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国家高技术研究发展计划(2004AA215242)

作品数:8 被引量:20H指数:3
相关作者:熊思东王缨储以微张进平徐薇更多>>
相关机构:复旦大学上海医学院更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 5篇细胞
  • 5篇免疫
  • 2篇原核表达
  • 2篇原核表达系统
  • 2篇特异
  • 2篇特异性
  • 2篇特异性免疫
  • 2篇特异性免疫应...
  • 2篇突触
  • 2篇免疫突触
  • 2篇免疫应答
  • 2篇抗原
  • 2篇基因
  • 2篇基因免疫
  • 1篇递呈
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎表面...
  • 1篇乙型肝炎病毒
  • 1篇疫苗

机构

  • 7篇复旦大学上海...

作者

  • 7篇熊思东
  • 5篇张进平
  • 5篇王缨
  • 5篇储以微
  • 4篇徐薇
  • 2篇张瑞华
  • 2篇徐焕宾
  • 2篇袁志刚
  • 1篇林怡
  • 1篇乔宾
  • 1篇关庆东
  • 1篇郭强
  • 1篇王立新
  • 1篇苏丽萍
  • 1篇夏明灿

传媒

  • 2篇中华微生物学...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇生命的化学
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇现代免疫学
  • 1篇Cellul...

年份

  • 1篇2007
  • 7篇2005
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
B细胞表位基因疫苗诱导特异性免疫应答及特性研究被引量:5
2005年
为研究特异性B细胞表位短肽为基础的DNA疫苗的免疫应答特性,将鸭乙肝病毒Pre-S中的P127-138B细胞表位基因克隆到含多肽表达盒(peptideexpressioncassette,PEC)的载体中,体外转染C2C12肌肉细胞,用DOT-EIA检测表位短肽的表达,进一步分别免疫不同品系的BALB/c和C57BL/6小鼠,比较MHC限制性对免疫应答的影响。结果表明,重组pECk-b1b2载体可在体外瞬时高效表达,并保持原有的免疫活性;体内基因免疫能诱导针对表位短肽的特异性抗体;不同品系小鼠抗体产生动力学相似,但抗体滴度差异显著。这些结果提示,以B细胞表位为基础的基因免疫可诱导特异性免疫应答,为DNA疫苗的分子设计提供了新的思路和应用前景。
徐焕宾徐薇王缨储以微张瑞华熊思东
关键词:抗原表位基因疫苗免疫应答
免疫突触的形成及其介导的分子识别
2005年
T细胞和APC细胞相互作用形成免疫突触涉及到连续发生的一系列的分子识别事件,最初APC细胞在趋化因子的作用下向T细胞移动,相遇后在抗原非依赖性的弱的黏附力作用下发生最初的黏附,同时伴随着TCR在APC表面俘获特异性抗原;抗原识别之后,由多种机制使T细胞和APC紧密接触并维持一段时间,随后分开,最终引起T细胞的增殖和分化。对免疫突触形成过程中的分子识别机制目前尚无定论,拓扑模式和数学模式的解释,脂筏和细胞骨架蛋白的重排以及接头蛋白的连接为免疫突触形成中分子的识别提供了一定的依据。
张进平熊思东
关键词:免疫突触分子识别T细胞抗原递呈细胞
Specific siRNA Downregulated TLR9 and Altered Cytokine Expression Pattern in Macrophage after CpG DNA Stimulation被引量:2
2005年
Bacterial CpG DNA or synthetic oligonucleotides (ODNs) that contain unmethylated CpG motifs (CpG ODN) can directly activate antigen-presenting cells (APCs) to secrete various cytokines through the intracellular receptor TLR9. Cytokine profiles elicited by the actions of stimulatory CpG DNA on TLR9 expressed APCs are crucial to the subsequent immune responses. To date, cytokine profiles in APCs upon CpG ODN stimulation in vitro are not fully investigated. In the present study, vector-based siRNA was used to downregulate TLR9 expression. Cytokine profiles were observed in murine macrophage cell line RAW264.7 transfected with TLR9-siRNA plasmid upon CpG ODN stimulation. We found that not all the cytokine expressions by the macrophage were decreased while TLR9 was downregulated. IL-12, TNF-α, IFN-γ and IL-1β expressions were significantly decreased, but IL-6,IFN-β and IL-10 expressions were not affected. Interestingly, the level of IFN-α was even increased. This alteration of cytokines produced by TLR9-downregulated APCs upon CpG ODN stimulation might indicate that the role of CpG DNA is more complicated in the pathogenesis and prevention of diseases. Cellular & Molecular Immunology.2005;2(2):130-135.
BinQiaoBaohuaLiXiuliYangHongyongZhangYiweiChuYingWangSidongXiong
关键词:SIRNACPG
集聚蛋白在淋巴细胞活化中的作用
2005年
目的研究在神经突触形成中发挥重要作用的集聚蛋白(agrin)是否在淋巴细胞中表达并影响淋巴细胞的活化和免疫突触的形成。方法应用RT-PCR检测集聚蛋白在静止和活化淋巴细胞中的表达,并应用实时定量PCR检测分析集聚蛋白的表达量与淋巴细胞活化之间的关系;用抗集聚蛋白抗体观察其对淋巴细胞增殖和免疫突触形成的影响;应用共聚焦显微镜观察集聚蛋白是否参与免疫突触的形成。结果RT-PCR结果显示集聚蛋白在静止和活化的淋巴细胞中均有表达,且经过实时定量PCR分析发现,集聚蛋白的表达和淋巴细胞的活化密切相关;当集聚蛋白被阻断后淋巴细胞的增殖被显著抑制;经共聚焦显微镜观察发现,集聚蛋白在活化的淋巴细胞中以帽化结构形式存在,且和CD3分子共定位,抗集聚蛋白抗体可以明显减少这种帽化结构的形成。结论在神经突触中发挥重要作用的集聚蛋白同样存在于淋巴细胞,可能通过影响淋巴细胞的免疫突触的形成参与淋巴细胞的活化。
张进平苏丽萍乔宾徐焕宾张瑞华储以微王缨熊思东
关键词:淋巴细胞活化免疫突触RT-PCR检测淋巴细胞增殖活化淋巴细胞微镜观察
真核化的原核表达系统增强HBV preS2/S基因免疫的效果被引量:1
2007年
目的研究真核化的原核表达系统——pCMV-T7pol/pT7IRES-HBs双质粒共表达体系与常规真核表达质粒相比在真核细胞中的表达差异;基因免疫小鼠诱生特异性体液免疫应答的能力及二者所诱生的抗体亚型的差异。方法运用分子生物学方法构建真核化的原核表达系统,将构建的质粒进行基因免疫,应用DOT-EIA和ELISA等检测其所产生的抗体水平。结果①真核化的原核表达系统在真核细胞中的表达能力明显强于常规真核表达质粒。②真核化的原核表达系统基因免疫小鼠不仅可诱生特异性体液免疫应答,且具有明显增强效应(P<0·05)。③真核化的原核表达系统与常规真核表达质粒相比不仅可诱生同等程度的Th1型免疫应答,而且能够诱生更强的Th2型免疫应答(P<0·01)。结论真核化的原核表达系统——pCMV-T7pol/pT7IRES-HBs双质粒能诱导较强的体液免疫应答。
袁志刚张进平王缨储以微徐薇熊思东
关键词:基因免疫HBV
GM-CSF对抗原化抗体基因免疫T_H细胞应答的调节作用被引量:3
2005年
目的 研究GM CSF(粒 单核巨噬细胞集落刺激因子 )与抗原化抗体联合基因免疫时 ,GM CSF对TH 细胞应答的调节作用。方法 在编码免疫球蛋白重链的质粒中分别克隆黏蛋白 1(MUC1 )中特异性PDTRP抗原表位和GM CSF编码基因 ,构建含PDTRP和GM CSF编码基因的抗原化抗体表达重组体。经脾免疫和肌肉加强的方式免疫BALB c小鼠。采用ELISA方法检测小鼠血清中特异性抗体的水平及其亚类并动态观察 ;RT PCR方法检测TH 细胞分化中细胞因子和转录因子的表达水平。结果 抗原化抗体基因免疫能诱导机体产生免疫应答。GM CSF增强抗原化抗体基因免疫诱生的抗PDTRP特异性IgG抗体水平并且伴随IgG1 IgG2a显著性升高 ,同时可增强淋巴细胞TH2型细胞因子及转录因子 (IL 4、GATA 3)mRNA的表达水平。结论 GM CSF在增强抗原化抗体基因免疫诱导的免疫应答的同时使得免疫应答向TH2方向偏移。
夏明灿储以微林怡熊思东
关键词:GM-CSF细胞应答TH2型细胞因子IGG抗体水平TH细胞分化IGG2A
C3d增强基因免疫诱导的小鼠抗乙型肝炎病毒特异性免疫应答被引量:5
2005年
目的探讨C3d对乙型肝炎病毒(HBV)基因免疫诱导的特异性免疫应答的调节作用,为增强HBV基因疫苗免疫效果寻求新途径。方法将HBVpreS2/S编码基因分别插入真核表达载体TR421和含有三拷贝C3d编码基因的TR421C3d3质粒,构建重组质粒TR421preS2/S和TR421preS2/SC3d3。采用肌肉注射法对BALB/c小鼠实施基因免疫,以空质粒TR421为对照,定期采集血清。ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗HBsIgG,3HTdR掺入法检测其特异性淋巴细胞增殖活性。结果TR421preS2/SC3d3重组质粒免疫组诱导的特异性抗HBsIgG水平明显高于TR421preS2/S重组质粒免疫组(P<005),而且TR421preS2/SC3d3重组质粒基因免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性也显著高于TR421preS2/S重组质粒组(P<005)。结论C3d可增强基因免疫诱导的HBV特异性体液和细胞免疫应答,为提高HBV基因疫苗的免疫效果提供了新的途径。
关庆东王立新郭强张进平徐薇王缨熊思东
关键词:基因乙型肝炎表面抗原乙型肝炎病毒基因免疫
原核表达系统T7RNA聚合酶/启动子在真核细胞中表达目的基因的实验研究被引量:4
2005年
将目前高表达水平强大的原核表达系统之一T7RNA聚合酶 启动子表达系统通过一系列改进引入真核细胞。通过转染真核细胞实验表明 ,采用真核启动子CMV调控T7RNA聚合酶的表达和在T7启动子下游插入EMCVIRES序列两种解决方案能使该原核表达系统在真核细胞高效表达目的基因 ,且能适应不同的真核细胞环境 ,是一良好的细胞类型非依赖的表达体系。
袁志刚张进平储以微王缨徐薇熊思东
关键词:T7RNA聚合酶T7启动子原核表达系统真核细胞
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