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胞嘧啶脱氨酶和血管内皮抑素基因慢病毒载体的构建与鉴定被引量：2: 2012年; 目的构建携带胞嘧啶脱氨酶（CD）和血管内皮抑素（ES）基因的慢病毒载体。方法根据GenBank提供大肠杆菌源CD和ES基因序列设计、合成2个基因并构建与荧光蛋白融合的真核表达载体pEGFP-CD和pDS-RED—ES。酶切和测序鉴定后，将载体瞬时转染HEK293细胞，运用实时PCR检测CD和ES基因表达情况。把载体中基因片段EGFP—CD和DS—RED．ES通过BP／LR重组分别构建慢病毒载体，并利用293FT细胞进行慢病毒的包装。将病毒原液浓缩，并测定病毒滴度。结果酶切、测序及PCR鉴定证实构建出慢病毒载体pLenti6．3-CD-EGFP和pLenti6．3-ES—Monomer—DsRed。感染293FT细胞后荧光显微镜下观察到GFP和DsRed的表达。浓缩慢病毒滴度分别为2．2×10^8TU／ml和6．5×10^7TU／ml。结论成功构建了CD和ES基因慢病毒载体。; 陈蓉滕皋军; 关键词：胞嘧啶脱氨酶血管内皮抑素慢病毒

小鼠骨髓源性内皮祖细胞培养鉴定及7．0T磁共振成像研究被引量：4: 2011年; 目的应用纳米磁粒子Resovist体外标记小鼠骨髓源内皮祖细胞（EPCs），磁共振（MR）对标记细胞成像。方法分离小鼠骨髓单个核细胞，免疫荧光鉴定细胞表面标记CD31、KDR，检测对DiI标记的乙酰低密度脂蛋白（DiI-AcLDL）内吞和FITC标记的荆豆凝集素-1（FITC—UEA-1）结合功能。氧化铁纳米颗粒（Resovist）标记EPCs，普鲁士蓝染色显示细胞内铁。原子吸收光谱仪检测溶液内铁含量。7．0TMR进行标记细胞成像。结果小鼠骨髓单个核细胞体外培养培养7d时，克隆增大，梭形细胞增多；培养14d时，细胞生长密集呈铺路石状。免疫荧光显示表达内皮细胞标志CD31、KDR，能结合UEA、内吞LDL，普鲁士蓝染色显示Resovist细胞标记率接近100％。原子吸收光谱仪检测标记后细胞内铁浓度为2．33ug／ml。MRI显示标记Resovist的细胞较未标记者E梯度回波序列信号降低。结论小鼠骨髓源内皮祖细胞Resovist标记后MR可进行细胞群成像，用于进一步细胞治疗及实时活体监测。; 陈蓉余辉贾振宇滕皋军; 关键词：干细胞磁共振成像

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国家自然科学基金(30870703)