安徽省自然科学基金(070413086)
- 作品数:5 被引量:6H指数:1
- 相关作者:江彤陈传俊葛婷蒋欣泉杨文宇更多>>
- 相关机构:安徽农业大学安徽医科大学安徽医科大学第三附属医院更多>>
- 发文基金:安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 高危型人乳头瘤病毒16 E5基因对口腔肿瘤致病机制的研究进展
- 2010年
- 人乳头瘤病毒的感染是宫颈癌发病的重要危险因子之一,近些年研究表明其在口腔肿瘤及癌前病变中检出率也较高,提示其与口腔肿瘤发病有关。现有研究主要集中于其E6、E7基因的功能,其他基因涉及较少,本文对近年来兴起的对人乳头瘤病毒E5基因与口腔肿瘤关系的研究及进展作一简要综述。
- 杨文宇江彤陈传俊
- 关键词:人乳头瘤病毒口腔黏膜
- HPV16型E5基因重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-E5的构建与鉴定
- 2010年
- 目的构建HPV16型E5基因重组逆转录病毒表达载体。方法根据HPV16型E5基因已知序列,用PCR方法扩增E5片段,利用逆转录病毒载体pLEGFP-N1构建重组质粒pLEGFP-E5。酶切电泳验证重组质粒pLEGFP-E5后,利用脂质体将重组质粒pLEGFP-E5转染入包装细胞PA317。收集PA317病毒上清转染NIH3T3细胞。结果 PCR结果显示扩增片断大小约252bp,与预期相同。重组质粒酶切后显示其大小约7300bp。pLEGFP-E5成功转染检测细胞。结论重组逆转录病毒表达载体pLEGFP-E5基因构建成功,能有效感染靶细胞。
- 杨文宇江彤陈传俊
- 关键词:乳头状瘤病毒感染转染逆转录聚合酶链反应
- HPV16型E5基因对人永生化口腔上皮细胞E6、E7基因表达的影响被引量:4
- 2011年
- 目的:研究HPV16型E5基因对人永生化口腔上皮细胞(human immortalized oral epithelial cell,HIOEC)E6、E7基因的影响。方法:HIOEC转染pLEGFP-E5基因反转录病毒载体,同时人为突变E5基因并转染HIOEC,通过PCR检测E5及各突变体在HIOEC中的表达。实时定量PCR检测E6、E7基因mRNA水平表达量的变化以及转染后HIOEC的细胞增殖能力,采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学处理。结果:构建了E5缺失突变体反转录病毒载体并成功转染人永生化口腔上皮细胞。转染后人永生化口腔上皮细胞的增殖行为实验表明,HPV16E5基因可促进人永生化口腔上皮细胞增殖(P<0.05),并对E6、E7基因mRNA表达具有正调控作用,但其缺失突变基因反转录病毒载体对人永生化口腔上皮细胞增殖及E6、E7表达无显著影响。结论:HPV16型E5基因可在一定程度上促进人永生化口腔上皮细胞增殖,并对E6、E7基因mRNA表达量有一定的间接上调作用。
- 侯潇潇江彤蒋欣泉陈传俊
- 关键词:E6/E7缺失突变反转录病毒载体
- 鳞状上皮恶性肿瘤组织中HPV16 E5基因的克隆和序列分析被引量:1
- 2008年
- 目的克隆高危型人乳头状瘤病毒(HPV)E5基因,并对HPV16E5基因进行序列分析。方法收集10例安徽省立医院妇产科宫颈癌患者手术中癌变部位病理标本,提取总DNA,设计两对嵌套特异性引物,对模板进行PCR扩增,纯化的目的片段与pMD18-T载体连接后转化大肠杆菌TG1,筛选阳性克隆并测序。结果获得两个样本的E5基因HPV-E5-6和HPV-E5-7,全长均为252 bp,两者测序结果完全一致。构建HPV-E5-6/7与HPV16其它E5基因的系统关系树,显示出他们与HPV16E5(AF120701)亲缘关系最近。结论HPV16E5序列保守性强,特异性引物可有效检测HPV16E5基因,E5基因的获得为进一步研究它的功能建立了良好基础。
- 葛婷江彤陈传俊
- HPVE5基因致病机制及其研究进展被引量:1
- 2008年
- 葛婷陈传俊
- 关键词:人类乳头状瘤病毒HPV型别分子生物学技术上皮组织HPV16细胞病变