国家重点基础研究发展计划(2011CB512006)
- 作品数：12 被引量：72H指数：7
- 相关作者：郑鹏远李付广黄煌白利梅陈东晖更多>>
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- 拉克替醇和婴儿双歧杆菌对便秘大鼠AQP3及ICC的影响被引量：8
- 2015年
- 目的探讨拉克替醇和婴儿双歧杆菌改善大鼠便秘的作用机制及其对结肠水通道蛋白3（aquaporin 3，AQP3）、Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICC）的影响。方法SD大鼠30只，随机选取6只为对照组，其余大鼠连续5d给予洛哌丁胺灌胃建立便秘模型后随机分为模型组、拉克替醇组、婴儿双歧杆菌组、联合组。连续治疗7d，测定大鼠摄食量、摄水量、体重、粪便含水量及小肠推进率。ELISA法测定各组大鼠血清中P物质（substance P，SP）、血管活性肠肽（vasoacfive intestinal peptide，VIP）含量的变化。Real—time PCR检测结肠蛋白激酶A（protein kinase A，PKA）、速激肽受体1（neurokinin-1 receptor，NK-1）mRNA的表达情况；Western blot、real-time PCR检测结肠AQP3、ICC蛋白和mRNA表达量的变化。结果与模型组相比，各治疗组的粪便含水率、小肠推进率、血清中VIP、SP含量均增加，结肠中PKA、NK-1 mRNA的表达量提高，AQP3、ICC蛋白及mRNA的表达量也明显提高，且差异有统计学意义（P〈0．05）。其中联合组效果最为明显，拉克替醇组次之，婴儿双歧杆菌组效果欠佳。结论拉克替醇和婴儿双歧杆菌能够提高大鼠血清中SP和VIP的含量，SP可以与ICC表面的NK-1受体相结合，促进胃肠道平滑肌收缩，加快肠道蠕动，利于粪便排出。VIP亦可通过cAMP—PKA途径增强AQP3 mRNA和蛋白的表达，促进肠道内水分吸收，软化粪便，改善便秘。
- 丁一芮郑鹏远李付广黄煌白利梅刘思濛
- 关键词：便秘拉克替醇婴儿双歧杆菌水通道蛋白3CAJAL间质细胞
- 酪酸杆菌联合谷氨酰胺对应激小鼠肠道紧密连接蛋白表达的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 研究肠道黏膜通透性在IBS致病过程中的作用机制和评价酪酸杆菌联合谷氨酰胺干预的作用.方法 50只BALB/c小鼠按随机数字法均分为空白对照组、实验对照组、谷氨酰胺组、酪酸杆菌组和联合干预组5组,避水试验诱导建立应激IBS小鼠模型.1.5％甲基纤维素灌胃染色粪便法检测小鼠排便时间和粪便含水量,HE染色法评价肠道病理损伤,结肠膨胀试验检测内脏敏感性.检测血清D-乳酸、二胺氧化酶水平和肠上皮细胞间紧密连接蛋白[闭锁蛋白-1、胞质附着蛋白、紧密连接相关蛋白跨膜蛋白（ZOL-1）]蛋白水平变化评价空肠通透性改变,评价酪酸杆菌联合谷氨酰胺干预的影响.组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果 与空白对照组相比,实验对照组小鼠排便时间[（100.40±14.80） min比（75.88±12.20） min]明显缩短、粪便含水量[（54.76±9.98）％、（74.95±7.15）％]增加明显（t＝3.692、4.023,P＝0.002、0.002）,最低阈值显著降低[（40.87±4.82） mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa）比（27.80±3.18） mmHg;t=8.761,P＜0.01],空肠黏膜损伤评分增加（0.50±0.15比2.60±0.97;t＝6.034,P＜0.01）;肠道通透性包括血清D-乳酸[（913.6±90.1） ng/L比（1 476.0±246.8） ng/L]、二胺氧化酶[（3 391.0±256.9） ng/L比（5 096.0±725.2） ng/L]水平显著增加（t＝40.920、29.810,P均＜0.05）,紧密连接蛋白ZOL-1 （0.165±0.005、0.119±0.003）、闭锁蛋白1（0.104±0.016比0.022±0.006）表达显著降低（t=19.830、19.830,P均＜0.01）.与实验对照组相比,谷氨酰胺组、酪酸杆菌组和联合干预组经灌胃干预后,排便时间增加[（90.50±3.78）、（97.56±8.79）、（99.89±11.90） min]、粪便含水量降低[（69.33±6.71）％、（58.07±8.97）％、（56.74±8.12）％],差异有统计学意义（F=10.020、8.740,P均＜0.01）,而酪酸杆菌组和联合干预组效果最佳（F＝2.481、4.874,P均＜0.05）;最低阈
- 陈东晖于泳刘志强李付广郑鹏远
- 关键词：紧密连接蛋白肠道通透性谷氨酰胺
- 酪酸梭菌对食物过敏小鼠肠道屏障功能的影响被引量：9
- 2017年
- 目的探讨产丁酸的益生菌酪酸梭菌通过调节肠上皮细胞双孔钾通道Trek1的表达对过敏小鼠肠道屏障功能的影响。方法建立小鼠食物过敏模型,ELISA法、流式细胞仪检测相关指标验证造模效果,尤斯室检测小肠组织通透性变化,Western blot及免疫荧光法检测Na6ve组、Saline组、SIT组、SIT/SB组、SB组、SIT/CB组、CB组、SIT/CB/Spadin组小鼠空肠组织中Trek1的表达;Transwell系统中使用T84细胞建立单层上皮细胞层,分别暴露于过敏介质,qRT-PCR和Western blot检测Trek1mRNA和蛋白的表达;分别使用生理盐水、SIT、SIT/SB、SB、SIT/CB、CB、SIT/CB/Spadin不同疗法对过敏小鼠进行治疗,了解小鼠肠道Trek1的表达情况、肠道屏障功能及过敏反应指标的变化情况。结果相对于对照组,食物过敏小鼠小肠Trek1蛋白表达水平显著下降,肠黏膜通透性显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);T84细胞暴露于过敏介质后,Trek1mRNA和蛋白的表达显著下降(P<0.05),但预先加入p38抑制剂可以拮抗这种改变;SIT治疗、酪酸梭菌和丁酸钠单独应用均可以提高食物过敏小鼠肠道Trek1的表达,减轻过敏反应(P<0.05),但SIT与酪酸梭菌或丁酸钠的联合应用效果更加显著(与SIT组相比P<0.05),并且可以显著降低小肠黏膜通透性,改善肠道屏障功能(P<0.05)。结论丁酸钠或者产丁酸的益生菌酪酸梭菌可以通过提高Trek1的表达来恢复过敏小鼠的肠道屏障功能,减轻过敏反应,并且加强SIT治疗的效果。
- 李旌黄煌梅璐于泳刘思濛丁一芮白利梅蒋杰郑鹏远
- 关键词：食物过敏肠道屏障功能益生菌
- 益生菌对肠易激综合征小鼠肠道黏膜CRF-R1表达及肠道屏障功能的影响被引量：10
- 2014年
- 目的通过观察肠易激综合征（IBS）小鼠模型结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1及结肠黏膜PAR-2、Claudin1~4等的表达变化,探讨IBS中应激通过肥大细胞引起肠道屏障功能障碍的可能机制并观察婴儿双歧杆菌的治疗作用。方法 30只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组及婴儿双歧杆菌组。以束缚应激法建立IBS小鼠模型。婴儿双歧杆菌组给予婴儿双歧杆菌灌胃,而对照组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。观测腹肌收缩反射（AWR）后处死小鼠。ELISA检测外周血中类胰蛋白酶的表达变化。免疫组织化学分析结肠黏膜CRF、PAR-2、Claudin1、Claudin2、Claudin3、Claudin4的表达情况。免疫荧光双标分析结肠黏膜CRF-R1在肥大细胞的表达情况。RT-PCR检测结肠CRF-R1mRNA的表达情况。结果与对照组相比,模型组小鼠外周血类胰蛋白酶表达量增加;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量增加,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）。婴儿双歧杆菌干预后,该组小鼠外周血中类胰蛋白酶表达量降低;结肠黏膜中CRF、PAR-2、Claudin2表达量、CRF-R1＋肥大细胞数目及CRF-R1 mRNA表达量降低,结肠黏膜Claudin1、Claudin3、Claudin4表达量增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 IBS小鼠模型中,婴儿双歧杆菌可以减轻肠道屏障功能障碍,其机制可能与抑制结肠黏膜肥大细胞上CRF-R1的表达而抑制肥大细胞的激活及其免疫因子的释放,从而降低结肠黏膜PAR-2的表达有关。
- 刘思濛于泳黄煌丁一芮白利梅李付广郑鹏远
- 关键词：肠易激综合征益生菌肠道屏障功能
- 促肾上腺皮质释放因子对HT-29细胞中Toll样受体4／核因子-κB信号通路的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察促肾上腺皮质释放因子（corticotrophin—releasing factor CRF）对结肠上皮细胞系HT-29细胞中Toll样受体（TLR）4／核因子（NF）-κB的表达调控作用。方法将HT-29细胞分为4组，正常对照组，脂多糖（LPS）组（LPS20μg／ml刺激24h），CRF组（CRF20ng／ml刺激24h），CRF＋LPS组（预先CRF孵育12h，更换细胞液后再与LPS孵育12h）。刺激结束后，RT—PCR法检测各组细胞中TLR4mRNA的表达，提取细胞总蛋白，免疫印迹法检测各组细胞中TLR4和NF-KBp65蛋白表达水平。收集上清液，ELISA法检测各组细胞上清液中IL-8的表达。结果LPS组TLR4 mRNA和蛋白表达水平为0．31±0．04和0．48±0．17，与正常对照组比较差异无统计学意义[0．28±0．02和0．45±0．12，t值分别=0．216和0．712，P值均〉0．05]，CRF组为1．05±0．06和1．08±0．21，与正常对照组相比明显增高（t值分别=3．721和3．802，P值均〈0．05），而CRF＋LPS组为1．68±0．05和1．81±0．18，更高于CRF组（t值分别=4．816和3．918，P值均〈0．05）。各组HT-29细胞中NF-κB p65蛋白表达水平和细胞上清液中IL-8表达水平，与TI。R4mRNA和蛋白表达水平结果一致。结论CRF不仅能直接刺激肠上皮细胞中TLR4／NF-κB通路活化，还可促进结肠上皮对LPS的反应增加，导致IL-8释放增多。
- 杨丽郑鹏远刘志强杨慧敏
- 关键词：促肾上腺皮质激素释放激素脂多糖类TOLL样受体4白细胞介素8
- 束缚应激对大脑中动脉线栓模型大鼠肠黏膜屏障的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 观察束缚应激状态下大脑中动脉线栓（MCAO）模型大鼠肠黏膜屏障的改变,探讨其机制.方法 将雄性SD大鼠48只随机分为假手术组（J组）、假手术＋束缚组（JS组）、MCAO模型组（M组）、MCAO模型＋束缚组（MS组）,每组12只.以改良Longa线栓法制作MCAO模型;以大鼠固定器固定制作束缚应激模型,检测大鼠血清二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）、内毒素（LPS）、促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）水平,回肠组织紧密连接蛋白水平,回肠组织CRF、CRF-r1、CRF-r2表达水平和脑组织CRF、肿瘤坏死因子（TNF）-α、CRP表达水平.结果 MS组大鼠血清DAO、LPS、CRF水平分别为：（693.96 ±55.38） U/L、（147.04±2.93） μgL、（194.03±19.80） ng/L,与M组比较显著增加（P＜0.05）;回肠组织紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、claudin-2水平均分别为：0.52 ±0.05、0.58 ±0.03、0.57 ±0.05、0.35 ±0.07,与M组比较显著降低（P＜0.05）,claudin-3、claudin-4水平分别为：0.59 ±0.40、0.58 ±0.03,与M组比较显著增高（P＜0.05）;回肠组织CRF、CRF-r1表达水平及脑组织CRF、CRP表达水平分别为：173.80±34.34、169.56±26.99、115.27±17.79、135.27 ±40.67,与M组比较显著增高（P＜0.05）.结论 束缚应激加重MCAO模型大鼠肠黏膜屏障功能的损害.
- 朱宁陈东晖李付广郑鹏远
- 关键词：束缚应激肠黏膜屏障
- 副干酪乳杆菌N1115联合低聚果糖对高脂饮食诱导小鼠非酒精性脂肪性肝病的影响被引量：4
- 2017年
- 目的探讨副干酪乳杆菌N1115联合低聚果糖对小鼠非酒精性脂肪性肝病的影响及其可能机制。方法50只雄性C57小鼠随机分为5组，分别给予正常饮食、高脂饮食、高脂饮食＋副干酪乳杆菌N1115（2．2×10^9CFU／m1）、高脂饮食＋低聚果糖（4g／kg）、高脂饮食＋副千酪乳杆菌N1115＋低聚果糖，所有实验组小鼠连续干预16周。干预结束后，检测各组小鼠空腹血糖、胰岛素、脂多糖（LPS）以及血清和肝脏的肿瘤坏死因子α、白细胞介素（IL）-1B、IL-6和干扰素y水平；RT-PCR检测小鼠肝脏Toll样受体（TLR）4、核因子-KB、胰岛素受体、胰岛素受体底物-1mRNA表达水平。对数据采用单因素方差分析，两两比较用Bonferroni法。结果与高脂饮食组相比，副干酪乳杆菌N1115、低聚果糖干预明显降低高脂饮食小鼠的体质量、Lee。S指数、肝指数以及血糖、胰岛素抵抗水平，正常饮食组血清LPS水平为（8．80±0．85）U／L，副干酪乳杆菌N1115、低聚果糖及二者联合干预组血清LPS水平分别为（12．31±1．01）U／L、（12．27±0．98）U／L、（10．17±0．79）U／L，而高脂饮食组为（15．45±1．14）U／L，明显高于其他各实验组（F=55．117，P〈0．01）；各干预组血清和肝脏中肿瘤坏死因子α、IL-1β、IL-6、干扰素y水平与高脂饮食组相比，亦明显降低护〈0．05）；同时下调了肝脏TLR4、核因子-KBmRNA的表达（F值分别为82．933，149．033，P值均〈0．01），并上调肝脏胰岛素受体、胰岛素受体底物-1mRNA的表达妒值分别为33．347，70．225，P值均〈0．01）。结论副千酪乳杆菌N1115联合低聚果糖可通过减少循环LPS的水平，抑制LPS／TLR4信号通路的激活，减少炎症因子的释放，减轻机体胰岛素抵抗，从而起到改善非酒精性脂肪性肝病的作用。
- 姚芳芳郑鹏远黄煌白利梅丁一芮梅璐刘思漾
- 关键词：脂肪肝炎症低聚果糖
- 益生菌与中药在改善肥胖中的研究进展被引量：10
- 2013年
- 近些年来,越来越多的研究发现肠道菌群在肥胖的发生发展中起重要作用。研究证实口服益生菌制剂,可以有效的改善肥胖,而中国传统中药在治疗肥胖上也具有独特优势。本文就肠道菌群与肥胖的发生发展的关系,益生菌、中药以及其相互作用在改善肥胖中的研究进展做一综述。
- 梅璐郑鹏远袁杰利
- 关键词：肠道菌群益生菌中药肥胖
- 芳香烃受体对肠易激综合征小鼠模型Th17细胞活化的影响被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨肠易激综合征（ IBS）小鼠模型Th17细胞活化水平变化及芳香烃受体（Ahr）对Th17细胞活化的影响。方法雄性BALB/c小鼠30只，随机分为3组。一次性结肠灌注三硝基苯磺酸（ TNBS）诱导小鼠IBS模型，对照组等体积生理盐水结肠灌注。小鼠腹腔注射Ahr拮抗剂进行干预。评估小鼠内脏敏感程度及结肠黏膜炎症情况。分离肠系膜淋巴结及外周血单个核细胞，流式细胞仪测定Th17细胞比例的变化水平。免疫荧光双染检测结肠Ahr与IL-17 A分布情况及Ahr活化的Th17细胞数量变化。结果（1）实验组和Ahr拮抗剂组肠系膜淋巴结中Th17细胞均较对照组明显增加（ P均＜0.05），而Ahr拮抗剂组Th17细胞较实验组明显减少（ P＜0.05），仍高于对照组（ P＜0.05）。（2）实验组和Ahr拮抗剂组外周血中Th17细胞均较对照组明显增加（P均＜0.05），而Ahr拮抗剂组Th17细胞与实验组相比差异无统计学意义（ P＝0.642）。（3）实验组结肠黏膜Ahr活化的Th17细胞（Ahr＋IL-17A＋）数目为（10.00±1.58），Ahr 拮抗剂组数目为（5.80±0.83），均较对照组（3.80±0.83）显著增加（P均＜0.05）；而Ahr拮抗剂组（5.80±0.83）较实验组（10.00±1.58）显著降低（ P＜0.05）。结论 IBS小鼠肠系膜淋巴结及外周血中Th17细胞活化增加；Ahr在IBS小鼠肠道Th17细胞活化中具有重要作用，阻断Ahr能够明显减少肠黏膜内Ahr活化的Th17细胞及肠系膜淋巴结中Th17细胞比例。
- 王钰莹陈东晖郑鹏远李付广
- 关键词：肠易激综合征TH17芳香烃受体
- 利用小鼠模型研究肠道免疫功能紊乱在肠易激综合征致病机制中的作用被引量：9
- 2013年
- 目的研究肠道免疫功能在肠易激综合征（IBS）的作用机制及丁酸杆菌对肠道免疫系统紊乱的调节作用。方法C57BL／6雄性6周龄小鼠共50只，随机分为3组。实验组（n=20）正丁酸钠结肠灌注，诱导C—IBS小鼠模型，每次200μl（浓度500mmol／L）每天2次，连续3d。对照组（n=20）小鼠等体积生理盐水灌肠。丁酸杆菌组（n=10）正丁酸钠造模前2h，丁酸杆菌灌胃每次500μl（活菌浓度1／10^9CFU／ml）每天1次，连续6d。检测生理指标、结肠高敏状态、肠道病理损伤程度，评价C-IBS模型。分离肠道上皮内淋巴细胞（IELs）和固有层单核细胞（LPMC），流式分析，进一步评价C—IBS模型小鼠肠道免疫功能异常激活和紊乱状态及丁酸杆菌对肠道免疫系统紊乱的调节作用。结果（1）实验组小鼠生理指标改变明显，实验组肠道出现低度炎症状态结肠膨胀试验（CRD）和最低阈值明显降低（t=8．926、6．103，P均〈0．001），提示C—IBS模型造模成功；（2）与对照组相比，实验组肠道IELs中树突状细胞（DCs）减少（t=2．878、3．086，P均〈0．05）而巨噬细胞增加（t=3．191，P〈0．05），记忆性T细胞增加（t=3．071，P〈0．05）；（3）与对照组相比，固有层（LP层）树突状细胞（DCs）减少（t=2．880、2．664，P均〈0．05），记忆性T细胞增加（t=3．732、2．682，P均〈0．05）；（4）与对照组相比，丁酸杆菌组生理指标无变化；IELs中巨噬细胞、记忆性T细胞及DCs均接近正常水平（造模第6天，t=1．103、0．0213、0．418，P均〉0．05），LP层中巨噬细胞和DCs（造模第6天，t=0．782、0．347，P均〉0．05），与对照组相比均无显著性差异；（5）与实验组相比，丁酸杆菌组肠道LP层记忆性T细胞数量也显著下降（造模第6天，t=2．346，P=0．0470，P〈0．05），但仍高于对照组（t=2．233，P=0．0476，P〈0．05）。丁酸杆�
- 陈东晖陈海荣刘志强郑鹏远
- 关键词：便秘型肠易激综合征内脏高敏免疫功能紊乱低度炎症
