厦门市科技计划项目(3502Z20074007)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- FAK基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建FAK基因RNA干扰慢病毒载体。方法选定FAK基因RNAi靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA(引物),与经XhoⅠ和HpaⅠ双酶切后的慢病毒载体pLenti-lox3.7(pLL3.7)连接,产生pLL3.7FAK慢病毒载体,经XbaⅠ和NotⅠ酶切电泳筛选阳性克隆,测序鉴定。用PHR、pVSVG和pLL3.7FAK慢病毒载体共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果酶切和测序证实,构建出了FAKshR-NA的慢病毒载体pLL3.7FAK。包装慢病毒,测得离心的浓缩病毒悬液的滴度为4×107TU/ml。结论成功构建FAK基因RNAi慢病毒载体,为肿瘤细胞生物学行为及功能研究提供了一个有用的工具。
- 毛贺辉苏国强
- 关键词：FAKRNAI慢病毒
