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国家科技重大专项(2008ZX08011-005): 作品数：32 被引量：63H指数：5; 相关作者：刘洪亮王静姜文玲张力陶爱林更多>>; 相关机构：天津市疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心营养与健康所中国农业大学更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学农业科学更多>>

过敏性鼻炎特异性IgE的构成及影响因素分析被引量：7: 2012年; 目的分析过敏性鼻炎特异性IgW的构成及相关的影响因素，为过敏性鼻炎的预防提供数据支持。方法根据患者的人口学变量、环境暴露因素、家族过敏遗传史、生活习惯等内容设计调查问卷，对疑似有过敏症状的患者进行问卷调查，结合调查问卷与实验室检测结果，分析过敏性鼻炎特异性IgE的构成。采用多因素logistic回归，分析过敏性鼻炎的影响因素。结果年龄段在18—39岁、居住在城市以及具有本科或本科以上学历的人群，过敏性鼻炎患病率最高（18．69％，19．00％，22．62％）。矮豚草蒿过敏原是过敏性鼻炎特异性IgE构成中构成比最大、IgE浓度最高的过敏原（构成比36．30％，几何均值7．4IU／m1）。在控制年龄、生活地区和文化程度因素后，过敏性鼻炎的危险因素有：母亲过敏史、食物过敏史和矮豚草蒿过敏。结论预防过敏性鼻炎的重点人群包括：母亲有过敏史和食物过敏。对矮豚草蒿过敏的人群应及时进行脱敏治疗从而降低过敏性鼻炎的发病风险。; 所佳宁关媛媛孙继烨高艳张莉华赵晶刘美娜安立新; 关键词：IGE LOGISTIC回归分析

一种新的Bt杀虫基因HJC原核表达蛋白活性的鉴定: 2012年; HJC基因是由2个Bt基因(cry1Ab和vip3)经过人工融合而成,具有更广谱的杀虫活性,可延缓害虫产生交互抗性的时间。将已构建好的携带HJC基因的重组质粒pET28a-HJC转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。该HJC融合蛋白主要以包涵体形式存在,变性条件下使用镍亲和层析柱对其进行纯化,并经尿素梯度透析复性后,进行免疫反应活性及美国白蛾杀虫活性测定。Western blot结果显示,该原核表达蛋白与转HJC基因水稻中的HJC蛋白有相同的免疫反应性,对美国白蛾也有一定的杀虫活性,可以替代植物外源蛋白进行转HJC基因产品的食用安全性评价。; 苏旭王静吕莉琨李力杨东靖刘洪亮; 关键词：苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白 CRY1AB

苹果过敏原Mal d 4蛋白抗原表位预测及交叉反应分析被引量：9: 2012年; 目的:预测苹果过敏原Mal d 4蛋白B细胞和T细胞抗原表位,探讨Mal d 4蛋白与其同源蛋白之间的交叉反应性。方法:以苹果过敏原Mal d 4蛋白的氨基酸序列为基础,采用生物信息软件HNN预测二级结构;运用DNAStar和Bcepred软件预测其B细胞抗原表位,用NetMHCⅡ、NetMHCⅡpan、Syfpeithi及Propred软件综合预测T细胞抗原表位;采用Clustal X1.83、Swiss-Model软件比对同源序列和模拟空间构象。结果:该蛋白二级结构以无规则卷曲为主。B/T细胞共同抗原表位的区域为53～61、85～93。苹果Mal d 4蛋白与桃、芒果、甜樱桃、草莓中的前纤维蛋白氨基酸序列同源性达88%以上,空间构象相似。结论:苹果过敏原Mal d 4蛋白与桃、芒果、甜樱桃和草莓的前纤维蛋白之间可能存在交叉反应,其优势抗原表位区域可能为53～61、85～93,是后续过敏原改造的重点,为继续深入开展苹果过敏原基础性研究提供理论依据。; 夏宏林何颖邹泽红陶爱林; 关键词：MAL 抗原表位

抗虫耐除草剂玉米DBN9936×DBN9501和亲本玉米DBN318的营养成分和抗营养成分的比较研究被引量：1: 2023年; 目的:分析比较3个不同产地抗虫耐除草剂玉米DBN9936×DBN9501和亲本玉米DBN318的营养成分和抗营养成分。方法:对3个产地抗虫耐除草剂玉米DBN9936×DBN9501和亲本玉米DBN318的营养成分(水分、灰分、蛋白质、脂肪、碳水化合物、粗纤维、能量、脂肪酸、矿物质、维生素、氨基酸)和抗营养成分(植酸、棉子糖)进行检测和分析。结果:2018北京产转基因玉米泛酸、锌、硒、硬酯酸含量高于亲本玉米;2017北京产转基因玉米磷、钙、铜、铁、锰、锌、硒含量高于亲本玉米,棕榈油酸含量低于亲本玉米;2018三亚产转基因玉米泛酸、铁含量高于亲本玉米,珠光脂酸、精氨酸含量低于亲本玉米。但上述各营养素含量差异为个别产地、个别营养成分转基因玉米与亲本玉米营养成分的差异,3个产地营养素含量差异无一致性规律。另外,上述营养素含量基本在OECD或ILSI给出的参考范围内,因此认为上述差异属于自然波动。其余各营养成分转基因玉米和亲本玉米相比均无显著性差异。抗营养成分检测结果显示,2017北京产转基因玉米的植酸含量高于亲本玉米,2017北京产和2018三亚产转基因玉米的棉子糖含量低于亲本玉米,但3个产地之间无一致性规律,且上述抗营养成分含量均在ILSI或OECD的参考范围内,属于自然波动。结论:抗虫耐除草剂玉米DBN9936×DBN9501和亲本玉米DBN318在营养成分和抗营养成分上具有实质等同性。; 韩超石丽丽刘婷婷赵金鹏毛宏梅陈晨李岩; 关键词：转基因玉米营养成分

转GmDREB3基因抗旱小麦与亲本小麦的营养成分比较与分析被引量：8: 2017年; 目的:比较和分析转GmDREB3基因小麦和亲本小麦的营养成分。方法:对转GmDREB3基因抗旱小麦与其亲本小麦的营养成分:水分、灰分、蛋白质、脂肪、膳食纤维、氨基酸、维生素、矿物质、脂肪酸等进行检测和分析。结果:转基因小麦的个别营养成分如总膳食纤维、泛酸、叶酸、维生素B12含量高于亲本小麦,其余营养成分含量与亲本小麦相比没有明显差别,大多数营养成分的检测结果在OECD推荐的参考范围内。结论:转GmDREB3基因小麦和亲本小麦在营养成分上具有实质等同性。; 赵金鹏韩超任硕王同蕾张雪松赵佳沈湘刘婷婷卓勤李岩; 关键词：转基因小麦营养成分抗旱基因

蛔虫过敏原ABA-1融合基因在大肠杆菌中的表达及鉴定: 2011年; 背景:利用蛔虫基因融合技术,可将过敏原ABA-1的主要基因进行融合。目的:利用大肠杆菌表达系统重组表达蛔虫主要过敏原ABA-1融合蛋白。方法:从Gene Bank和Protein Database中获取蛔虫主要过敏原ABA-1基因和蛋白序列,选定其中的ABA-1B1,ABA-1A2与ABA-1A1基因重组为融合基因BAA,经密码子优化后,全基因合成目的基因BAA并构建于表达载体PET-44a上,经KCM法转化入大肠杆菌JM109中进行克隆,PET-44a/BAA经NdeⅠ和PstⅠ双酶切及DNA测序正确后,转化入大肠杆菌Rosetta Blue TM中,经IPTG诱导表达。表达蛋白经Ni柱亲和层析纯化后,通过Western blot和氨基酸测序鉴定目的蛋白。结果与结论:大肠杆菌的融合蛋白BAA表达量约占总蛋白的40%,纯化后蛋其白纯度可达90%左右。Western Blot结果显示在相对分子质量45000处可见一特异目的条带,氨基酸测序显示N端15个氨基酸与目的蛋白完全相同。结果证实,融合蛋白BAA在大肠杆菌中得到高效的表达。; 于超生文忠邹泽红陈惠芳陶爱林; 关键词：蛔虫密码子优化

速发型超敏反应疾病影响因素病例对照研究被引量：4: 2013年; 目的了解速发型超敏反应疾病的相关影响因素,为采取相应干预措施提供依据。方法采用简单随机抽样方法对2010年3—12月在哈尔滨医科大学附属第一医院过敏反应科就诊的1 382例患者进行问卷调查和血清过敏原特异性IgE检测,抽取其中503例速发型超敏反应疾病患者作为病例组,其他879例非速发型超敏反应疾病患者作为对照组,应用单因素和多因素logistic回归分析速发型超敏反应疾病的影响因素。结果单因素logistic回归分析结果表明,性别(OR=0.778)、年龄(OR=0.913)、母亲过敏史(OR=1.514)和饮酒(OR=0.713)是速发型超敏反应疾病的相关影响因素;多因素logistic回归分析结果表明,母亲过敏史(OR=1.483,95%CI=1.067～2.062)是速发型超敏反应疾病的危险因素,女性(OR=0.709,95%CI=0.557～0.903)和饮酒(OR=0.628,95%CI=0.426～0.927)是速发型超敏反应的保护因素;采用分层分析控制性别因素后结果表明,女性人群适量饮酒(OR=0.264,95%=0.092～0.761)是速发型超敏反应疾病的保护因素。结论母亲有过敏史的人群是速发型超敏反应疾病的高危人群,女性适量饮酒不易发生速发型超敏反应。; 赵晶张莉华关媛媛孙继烨高艳罗潇所佳宁刘美娜; 关键词：速发型超敏反应影响因素病例对照研究

耐草甘膦基因G6原核表达蛋白条件的优化及其免疫反应性分析被引量：3: 2012年; 目的在大肠杆菌中表达耐草甘膦基因G6,并对其进行免疫反应性分析。方法将已构建好的携带G6基因的重组质粒pET28a-G6转化到大肠杆菌BL21中诱导表达,分别从诱导温度、异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)浓度及诱导时间进行了表达条件的探索。获得的重组蛋白在非变性条件下镍亲和层析纯化后,经质谱鉴定,对其免疫反应活性进行测定,分析该原核表达蛋白与转G6基因水稻中蛋白的等同性。结果利用原核表达系统成功实现了G6重组蛋白的高效表达,其最适条件为:0.5 mmol/L IPTG、30℃和160 r/min摇床转速诱导7 h。质谱鉴定为5-烯醇式丙酮酸-莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS)。Western blot鉴定后,表达的重组蛋白与转G6基因水稻中的G6蛋白有相同的免疫反应性。结论利用原核表达系统表达的G6重组蛋白可以替代植物外源蛋白进行转G6基因产品的食用安全性评价,也可用于转G6基因产品ELISA检测的抗体制备。; 吕莉琨苏旭王静李力杨东靖刘洪亮

法桐花粉主要过敏原基因Pla a1重组表达及鉴定被引量：2: 2012年; 目的:表达、纯化和鉴定法国梧桐花粉主要变应原基因Platanus acerifolia pollen allergen1(Pla a1)。方法:首先根据文献查找并在GenBank获取法国梧桐花粉主要变应原基因序列Pla a1,利用DNAStar软件进行密码子优化;合成全基因;将Pla a1与载体pET-44a连接后转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导并优化目的蛋白表达;利用亲和层析法纯化该外源表达蛋白;应用Western blot,利用法桐花粉过敏患者血清鉴定纯化后的目的蛋白的抗原性。结果:成功构建了pET44a-Pla a1阳性质粒;获得了法桐花粉主要变应原重组蛋白Pla a1;对该重组蛋白进行了亲和层析纯化;免疫印记法表明重组蛋白具有一定的抗原性。结论:首次利用密码子优化的方法获得融合Strep TagⅡ的法桐花粉过敏原重组蛋白Pla a1,为制备高纯度变应原、重组低致敏过敏原及变应原核酸疫苗奠定基础。; 王贵佐陶爱林孙秀珍李满祥刘昀邹泽红吴媛媛; 关键词：密码子优化纯化

转基因植物乳杆菌LP590体外耐受性质的研究: 2011年; 植物乳杆菌是乳酸菌中的一种,它具有许多适应于工业生产的优良性质。转基因乳杆菌LP590是由植物乳杆菌LP为亲本,插入nisin基因得到的。为了研究转基因植物乳杆菌LP590的体外耐受性质,本实验以LP590作为对照,将LP590对高温（52℃）、低温（4℃）、乙醇（20%）、过氧化氢（2%）、氯化钠（4mol/L）的耐受性进行了研究。研究表明,LP590与LP在4℃和20%乙醇环境中暴露240min,两株菌有相同的耐受性。而LP590比LP更加耐受高温（52℃）、过氧化氢（2%）和氯化钠（4mol/L）。从研究结果可以看出,转基因植物乳杆菌LP590的体外耐受性总体优于LP,这也为从整体上评价转基因微生物提供了依据。; 刘海燕郭星许文涛王洪新田洪涛黄昆仑; 关键词：乳酸菌

国家科技重大专项(2008ZX08011-005)

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