重庆市医学科研计划项目(2009-2-200)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：张娟陈维贤何岸彭辉黄爱龙更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：重庆市医学科研计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- O1群小川型霍乱弧菌单克隆抗体识别表位模拟肽的筛选鉴定
- 2013年
- 目的:以纯化的有高度特异性的IXiao3G6单抗为靶分子,对噬菌体随机7肽库进行淘筛,以期筛选到与O1群小川型霍乱弧菌单抗有高亲和力的模拟肽,为基于表位的霍乱弧菌模拟多肽疫苗的研制奠定基础。方法:运用噬菌体随机7肽库技术,以纯化的IXiao3G6单抗为靶蛋白,进行噬菌体随机肽库3轮筛选,以双抗夹心ELISA和竞争抑制实验分析获得的噬菌体短肽与筛选配基的结合能力及特异性,并进行阳性克隆序列测定和同源性分析。结果:3轮筛选后,阳性噬菌体得到有效富集,夹心ELISA检测随机挑取的25个噬菌体克隆,有22个噬菌体克隆为阳性,测序表明其中20个阳性克隆的氨基酸序列完全一致,均为APAIPAS。对该序列同源性分析,未发现有相同的已知序列。竞争抑制实验表明,O1群小川型霍乱弧菌脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)能很好地抑制阳性克隆与IXiao3G6McAb的结合,抑制程度随LPS浓度的升高而增加,而对照细菌的LPS则不具有相应的抑制作用,进一步提示噬菌体克隆展示肽模拟了O1群小川型霍乱弧菌LPS抗原表位。结论:筛选到模拟O1群小川型霍乱弧菌LPS的抗原表位的模拟肽,为基于表位的霍乱弧菌模拟多肽疫苗的开发与设计提供了实验依据。
- 张娟吴倩彭辉何岸陈维贤黄爱龙郑建
- 关键词：单克隆抗体噬菌体随机肽库模拟肽
