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国家自然科学基金(30701006)
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
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王涛
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任君琳
赵智凝
张瑞
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相关机构:
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细胞与分子免...
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2010
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以寡聚精氨酸为PTD的嵌合基因的表达及其对HER2阳性SGC-7901胃癌细胞的杀伤作用
被引量:1
2010年
目的:构建以寡聚精氨酸(R9)为蛋白质转导结构域的嵌合抗体/caspase-3的真核表达载体,并检测瞬时转染该载体对HER2阳性SGC-7901肿瘤细胞及HER2阴性HeLa肿瘤细胞生长的影响。方法:用PCR法获得融合了R9的活性caspase-3基因片段,并将其克隆人含有HER2单链抗体e23sFv基因的真核表达载体,以脂质体法转染SGC-7901细胞及HeLa细胞,用间接免疫荧光、细胞计数等方法,检测其在两种细胞中的表达及其对两种细胞生长的影响。结果:成功构建了以R9为蛋白质转导结构域的嵌合抗体/caspase-3基因真核表达载体pCMV—e23sFv-R9-casp3,瞬时转染该质粒发现SGC-7901细胞和HeLa细胞均以分泌形式表达e23sFv—R9-casp3蛋白,但SGC-7901细胞生长受到明显抑制,细胞形态发生改变,出现核浓缩等凋亡特征;而HeLa细胞生长未受抑制,细胞形态无明显变化。结论:以分泌形式表达的嵌合蛋白,其HER2抗体部分能够介导靶向识别,R9可以辅助效应分子活化、转位至细胞液,活性caspase-3能高效杀伤细胞。
赵智凝
王涛
任君琳
张瑞
赵晶
温伟红
贾林涛
杨安钢
关键词:
嵌合基因
靶向治疗
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