中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(DW200704)
- 作品数：8 被引量：29H指数：2
- 相关作者：张连峰全雄志黄澜秦川董伟更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 心脏特异表达Dhcr24转基因小鼠的建立和表型分析被引量：2
- 2008年
- 目的建立心脏特异表达小鼠24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠,研究该基因在心脏中表达对小鼠心脏发育,形态和功能维持中的作用。方法RT-PCR法克隆小鼠24-脱氢胆固醇还原酶基因,把Dhcr24基因插入-αMHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24 C57BL/6J转基因小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR和Western Blotting检测基因表达水平,光学显微镜和超声检测不同月龄Dhcr24转基因小鼠心脏的组织结构改变。结果建立了2个品系的心脏特异表达Dhcr24转基因小鼠。转入的Dhcr24基因在心脏组织的表达水平超过内源性Dhcr24的3倍。心脏组织学和超声检查证实:Dhcr24转基因小鼠的心室壁变厚,心腔变小,但心脏功能保持正常。结论成功建立了心脏特异表达Dhcr24转基因小鼠,Dhcr24基因在心脏组织的过度表达对小鼠心脏发育和功能维持中的作用需要进一步探讨。
- 宋铭晶董伟全雄志施海霞黄澜张连峰
- 关键词：转基因小鼠心脏超声
- 广泛表达人载脂蛋白E3转基因小鼠的建立被引量：1
- 2009年
- 目的建立人载脂蛋白E3(apolipoprotein E3,ApoE3)转基因小鼠,研究该基因在多种组织中表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法RT-PCR法克隆人ApoE3基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转ApoE3基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。通过生化指标分析初步鉴定ApoE3基因的功能。结果建立了2个系的高表达人ApoE3转基因小鼠。结论成功建立了CMV启动子启动的高表达人ApoE3基因转基因小鼠,为进一步探索该基因的功能奠定了基础。
- 宋铭晶全雄志施海霞潘思丹张连峰
- 关键词：转基因小鼠
- London/Swedish双突变APP转基因小鼠的鉴定被引量：2
- 2008年
- 鉴定及评价APP双突变阿尔茨海默病的转基因小鼠模型。方法将London/Swedish双突变APP基因插入到PDGF启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立APP695V652I/K596N/M597L双突变转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定APP695双突变转基因小鼠的基因表型,RT-PCR和Western blotting检测APP突变基因表达,免疫组化检测APP695双突变转基因小鼠大脑病理改变。水迷宫检测APP695V652I/K596N/M597L转基因小鼠的行为学改变。结果建立了2个品系的人APP695V652I/K596N/M597L转基因小鼠。抗Aβ1-17免疫组织化学显示APP695双突变转基因小鼠海马区阳性细胞数较APP695V652I单突变转基因小鼠,及野生小鼠阳性细胞数明显增多,胞膜着色明显加深。双突变转基因小鼠在5月龄时可检测到老年斑。行为学检测显示APP695V652I/K596N/M597L双突变转基因小鼠学习记忆能力比APP695V652I单突变转基因小鼠有明显下降。结论APP695V652I/K596N/M597L转基因小鼠较APP695V652I转基因小鼠更早出现老年斑及学习认知能力障碍。成功建立了人APP695V652I/K596N/M597L转基因小鼠阿尔茨海默病模型,为研究阿尔茨海默病发病机制和药物研发提供了有价值的动物模型。
- 方瑾马春梅黄澜刘亚莉宗圆媛全雄志李万波秦川
- 关键词：转基因小鼠水迷宫
- MAN2C1基因在病毒感染中的作用
- 2007年
- 目的通过观察MAN2C1转基因小鼠对H5N1高致病性禽流感病毒的易感性,以了解此转基因小鼠的免疫应答情况和MAN2C1基因在病毒感染中的作用。方法以H5N1高致病性禽流感病毒滴鼻感染MAN2C1转基因小鼠,HE染色观察小鼠肺组织病理变化;RT-PCR和免疫组织化学方法检测小鼠肺组织H5N1病毒载量;间接ELISA方法检测小鼠血清抗体滴度变化。结果与对照组小鼠比较,MAN2C1转基因小鼠表现为更为严重的间质性肺炎,肺组织病毒载量增加,外周血中性粒细胞数目降低,淋巴细胞数量增加,血清IgG抗体滴度降低。结论MAN2C1基因抑制了小鼠的体液免疫。
- 刘红霞朱华代小伟朱立平秦川张连峰
- 关键词：转基因免疫组化
- 超声成像技术分析糜酶转基因小鼠心脏功能
- 2007年
- 目的应用小动物高频超声技术对糜酶转基因小鼠的心功能进行分析,以探索糜酶基因对心脏结构和功能的影响。方法通过VisualSonics Vevo770高分辨率小动物超声系统检测不同年龄的转基因小鼠及对照小鼠包括心壁厚度、主动脉血流速度、左心室内径、左心室容积、每搏输出量、射血分数、短轴缩短率和心输出量等的心脏功能指标的改变进行比较分析。结果随着小鼠年龄的增大,转基因阳性小鼠心壁厚度和主动脉血流速度逐渐增加,至6月龄时,转基因小鼠的左心室前壁收缩期厚度增加37%,增长率是对照小鼠的1.2倍(P<0.05);主动脉血流速度比对照小鼠高29%(P<0.05);转基因阳性小鼠的左心室内径、左心室容积、每搏输出量、射血分数、短轴缩短率和心输出量等的心脏功能指标表现出和以上变化相一致的表型。结论转基因小鼠糜酶表达水平升高,引起心脏AngⅡ形成增多,可使心肌细胞的收缩力提高;心肌细胞肥大,心壁增厚;且有随年龄增加的趋势,可研究建立慢性、老年性肥厚型心脏病模型。
- 董伟全雄志宋铭晶冯娟张连峰
- 关键词：糜酶转基因小鼠心脏超声
- DHCR24转基因小鼠的性别特异性自主活动和应激反应被引量：2
- 2009年
- 目的测定α-MHC24-脱氢胆固醇还原酶基因(DHCR24)转基因小鼠的行为学特征,研究该基因对小鼠活跃性和探究行为的影响。方法构建α-MHC DHCR24转基因表达载体,显微注射法获得C57BL/6背景DHCR24转基因小鼠,PCR鉴定小鼠基因型,选择DHCR24转基因和同窝阴性鼠进行旷场、modified SHIRPA和Rota-Rod转轮实验。结果DHCR24转基因雌鼠对新环境的恐惧感较小,但自主活动性低于对照鼠,而DHCR24转基因雄鼠的自主活动性和在胁迫环境下的应激性高于对照组,DHCR24转基因鼠的行为变化具有显著的性别差异。另外,本研究中雌鼠的活跃性、运动协调性和平衡能力均显著高于雄鼠,对胁迫环境的应激性也大于雄鼠。结论心脏特异表达DHCR24基因转基因小鼠自主活动和应激性的变化具有性别差异。
- 梁虹宋铭晶施海霞潘思丹张连峰
- 关键词：转基因小鼠
- 神经组织特异表达绿色荧光蛋白转基因小鼠的脑组织形态观察被引量：3
- 2008年
- 目的建立神经组织特异表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠,为神经系统的形态学观察提供可以荧光示踪的工具动物。方法把增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因插入血小板源性生长因子(PDGF)B-链启动子下游构建转基因载体,用显微注射的方法建立转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因表型,对阳性转基因小鼠的脑组织进行矢状面冷冻切片,分别进行HE染色,显微镜观察组织结构,荧光体视镜及荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)在神经组织的表达。结果在8个首建品系中筛选出1个神经组织高表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠系。观察到绿色荧光蛋白在大脑皮层、海马、丘脑、小脑及脑干等部位表达。结论建立了稳定遗传的神经组织特异表达绿色荧光蛋白转基因小鼠品系,为神经系统的生理学及病理学研究提供了可以荧光示踪的模型动物。
- 冯娟全雄志董伟高苒黄澜陈云新秦川张连峰
- 关键词：神经系统绿色荧光蛋白形态学
- cTnT^(R141W)转基因小鼠扩张型心肌病模型的建立被引量：20
- 2007年
- 目的建立cTnTR141W扩张型心肌病的转基因小鼠模型。方法把cTnTR141W基因插入-αMHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立cTnTR141W转基因C57BL/6J小鼠。PCR鉴定cTnTR141W转基因小鼠的基因表型,实时PCR检测基因的拷贝数,Northern blotting检测基因表达,光学显微镜和超声检测cTnTR141W转基因小鼠心脏的病理改变。结果建立了3个系的cTnTR141W转基因小鼠。3个系的基因拷贝数分别是15、20和59拷贝。cTnTR141W基因在心脏组织的表达水平高于内源性cTnT。病理分析显示cTnTR141W转基因小鼠心房心室明显大于野生型,心室壁明显变薄,心肌细胞不均匀肥大,心肌间质纤维增多。超声检查显示心室腔明显扩大,收缩期容积和舒张期容积显著增大,射血分数、短轴缩短率、室壁运动度明显降低。结论cTnTR141W转基因小鼠的全心扩大,室壁变薄,心肌细胞肥大,间质纤维化以及心肌收缩力下降,说明成功建立了cTnTR141W转基因小鼠扩张型心肌病模型,为研究扩张型心肌病发病机制和药物研发提供了有价值的动物模型。
- 冯娟董伟全雄志祝梅香邸冉高苒马春梅黄澜刘亚莉朱华秦川张连峰
- 关键词：心肌肌钙蛋白T扩张型心肌病转基因超声
