浙江省自然科学基金(LQ12H28003) 作品数:8 被引量:45 H指数:5 相关作者: 熊耀康 张春椿 年慧慧 李石清 李效贤 更多>> 相关机构: 浙江中医药大学 浙江省食品药品检验研究院 浙江医药高等专科学校 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 浙江省科技厅项目 浙江省中医药重点研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 更多>>
响应面分析南方红豆杉枝条多糖超声提取工艺及其抗氧化作用研究 被引量:8 2013年 目的:研究南方红豆杉枝条中多糖的超声提取工艺及抗氧化作用。方法:在单因素实验基础上,采用响应面分析法对影响南方红豆杉枝条中多糖提取率的主要因素进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺条件;通过DPPH自由基清除率、还原力和总的抗氧化活性的测定,分析其抗氧化作用。结果:最佳超声提取工艺为:料液比26.78(V/W),提取时间42.81min,超声频率为33.88kHz,提取2次;南方红豆杉多糖对DPPH自由基具有一定的清除作用,总的抗氧化活性和还原能力均随多糖浓度的增加而上升。结论:采用该方法对提取条件进行优化,合理可靠,能为生产工艺提供理论依据;其多糖具有较强的抗氧化作用。 李石清 张春椿 徐磊 熊耀康关键词:南方红豆杉 多糖 超声提取 抗氧化作用 GC/MS法对南方红豆杉种皮抑制物分析研究 被引量:5 2013年 [目的]研究南方红豆杉种皮内源抑制物的种类。[方法]采用系统溶剂分离法对南方红豆杉种皮提取液进行分离,并对乙酸乙酯相、甲醇相、石油醚相进行甲酯化后采用气相色谱-质谱联用仪进行鉴定分析。[结果]南方红豆杉种皮石油醚相中含有8种化合物,乙酸乙酯相中含有6种化合物,甲醇相中含有5种化合物,其主要内源抑制物为十六烷酸、十八烷酸、9-十八碳烯酸、9,12-十八碳二烯酸等,以(Z)9-十八碳烯酸含量最高,在乙酸乙酯相中存在1种未知醇类。[结论]该研究为南方红豆杉种子的综合利用提供科学依据,同时也为完善南方红豆杉种子休眠机理提供理论依据。 张春椿 年慧慧 李效贤 沈晨薇 应明花 王亚芸 熊耀康关键词:GC-MS 南方红豆杉 光照强度对南方红豆杉紫杉醇含量及相关酶基因表达的影响 被引量:3 2017年 [目的]研究光照强度对南方红豆杉中紫杉醇和10-脱乙酰基巴卡丁Ⅲ(10-deacetylbaccatin III,10-DABⅢ)含量变化,探讨其可能的环境适应机制。[方法]通过高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定不同遮光率(50%、70%和90%)分别遮光30、60、90d后紫杉醇和10-DABⅢ含量;通过PCR法测定相关酶基因表达量。[结果]光照强度能够影响紫杉醇的积累。遮光0~90d,空白组紫杉醇和10-DABIII含量呈下降趋势,各遮光组呈先升后降的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。其中50%和70%遮光组明显高于空白组及90%遮光组(P<0.01)。此外,光照对紫杉二烯5α-羟基化酶(taxane 5α-hydroxylase,TH5α)、紫杉烷7β-羟基化酶(taxane 7β-hydroxylase,7β)和紫杉烷14β-羟基化酶(taxane 14β-hydroxylase,14OH)基因表达也存在明显影响,70%遮光组TH5α基因表达量随遮光时间延长而增加,14OH基因则下降(P<0.01)。[结论]本研究初步得到光照因素可以影响南方红豆杉次生代谢产物的合成及相关酶基因的表达,适当的遮光(70%遮光)可以提高紫杉醇的含量,且遮光3月内紫杉醇含量稳定。 秦海燕 范慧艳 李石清 张水利 熊耀康 张春椿关键词:南方红豆杉 紫杉醇 基因表达 南方红豆杉不同部位多糖含量提取分析研究 被引量:5 2014年 目的:探究南方红豆杉枝、叶中红豆杉多糖提取最佳工艺条件,分析比较其枝、叶中红豆杉多糖含量。方法:选取新鲜南方红豆杉枝、叶,利用响应面法(RSM)对其枝、叶中红豆杉多糖提取工艺进行优化。在单因素实验基础上选取实验因素与水平,根据中心组合实验设计原理采用3因素3水平的响应面分析法,依据回归分析确定各工艺条件的影响因子,以红豆杉多糖提取率为响应面值作响应面和等高线。结果:在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出南方红豆杉枝中红豆杉多糖超声最佳提取工艺条件为:水料比24∶1,超声提取功率90W,超声提取时间25min;南方红豆杉叶中红豆杉多糖超声最佳提取工艺条件为:水料比35∶1,超声提取功率70W,超声提取时间30min。南方红豆杉枝中红豆杉多糖一次提取率可达11.6405mg/g,叶中红豆杉多糖一次提取率可达45.8344mg/g。结论:南方红豆杉叶中红豆杉多糖含量比枝中高。 张春椿 李影影 黄孝闻 冯凯波 马多萍 孙瑾 沈津 熊耀康关键词:多糖 南方红豆杉总黄酮、总多糖与紫杉醇配伍增效减毒作用研究 被引量:10 2015年 目的:研究南方红豆杉中总黄酮、总多糖及其与紫杉醇配伍抗肿瘤的增效减毒作用。方法:采用MTT比色法,观察南方红豆杉中总黄酮、总多糖及其与紫杉醇配伍对4T1、A549、MCF-7细胞增殖抑制率的影响;利用等效线图探讨联合用药的行为。采用均匀设计分组,培养S180肉瘤ICR小鼠,观察配伍对荷瘤小鼠移植瘤生长的抑制情况;血液细胞分析仪检测血常规。结果:体外总多糖、总黄酮能够增强紫杉醇对4T1、A549细胞的抑制作用;总多糖能够增强紫杉醇体外对MCF-7细胞、体内对S180荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用,体内减轻紫杉醇抗肿瘤时的骨髓抑制毒副作用。结论:紫杉醇可以通过配伍南方红豆杉总黄酮、总多糖达到增效减毒作用。 蔡伟 夏苗芬 熊耀康关键词:南方红豆杉 紫杉醇 总黄酮 总多糖 增效减毒 基于Box-Behnken设计优选南方红豆杉多糖微波提取工艺研究 被引量:2 2013年 目的:采用中心组合(Box-Behnken)设计优选南方红豆杉[Taxus mairei(Lemee et Levl.)S.Y.Hu ex Liu]枝条中多糖的微波提取工艺。方法:在单因素实验基础上,采用Box-Behnken设计对影响南方红豆杉枝条中多糖提取率的主要因素(料液比、提取时间、提取次数)进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺条件。结果:南方红豆杉枝条中多糖最佳超声提取工艺为:料液比21.48(V/W),提取时间13.78 min,提取次数3次,微波频率为1887MHz。结论:采用响应面法对南方红豆杉中多糖的提取条件进行优化,该方法合理可靠,能为生产工艺提供理论依据。 李石清 徐磊 熊耀康 张春椿关键词:南方红豆杉 多糖 微波提取 BOX-BEHNKEN设计 激素加变温层积法处理南方红豆杉种子生理生化变化研究 被引量:6 2012年 目的:研究南方红豆杉种子萌发的机制,即南方红豆杉种子形态后熟过程中的生物大分子的变化过程。方法:采用0.05%赤霉素(GA3)加低(4℃)-暖(23℃)-低(4℃)变温层积处理南方红豆杉种子,研究其生理生化变化。结果:采用激素加变温层积法处理种子后,蛋白质、氨基酸、可溶性糖都具有在低温层积时期累积较快,暖层积时期消耗较快的特点,三者的含量总体都呈上升趋势,分别比处理前增加115.56%、123.70%、50.71%,但脂肪含量下降40.00%。脱氢酶、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、蛋白酶活性分别比处理前增加111.05%、178.73%、141.84%、169.97%。结论:激素加变温层积法影响南方红豆杉种子生理生化变化,使种子内贮藏物质不断分解代谢、转化和利用,这也是破除其休眠的关键。 张春椿 年慧慧 李石清 谢志慧 熊耀康关键词:生物大分子 生理变化 不同处理方法南方红豆杉种子浸提液内源抑制物活性研究初探 被引量:8 2012年 [目的]研究南方红豆杉种子萌发的机理,探讨南方红豆杉种子浸提液内源抑制物活性。[方法]分别采用低温层积处理及混合营养液加变温层积法处理南方红豆杉种子,通过测定不同方法处理后南方红豆杉种子浸提液对油菜种子幼苗萌发及生长状况的影响,以确定其内源抑制物的存在部分及初步活性。[结果]南方红豆杉种子种皮、胚乳中含有抑制油菜种子萌发及幼苗生长的物质,随着该物质浓度的增加,抑制作用更为显著;相同浓度的胚乳浸提液对油菜种子萌发及幼苗生长的抑制作用显著高于种皮浸提液;低温层积处理的南方红豆杉种子浸提液对油菜种子萌发及幼苗生长的抑制作用显著高于混合营养液加变温层积法处理南方红豆杉种子浸提液。[结论]南方红豆杉种皮及胚乳中均含有内源抑制物,经混合营养液加变温层积法处理能显著降低其内源抑制物的抑制作用。 年慧慧 张春椿 李效贤 熊耀康关键词:南方红豆杉 低温层积