江苏检验检疫局科研项目(2005KJ52)
- 作品数：3 被引量：14H指数：3
- 相关作者：张常印唐泰山鲁韦韦姜平王凯民更多>>
- 相关机构：江苏出入境检验检疫局南京农业大学更多>>
- 发文基金：江苏检验检疫局科研项目江苏省重大科技项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：3
- 2008年
- 根据欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因序列,设计E1和E6 2套PCR引物和TaqMan荧光探针,建立E1和E6荧光RT-PCR方法,用于检测PRRSV。反应条件优化后,用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA进行PCR扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(CSFV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示,建立的E1和E6荧光RT-PCR可以检出欧洲型PRRSV,敏感性依次为616和216个拷贝的PRRSV重组质粒DNA,而CSFV等非PRRSV均为阴性。建立的E1、E6荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可作为检测欧洲型PRRSV的技术储备。
- 鲁韦韦唐泰山姜平张常印王凯民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR
- 美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：3
- 2008年
- 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(HCV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。
- 鲁韦韦唐泰山张常印王凯民姜平
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR特异性灵敏度
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的遗传变异分析被引量：8
- 2007年
- 从GenBank中随机选取25株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的全基因序列进行同源性分析并构建了基因进化树,同时对PRRSV ORF7基因序列进行遗传变异分析,发现PRRSV美洲株之间或欧洲株之间的ORF7基因相对保守,但美洲株和欧洲株的ORF7基因的核苷酸及氨基酸同源性较低。说明建立的针对N蛋白的多种检测方法在高致病性PRRSV肆虐的现今仍具有实用性。
- 鲁韦韦姜平唐泰山李玉峰张常印
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因
