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龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(DLCCoAOMT)基因的克隆和表达分析被引量：13: 2012年; 【目的】克隆龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(DLCCoAOMT)基因,分析其序列特征和在低温胁迫下不同组织中的表达情况并进行原核表达研究。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从龙眼叶片中克隆DLCCoAOMT基因,用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析,利用荧光定量PCR研究DLCCoAOMT基因在不同组织中的表达。【结果】克隆得到DLCCoAOMT基因,GenBank登录号为JN093023。该cDNA全长993 bp,具有1个744 bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸。序列分析表明,DLCCoAOMT编码的氨基酸序列与其它植物的CCoAOMT蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,龙眼DLCCoAOMT与桦木属的CCoAOMT蛋白亲缘关系较近。利用荧光定量技术进行组织表达模式分析发现,DLCCoAOMT基因在根、茎、叶中均有表达。总体上表达量在根和茎中较多,叶中较少,随着低温胁迫时间延长,DLCCoAOMT基因在各组织的表达量也发生变化。原核表达结果表明,DLCCoAOMT基因在大肠杆菌中获得表达。【结论】从龙眼中克隆到咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因,该基因可能参与调控低温胁迫。; 陈虎何新华罗聪杨丽涛张保青宋修鹏; 关键词：龙眼基因克隆原核表达

低温胁迫下龙眼碳酸酐酶基因(CA)的克隆与表达分析被引量：12: 2012年; 应用蛋白质组学研究低温胁迫下龙眼叶片蛋白质组变化时发现碳酸酐酶(CA)蛋白下调表达。利用RT-PCR方法克隆CA基因的全长cDNA,GenBank登录号JN033201,长度为1119bp,包括1个966bp的开放阅读框,编码321bp的氨基酸序列,同源性分析表明,12个不同植物同源性为81%～88%。龙眼CA基因具有典型的CA结构域,并且非常保守。实时荧光定量分析结果表明,CA在龙眼根、茎、叶中都有表达,为组成型表达,在叶中的表达量最高,茎和根中的表达量最少。CA基因在低温胁迫下随着低温胁迫时间的延长而发生变化。将CA在大肠杆菌中表达,获得1个约40.5kD的外源蛋白。推测CA表达与低温胁迫有关。; 陈虎何新华罗聪杨丽涛黄杏胡颖; 关键词：龙眼低温胁迫蛋白质组学差异蛋白碳酸酐酶

龙眼水通道蛋白基因(DLPIP1)的克隆与表达分析被引量：11: 2012年; 应用蛋白质组学研究低温胁迫下龙眼叶片蛋白质组变化时，发现PIP1蛋白在龙眼低温胁迫中上调表达。应用RACE技术克隆龙眼水通道蛋白基因全长eDNA，命名为DL纠纠，基因登陆号为JN572691，长度为1132bp，包括1个900bp的开放阅读框，编码299个氨基酸序列，同源性分析表明，DLPIP1在21个不同植物中的一致性为90％-93％。应用生物信息学软件对DLPIP1氨基酸序列分析表明，含有7个跨膜区，有2个NPA单元，其氨基酸残基与MIP家族蛋白保守区序列完全一致。氨基酸序列比对发现，该序列与其他物种PIP质膜水通道蛋白氨基酸序列有很高的同源性。利用实时荧光定量技术对现肼川在低温胁迫下不同组织表达谱分析表明，现用纠在龙眼根、茎、叶中都有表达，在根中的表达量最高，其次是茎和叶。DLPIP1在低温胁迫时，随着低温胁迫时间的延长而发生变化。这说明DLPIP1蛋白在龙眼低温逆境过程中起作用。; 陈虎何新华罗聪邓立宝胡颖李明娟杨丽涛; 关键词：龙眼水通道蛋白低温胁迫克隆

南丰蜜桔贮藏期间果皮褐变的蛋白质组分析被引量：4: 2011年; 为探讨南丰蜜桔采后蛋白质组的变化,采用酚抽法提取果皮蛋白,建立南丰蜜桔果皮蛋白质组研究中的双向电泳技术,获得了重复性好、分辨率高的蛋白质图谱。利用PDQuest软件对所得到的双向电泳图谱进行比较分析,共得到差异蛋白质点45个,其中上调表达的蛋白点有33个,下调表达的蛋白点有12个,这些差异蛋白点可能与果实贮藏相关。; 陈虎何新华罗聪李明娟黄桂香; 关键词：南丰蜜桔果皮蛋白质组

不同龙眼资源遗传多样性的SCoT和ISSR比较分析被引量：16: 2012年; 应用SCoT和ISSR标记对36份龙眼资源和1份近缘种龙荔的遗传多样性进行分析。结果表明:12对SCoT引物共扩增出127条带,平均每条引物扩增10.58条带;15条ISSR引物共扩增出117个条带,平均扩增7.8条带。UPGMA聚类结果表明:SCoT标记和ISSR标记分别在相似系数0.672和0.685水平上,均可将37份材料分成6大类群,SCoT和ISSR标记均适用于龙眼材料的遗传多样性分析,如果将两种标记的数据进行综合分析,可以缩小单一标记的误差。研究结果为龙眼种质资源的保存和利用提供了重要的依据。; 陈虎何新华黄桂香李峰姜建初朱建华; 关键词：龙眼 ISSR

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广西研究生教育创新计划(GXU11T31077)