国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-43-8)
- 作品数：4 被引量：22H指数：3
- 相关作者：贾仁勇朱德康汪铭书程安春陈孝跃更多>>
- 相关机构：四川农业大学山东省出入境检验检疫局动物疫病与人类健康四川省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭疫里默氏杆菌病原及其防控关键技术研究被引量：17
- 2012年
- 文章回顾了鸭疫里默氏杆菌的病原鉴定、主要抗原、耐药机制等若干基础问题的研究进展,分析了鸭疫里默氏杆菌全基因组测序工作的完成对进一步深入开展致病机理研究和疫苗研发的重要意义。同时,从我国水禽生产的角度对鸭疫里默氏杆菌病的防控关键技术进行了详细阐述。
- 程安春朱德康王晓佳王雪平张莎秋贾仁勇罗启慧韩新峰陈孝跃汪铭书
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌鸭疫里默氏杆菌病
- 壳聚糖/pcDNA-DPV-gC基因在雏鸭体内的抗原表达和分布被引量：3
- 2011年
- 【目的】以DPV gC基因疫苗(pcDNA-DPV-gC)为模型,采用复凝法制备壳聚糖/pcDNA-DPV-gC纳米微球,对其在雏鸭体内的抗原表达和分布进行初步研究。【方法】将壳聚糖/pcDNA-DPV-gC基因疫苗以肌注、滴鼻和口服3种途径免疫20日龄雏鸭,于免疫后不同时间点(4h、12h、1d、3d、5d、7d、2 w、4 w、6 w和10 w)分别随机宰杀2只雏鸭,采集肝、脾、肺、肾、胰、脑、胸腺、哈氏腺、法氏囊、食道、十二指肠、盲肠和直肠,应用间接免疫组化检测DPV gC基因在雏鸭体内的抗原表达和分布。【结果】①肌注组免疫雏鸭1 d,肝脏、法氏囊、十二指肠、盲肠和直肠检测到DPV gC蛋白;滴鼻组免疫雏鸭12 h,肺脏出现阳性信号,1 d哈氏腺和法氏囊检测到DPV gC蛋白;口服组免疫雏鸭12 h,食道出现中等强度的阳性信号,1 d法氏囊、十二指肠、盲肠和直肠检测到DPV gC蛋白;②在3种免疫途径中,肝脏、肺脏、法氏囊、哈氏腺、食道、十二指肠、盲肠和直肠是DPV gC抗原表达的主要器官;阳性信号主要在肝细胞、肺上皮细胞、法氏囊和哈氏腺淋巴细胞、食道上皮细胞和肠道粘膜上皮细胞及固有层细胞等部位;③不同免疫途径免疫的壳聚糖/pcDNA-DPV-gC基因疫苗在雏鸭体内的抗原表达量和持续时间的总体表达规律为:肌注组>滴鼻组>口服组。【结论】壳聚糖能促进DPV gC基因在雏鸭体内的表达和分布,肌肉注射是壳聚糖/pcDNA-DPV-gC基因疫苗首选的免疫方式。
- 沈福晓蒋金凤程安春汪铭书路立婷贾仁勇朱德康陈孝跃孙涛
- 关键词：壳聚糖抗原表达
- 壳聚糖为递送载体的鸭肠炎病毒gC基因疫苗诱导Balb/c小鼠产生的免疫反应被引量：3
- 2011年
- 【目的】探讨壳聚糖对鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV)gC基因疫苗免疫反应的影响。【方法】应用壳聚糖作为DEV gC基因疫苗(pcDNA-DEV-gC)递送载体,采用肌肉注射和口服单次免疫Balb/c小鼠50μg剂量基因疫苗,并以肌注不同剂量裸质粒组、弱毒组和生理盐水组作为对照,分别检测不同疫苗免疫后的细胞、体液和黏膜免疫水平。【结果】肌注壳聚糖疫苗组诱导小鼠产生较肌注裸质粒50μg组和口服壳聚糖疫苗组高的细胞和体液免疫反应,且产生与弱毒疫苗相似的细胞免疫应答,但弱毒疫苗诱导体液免疫的能力更强,仅口服壳聚糖疫苗组产生粘膜免疫。【结论】上述研究结果表明壳聚糖具有一定的佐剂效应,为获得更有效的DEV gC基因疫苗提供了新策略,但该疫苗的推广应用还有待于对影响疫苗免疫效果的各因素进行进一步优化。
- 蒋金凤程安春汪铭书路立婷朱德康贾仁勇陈孝跃
- 关键词：壳聚糖基因疫苗粘膜免疫
- 鸭瘟病毒UL7基因真核表达质粒的构建及其瞬时表达被引量：1
- 2013年
- 为了解鸭瘟病毒(DPV)UL7基因的生物学特性,采用PCR扩增UL7基因,构建pMD20-T-UL7克隆质粒。然后利用限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ分别对pMD20-T-UL7质粒和pcDNA3.1(+)真核表达载体进行双酶切,连接,从而构建真核重组质粒pcDNA-UL7。重组质粒经脂质体LipofectamineTM2000转染DF-1细胞后,用RT-PCR、间接免疫荧光试验(IFA)及Western-blot检测DPV UL7基因在DF-1细胞中的表达情况。结果显示,通过单酶切和双酶切以及测序鉴定得到的重组质粒pcDNA-UL7构建成功;RT-PCR结果与目的基因大小片段一致,而正常细胞组和转染空载体组均未检测到相应的条带;在荧光显微镜下观察到,正常细胞组和转染空载体组未见绿色荧光,而转染了pcDNA-UL7的细胞发出绿色荧光,且主要位于细胞质;Western-blot结果显示,DPV UL7蛋白表达的蛋白的分子质量约为36ku,与理论值一致,其他对照组未见相应的条带。本研究成功构建了真核表达质粒pcDNA-UL7,为进一步研究DPV UL7基因的功能奠定了基础。
- 黄杰程安春汪铭书魏敏朱德康贾仁勇陈舜陈孝跃
- 关键词：鸭瘟病毒真核表达载体间接免疫荧光
