国家自然科学基金(81172416)
- 作品数：12 被引量：28H指数：3
- 相关作者：张世忠卢国辉肖振勇蒋春梅马国亮更多>>
- 相关机构：南方医科大学南昌大学第一附属医院广州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- 微小RNA对帕金森病中线粒体功能的调控研究被引量：3
- 2015年
- 帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是常见的慢性进行性神经系统退行性疾病，年龄是其独立危险因子，病理改变以选择性中脑黑质多巴胺能神经元丧失，残余多巴胺能神经元内出现嗜酸性包涵体（Lewy小体）和纹状体多巴胺含量明显减少为主要特征。
- 叶勇义朱志远何骁征卢国辉张世忠
- 关键词：帕金森病微小RNA线粒体致病基因
- miR-124＊和laminin-8β1链在脑胶质瘤中的表达及相互调控作用
- 2014年
- 目的 探讨miR-124＊和laminin-8 β1链在不同恶性程度人脑胶质瘤中的表达,分析两者间潜在的表达调控关系. 方法 Western blotting、实时荧光定量PCR分别检测南方医科大学珠江医院神经外科自201 1年1月至2012年12月间手术切除并经病理证实的30例人脑胶质瘤标本和2例正常脑组织标本中laminin-8 β1链蛋白、miR-124＊的表达.构建质粒载体psiCHECKTM-2-野生型（WT） laminin β1链3＇非翻译区（3＇UTR）和psiCHECKTM-2-突变型（MUT）laminin β1链3＇UTR,分别同miR-124＊模拟物、miRNA模拟物阴性对照;miR-124＊抑制剂、miRNA抑制剂阴性对照共转染至U87细胞中,转染空载体psiCHECKTM-2作为空白对照.转染48 h后采用双荧光素酶报告检测系统检测各组细胞的荧光强度.nu/nu裸鼠皮下注射U87细胞构建胶质瘤动物模型,miR-124＊模拟物原位注射治疗3周后Western blotting检测肿瘤中laminin-8 β1链蛋白表达,免疫组化染色观察血管内皮细胞标记物CD31的表达. 结果 Western blotting显示Laminin-8蛋白在高级别胶质瘤（WHOⅢ/Ⅳ级）中呈现高表达,而在低级别胶质瘤（WHO Ⅰ/Ⅱ级）中表达不明显;实时荧光定量PCR显示miR-124＊在正常脑组织、WHO Ⅰ级、Ⅱ级、高级别胶质瘤中表达依次降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.双荧光素酶报告实验显示,与psiCHECKTM-2-WTlaminin β1链3＇UTR质粒共转染时,miR-124＊模拟物组荧光强度（2.13±0.25）明显弱于miRNA模拟物阴性对照组（2.71±0.08）,而miR-124＊抑制剂组（3.18±0.22）明显强于miRNA抑制剂阴性对照组（2.70±0.17）,差异有统计学意义（P＜0.05）.动物模型实验结果提示miR-124＊治疗组较对照组肿瘤laminin-8 β1链及CD31表达均明显降低. 结论 miR-124＊通过负调控laminin-8 β1链的表达影响胶质瘤的恶性程度。
- 卢国辉蒋春梅段剑周东伟洪涛张世忠
- 关键词：神经胶质瘤
- 脐血间充质干细胞与帕金森病被引量：4
- 2012年
- 间充质于细胞（mesenchymalstemcells，MSCs）作为一种成体干细胞，具有未分化细胞的特性，能高效率的自我更新，并且有着向多种成熟细胞分化的潜能，在生物医学和组织工程中具有巨大的科研价值。骨髓是第一个被报道含有MSCs的组织来源．也是如今临床应用的主要来源，但获取过程有创，易导致感染、出血、慢性疼痛，并且其增殖、分化潜能均随年龄的增长而降低，因此对于老年患者的效果得不到保证。我国现已逐步进入老龄化社会．临床上帕金森病（Parkinson’Sdisease，PD）患者已达到200万人，每年新增PD患者近20万人。如不及时进行有效的治疗，患者病情呈慢性进行性加重，
- 卢国辉张世忠
- 关键词：脐带血间充质干细胞帕金森病
- 人胎盘底蜕膜间充质干细胞抗炎特性对帕金森病模型大鼠的神经保护作用被引量：2
- 2013年
- 目的研究人胎盘底蜕膜间充质干细胞（hPDB-MSCs）抗炎特性对帕金森病（PD）模型大鼠多巴胺能神经元的影响。方法体外培养hPDB-MSCs，6．羟基多巴（6-OHDA）制备大鼠PD模型并按照随机数字表法分为模型组与移植组，每组32只。hPDB-MSCs尾静脉移植观察各组大鼠行为学改变。免疫组化检测移植后3d、1周、2周及4周各组大鼠损伤侧黑质酪氨酸羟化酶（TH）、离子钙接头蛋白（Ibal）表达。实时荧光定量PCR检测各时间点各组大鼠损伤侧黑质抗炎因子人白细胞介素-10（hIL-10）、人转化生长因子-β（hTGF-β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达。结果hPDB-MSCs移植后1周、2周、4周，移植组大鼠阿朴吗啡诱导的平均旋转圈数明显低于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组化结果显示移植组大鼠损伤侧黑质部位TH阳性细胞数较模型组明显增加，1周、2周、4周时差异有统计学意3Z（P〈0．05）。移植组大鼠损伤侧黑质部位Ibal阳性细胞则明显减少，4周时最为显著。mRNA水平，移植组大鼠hIL-10及hTGF-β表达均较模型组增加，而TNF-α表达量则逐渐降低。结论hPDB-MSCs尾静脉移植后能够通过抗炎机制抑制PD模型大鼠多巴胺能神绎元丧失，改善PD模型大鼠症状。
- 肖振勇卢国辉殷志林卢凤飞何骁征郭燕舞姜晓丹张世忠
- 关键词：间充质干细胞神经保护帕金森病
- 氩氦冷冻胶质瘤细胞致敏树突状细胞诱导肿瘤杀伤效应的实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨氩氦冷冻胶质瘤细胞冻融产物对C57BL／6小鼠骨髓源树突状细胞（DCs）成熟的影响．以及致敏DCs诱导肿瘤杀伤效应的作用机制。方法采用氩氦冷冻法冻融GL261胶质瘤细胞为实验组，只插入探针不冷冻为阴性对照组，冻融等量PBS为空白对照组，采用BCA法测定冻融产物蛋白浓度；体外诱导小鼠骨髓细胞为DCs，加入各组冻融产物后观察其形态学变化。流式细胞仪检测DCs表面CD80、CD86、MHC—I、MHC-Ⅱ的表达。ELISA检测其上清液中IL．12p70的含量；提取小鼠脾脏T细胞，与各组抗原致敏的DCs共培养后活化，流式细胞仪检测活化T细胞CD3、CD4、CD8的表达；以GL261细胞为靶细胞，以活化的T细胞即细胞毒性T细胞（CTLsl作为效应细胞，效靶比分别为10：1、50：1和100：1时CCK-8法检测CTLs对GL261的杀伤率。结果实验组冻融产物即肿瘤抗原浓度[（1071±240．94）μg／mE]高于阴性对照组[（91．42±55．75）μg／mL]及空白对照组（0Ixg／mL），差异有统计学意义（JD〈O．05）；实验组DCs有典型成熟DCs形态，表型CD80、CD86、MHC-I、MHC—II的表达率及IL-12p70分泌量高于阴性对照组及空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；实验组CD80细胞表达率高，CD4＋T细胞表达率低，与阴性对照组及空白对照组相比差异有统计学意义（p〈0．05）；不同效靶比时实验组CTLs对GL261细胞的杀伤率显著高于阴性对照组及空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论氩氦冷冻胶质瘤细胞可获取大量肿瘤抗原并促进DCs成熟，冻融产物致敏DCs后可有效负载肿瘤抗原产生抗肿瘤效应，其机制与DCs表面分子CD80、CD86、MHC-I、MHC-Ⅱ的表达上调并诱导T细胞转化为CTLs有关。
- 殷志林卢国辉肖振勇刘天助何骁征王其福林春南张世忠
- 关键词：氩氦冷冻神经胶质瘤树突状细胞细胞毒性T细胞
- 微小RNAs对帕金森病相关基因表达的调控被引量：4
- 2014年
- 帕金森病（PD）是中老年人常见的神经系统退行性疾病之一。其临床表现主要为静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态异常等；病理特征是中脑黑质多巴胺能神经元的变性缺失和嗜酸性包涵体（路易小体）的出现。目前PD的病因和发病机制尚不明确，广大学者认为遗传因素、环境因素、年龄增大、氧化应激等都可能参与了PD的发病。
- 朱志远叶勇义卢国辉张世忠
- 关键词：帕金森病微小RNAS基因发病机制
- 氩氦冷冻治疗9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤模型的病理学研究被引量：3
- 2013年
- 目的 探讨氩氦冷冻治疗9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤模型的病理改变. 方法 种植9L胶质瘤细胞于30只Fischer344大鼠鼠背建立9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤模型,并按随机数字表法分为空白对照组（自然生长,不进行任何处理）和氩氦冷冻组（给予氩氦冷冻治疗）.接种后30d取出肿瘤组织进行病理学观察,应用HE染色、电镜下观察冷冻消融的肿瘤组织形态,应用免疫组织化学染色检测胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和S-100蛋白表达. 结果 （1）光镜下空白对照组肿瘤细胞巢状排列紧密,肿瘤无包膜,瘤周小血管扩张,可见肿瘤细胞沿小血管浸润生长；瘤内新生血管丰富,瘤内常见出血、凝固性坏死灶.高倍镜下肿瘤细胞形态多样,核大深染、多核,异型性高.肿瘤细胞GFAP、S-100染色阴性,肿瘤细胞间胶质网可见阳性染色.（2）氩氦冷冻组HE染色显示冷冻中央区呈均匀性凝固性坏死,边缘区的炎性反应带主要为一些细胞碎片及大量的红、白细胞浸润：微血管内也发现大量的红细胞、血小板集合和血栓形成,并可见灶性出血.电镜显示冷冻区中央、边缘区组织细胞全部坏死或凋亡. 结论 氩氦刀可能是治疗胶质瘤有效的方法.
- 刘剑马国亮张世忠林健黄传平林武鹏
- 关键词：氩氦冷冻病理学
- 氩氦冷冻治疗荷脑胶质瘤大鼠免疫机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的研究氩氦冷冻治疗荷脑胶质瘤大鼠免疫机理。方法 F344大鼠胶质瘤模型建立成功后分为空白对照组、手术组、氩氦冷冻组,免疫组织化学测量瘤周CD80、CD86的数量,酶联免疫吸附实验检测外周血中IL-12、IFN-γ细胞因子的变化。结果氩氦冷冻治疗组术后瘤周CD80、CD86阳性细胞数较其他组显著增多,氩氦冷冻组外周血中IL-12、IFN-γ水平显著增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论氩氦冷冻治疗后肿瘤抗原充分暴露,促进树突状细胞成熟,从而提高机体的免疫功能。
- 夏爱祥刘剑吴登山梁雪梅张世忠马国亮
- 关键词：氩氦冷冻免疫机制
- MicroRNA-124对帕金森病中多巴胺能神经元的神经保护作用被引量：6
- 2013年
- 目的研究microRNA（miR）．124对帕金森病模型小鼠中脑多巴胺能神经元的神经保护作用．并探讨其免疫炎性调控机制。方法采用小胶质细胞系BV2细胞制备炎性反应的细胞模型．实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR-21、miR-124、miR．155、miR-146a、miR．18lc、miR-221．3p等中枢炎性相关miRNAs表达；腹腔内注射1．甲基一4一苯基．1，2，3，6．四氢吡啶（MPTP）制备帕金森病小鼠模型，尾静脉注射miR-124治疗，免疫组织化学染色观察治疗前后多巴胺能神经元凋亡情况（TH蛋白表达）、小胶质细胞活化情况（Ibal蛋白表达），Westernblotting及qRT—PCR检测治疗前后细胞凋亡相关蛋白酶caspase-3、caspase-8的表达情况。结果miR-124在BV2细胞中表达量明显高于其他5种miRNAs，差异有统计学意义（氏0．05），且致炎后表达下调幅度最大；与帕金森病模型鼠相比，miR-124治疗后黑质区TH阳性细胞数明显增多，而lbal阳性细胞数明显减少，caspase-3、caspase-8的表达量亦明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-124可通过抑制黑质区小胶质细胞活性缓解多巴胺能神经元凋亡进程，可能是帕金森病发病机制中的一个关键因子。
- 卢国辉蒋春梅肖振勇张世忠
- 关键词：帕金森病多巴胺能神经元神经保护
- 氩氦冷冻治疗9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤疗效观察被引量：1
- 2013年
- 目的研究氩氦冷冻治疗9L/Fischer344大鼠脑胶质瘤的疗效及预后。方法 Fischer344大鼠胶质瘤模型建立成功后,随机分为空白对照组、手术组、氩氦冷冻组,每组10只。游标卡尺测量并计算肿瘤体积,观察各组大鼠行为及生存期。结果空白对照组、手术组和氩氦冷冻组大鼠生存时间分别为(78.5±1.1)d、(171.0±10.8)d和(252.8±5.0)d,差异具有统计学意义(P=0.002)。氩氦冷冻组肿瘤体积呈逐渐缩小趋势。结论氩氦冷冻是治疗胶质瘤有效方法,推测可能与瘤细胞破裂,抗原暴露,而刺激机体产生抗肿瘤的抗体有关。
- 刘剑马国亮夏爱祥张世忠黄传平林武鹏王德才
- 关键词：神经胶质瘤
