周血CD3ζ基因表达存在3种情况不表达2例(7%)、表达上升18例(64%)和表达下降8例(29%),与正常人CD3ζ基因相比表达上升和下降的倍数分别是19.68±25.24和0.67±0.32。苯中毒工人外周血CD3ζ基因表达情况表达上升31(69%)和表达下降14例(31%),与正常人CD3ζ基因相比表达上升和下降的倍数分别是31.50±29.18和0.52±0.25。与苯接触相比,45例苯中毒工人中18例(40%)CD3ζ基因表达上升,27例(60%)CD3ζ基因表达下降,上升和下降的倍数分别是12.04±4.35和0.29±0.23。结论首次报道接触苯及苯中毒工人中CD3ζ基因表达水平的变化,接触苯及苯中毒工人CD3ζ基因表达低下可能与细胞免疫功能缺陷有一定关系。; 李萡李扬秋杨力建陈少华余卫刘薇薇陈嘉榆; 关键词：苯实时定量PCR

慢性粒细胞白血病病人TCRζ链表达特点被引量：2: 2008年; 目的:建立实时定量PCR方法检测TCRζ链表达水平的方法,了解慢性粒细胞白血病(CML)外周血TCRζ链表达水平。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR,相对定量检测30例CML患者和30例正常人外周血的单个核细胞的TCRζ链表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式:2-△△Ct计算CML病人与正常人TCRζ链表达差异倍数。结果:成功建立SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR检测TCRζ链表达检测技术。18例CML患者TCRζ链出现表达低于正常人,而12例CML患者TCRζ链出现表达高于正常人。结论:CML病人中TCRζ链表达水平可分为表达下调(60%)和表达上调(40%)2组,提示部分CML病人的细胞免疫缺陷可能与其TCRζ链表达下调有关。; 陈思李扬秋陈少华杨力建吴秀丽岑东芝; 关键词：实时定量PCR 白血病髓样慢性

职业性三氯乙烯药疹样皮炎患者周围血T细胞抗原受体Vβ谱系多样性初探被引量：2: 2011年; 目的了解职业性三氯乙烯（TCE）药疹样皮炎（OMLDT）患者周围血T细胞抗原受体（TCR）Vβ亚家族基因谱系及其克隆性增殖情况。方法利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测10名健康人和5例OMLDT患者周围血中24个TCR Vβ基因的互补决定区3（CDR3）。PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度而确定T细胞的克隆性。结果 10名健康人可检出所有24个TCR Vβ亚家族,5例OMLDT患者周围血仅检出1~6个Vβ亚家族阳性产物,平均表达（2.8±1.9）个Vβ亚家族,β亚家族检出数显著少于健康人（P〈0.01）。OMLDT患者周围血中存在克隆性增殖T细胞,其中以Vβ16亚家族出现克隆性增殖的频率较高。结论 OMLDT患者周围血中TCR Vβ谱系发生改变,这可能是接触TCE后机体细胞免疫功能的异常变化。; 左璨粲梁赵佳孙润陆李萡刘薇薇陈少华杨力健陈嘉榆余卫李扬秋; 关键词：TCRVΒ基因克隆性T细胞

APL相关TCR Vα6、Vα10和Vβ23寡克隆T细胞CDR3序列分析被引量：1: 2009年; 目的:分析急性早幼粒细胞白血病(APL)患者外周血TCRVα和Vβ克隆性增殖T细胞及CDR3序列特点。方法:利用RT-PCR法扩增1例APL患者外周血单个核细胞中29个TCRVα基因和24个Vβ基因CDR3,阳性PCR产物进一步经荧光标记和基因扫描分析确定其CDR3长度,了解其克隆性;寡克隆的PCR产物再进行CDR3区序列分析。结果:该例APL患者外周血T细胞分别在TCRVα6、Vα10和Vβ23亚家族中出现寡克隆性增殖T细胞,经序列分析显示TCRVα6、Vα10和Vβ23亚家族基因序列分别为Vα6NJα17、Vα10NJα35和Vβ23NDβ1NJβ2.7,其CDR3区氨基酸序列分别为CAMRENSAGNK,YLCAGDELLWECA,CASSSKWAG-GTYEQY,该3个TCR基因已被GenBank收录(登陆号:EU544946、EU544947和EU647219)。结论:APL患者外周血T细胞出现的TCRVα6、Vα10和Vβ23克隆性增殖T细胞可能是机体对抗白血病细胞所引起的抗原特异性免疫反应;这3个独特TCR重排序列将进一步作为开展APL特异性免疫治疗研究提供资料。; 陈少华李扬秋杨力建周羽竝李萡张学利罗更新; 关键词：APL TCR CDR3 T细胞克隆

铅接触及铅中毒工人外周血T细胞CD3ζ基因的表达特点被引量：7: 2009年; 目的了解铅接触及铅中毒工人外周血中T细胞信号传导分子CD3ζ基因表达水平,为铅接触和铅中毒工人免疫系统损害的机制提供资料。方法利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR分别检测10例铅接触工人、6例铅中毒工人和20例正常人外周血单个核细胞的CD3ζ基因表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,根据相对定量公式(2-△Ct)计算铅接触、铅中毒工人与正常人CD3ζ基因表达水平差异。结果正常人、铅接触和铅中毒工人外周血CD3ζ基因表达水平分别为(3.01±2.11)、(11.4±13.3)和(2.42±3.01)。与正常人相比,铅接触工人外周血CD3ζ基因表达上升(P<0.05)。与铅接触工人相比,铅中毒工人CD3ζ基因表达下降(P<0.05)。结论铅接触及铅中毒工人中外周血T细胞CD3ζ基因表达异常,提示机体接触铅后T细胞活化过程存在障碍。; 刘思初潘焕玉徐媛李萡杨力建刘薇薇陈嘉榆; 关键词：铅基因实时定量PCR

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