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国家自然科学基金(30500270)

作品数：21 被引量：50H指数：4
相关作者：刘莉采克俊张易祥丁志丽何湃更多>>
相关机构：湖州师范学院苏州大学扬州大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金湖州市自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 21篇中文期刊文章

领域

  • 14篇农业科学
  • 8篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 9篇精原干细胞
  • 9篇干细胞
  • 5篇睾丸
  • 4篇鸡胚
  • 3篇基因
  • 3篇MXA
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇支持细胞
  • 2篇生殖
  • 2篇体外
  • 2篇转基因
  • 2篇睾丸支持细胞
  • 2篇睾丸组织
  • 2篇细胞
  • 2篇精子
  • 2篇抗病
  • 2篇抗病毒
  • 2篇抗病毒基因
  • 2篇冷冻保存

机构

  • 20篇湖州师范学院
  • 7篇苏州大学
  • 5篇扬州大学
  • 1篇浙江省淡水水...

作者

  • 20篇刘莉
  • 19篇采克俊
  • 17篇张易祥
  • 9篇丁志丽
  • 5篇曹访
  • 5篇何湃
  • 4篇丁海雷
  • 4篇张念慈
  • 3篇于立颖
  • 2篇陈云波
  • 2篇王杏龙
  • 2篇谢小丹
  • 2篇李景芬
  • 1篇张焕相
  • 1篇周国庆
  • 1篇曹广力
  • 1篇周政
  • 1篇周源
  • 1篇董顺利

传媒

  • 4篇安徽农业科学
  • 4篇上海畜牧兽医...
  • 3篇中国家禽
  • 3篇中国畜牧杂志
  • 2篇黑龙江畜牧兽...
  • 2篇细胞生物学杂...
  • 2篇中国生物工程...
  • 1篇Asian ...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2010
  • 8篇2009
  • 10篇2008
  • 1篇2006
共 21 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
MxA基因修饰的鸡精原干细胞体内移植获得转基因精子被引量：1
2013年
本实验旨在探讨鸡精原干细胞(SSCs)经体外遗传修饰后移植获得转基因精子的方法。将人抗病毒基因MxA重组慢病毒体外感染鸡SSCs,获得可表达MxA的SSCs;同时将80日龄公鸡经白消安处理30 d后作为无生精能力的受体鸡。MxA基因转染后的SSCs移植到受体鸡,10 d后开始采精,经PCR检测精液DNA中的MxA基因;取移植后10 d的睾丸组织分离培养并检测外源基因表达。结果表明:MxA重组慢病毒感染SSCs后,可见其特征性荧光表达;白消安处理后的受体鸡睾丸组织曲细精管中内源性生精细胞已基本去除;实验组有1只受体鸡的精液DNA连续4次扩增出MxA特异性片段;睾丸组织细胞的RT-PCR及免疫组化均检测到MxA基因的表达。结果显示,重组慢病毒感染后的SSCs能成功移植至受体组织,并继续分化为携带MxA外源基因的精子。本研究为下一步通过人工授精获得抗病毒转基因鸡奠定了良好基础。
刘莉何湃采克俊张易祥曹访李景芬
关键词：MXA慢病毒载体
精原干细胞研究概况被引量：2
2009年
介绍了精原干细胞(SSCs)的起源、分化潜能、分离纯化、体外培养、特征鉴定、移植及其介导的转基因技术,概括了SSCs研究的意义,并对其应用前景进行了展望。
采克俊周国庆张易祥丁志丽刘莉
关键词：精原干细胞
精原干细胞的分离纯化方法被引量：10
2008年
采克俊张易祥丁志丽丁海雷张念慈刘莉
关键词：精原干细胞分离纯化方法遗传资源保护精子细胞增殖分化生精细胞
抗病毒基因MxA真核表达载体的构建及在鸡细胞中的表达被引量：6
2008年
将人抗病毒蛋白基因MxA与携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的真核表达质粒重组后构建MxA基因真核表达载体pEGFP-C1-MxA。经PCR和酶切方法鉴定后,重组质粒在脂质体介导下转染鸡成纤维细胞和睾丸组织原代细胞,通过荧光观察,RT-PCR及细胞免疫组化检测目的基因的表达。结果表明,MxA基因片段已经被克隆到pEGFP-C1表达载体,成功构建了MxA基因真核表达载体pEGFP-C1-MxA。经该重组质粒转染后的鸡细胞的胞质中呈现颗粒状分布的绿色荧光,RT-PCR扩增出EGFP和MxA基因的特异性片断,免疫组化结果显示EGFP报告基因在细胞内的阳性表达,并表现出MxA的表达特征,间接证明了MxA可在鸡细胞中表达。MxA基因真核表达载体的成功构建以及在鸡细胞中的表达为进一步研究MxA基因在抗禽病毒性疾病中的应用打下了基础。
刘莉采克俊张易祥何湃丁志丽张念慈
关键词：转染
睾丸组织移植研究进展被引量：1
2008年
睾丸组织移植是将同种或者异种供体的睾丸组织移植到受体的皮下、腹腔等血管丰富的部位后,检测移植物生长发育和精子发生情况。利用睾丸组织移植的方法来加速供体睾丸细胞的分化与增殖,在较短的时间内得到大量的生殖细胞,这对于种质资源保存、精子发生研究和男性不育症的治疗都是一有效的技术手段。本文对睾丸组织移植的供体选用、受体准备、移植的部位、移植物处理和检测以及移植技术的应用作一综述。
于立颖刘莉采克俊
关键词：睾丸组织精原干细胞
白消安对性成熟公鸡睾丸发育的影响被引量：1
2009年
将96只165日龄健康公鸡随机分为3组,分别行腹腔内单次注射法注射白消安0、50、60mg/kg鸡重,分别在白消安处理后5、10、15、20、25、30d研究其对鸡睾丸形态和曲细精管组织学方面的影响。结果表明,白消安(50mg/kg、60mg/kg)可显著降低鸡的睾丸质量并严重损伤鸡睾丸曲细精管和生精细胞,是制备精原干细胞移植受体的合适剂量。
陈云波张易祥曹广力刘莉采克俊
关键词：公鸡睾丸发育白消安
鸡胚睾丸支持细胞的分离、纯化与鉴定被引量：3
2008年
以18天鸡胚睾丸为实验材料,经胶原酶和胰蛋白酶两步酶消化法得到生精上皮细胞悬液。在原代培养过程中经差异贴壁和低渗处理后,获得了纯度约为90%的单层支持细胞。对纯化的培养物染色鉴定,结果显示支持细胞为碱性磷酸酶(AKP)阴性,而混杂在其中的另一种体细胞管周细胞为AKP阳性;油红O染色显示,支持细胞胞质内含有大量的脂肪滴,核内见双极小体;吖啶橙染色证实支持细胞富含RNA;罗丹明123染色显示支持细胞富含线粒体;Hoechst33342染色显示支持细胞细胞核呈长卵圆形,核的长轴与细胞长轴平行;免疫荧光染色显示支持细胞胞质中表达波形蛋白。建立了一套简单、易行的鸡胚睾丸支持细胞分离纯化与鉴定方法。
采克俊刘莉丁海雷张易祥丁志丽张念慈
关键词：鸡胚睾丸支持细胞纯化
鸡精原干细胞分离培养初步研究被引量：4
2008年
[目的]建立禽类精原干细胞(SSCs)体外培养系统。[方法]以25日龄广西土鸡为试材,通过睾丸石蜡切片和HE染色,了解SSCs发育情况,用两步酶消化法分离获得生精上皮细胞,比较不同温度、接种密度对鸡SSCs体外培养的影响,并对SSCs的集落进行染色鉴定。[结果]结果显表明,25日龄时SSCs已经形成,但还未分化。37℃适宜作为鸡SSCs的培养温度,5×105个/ml适宜作为鸡SSCs原代混合培养的接种密度。经碱性磷酸酶和糖原染色鉴定,体外培养的鸡SSCs仍保持未分化的特性。[结论]该研究为禽类SSCs体外培养的基础资料提供参考。
采克俊刘莉张易祥于立颖丁海雷丁志丽谢小丹
关键词：精原干细胞
绿色荧光蛋白在鸡胚成纤维细胞中的表达
2006年
应用阳离子脂质体介导法,将含绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-C1转染到培养至第二代的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,同时使用活体DNA染料Hoechst3334(2H342)对CEF细胞核荧光染色,通过荧光倒置显微镜和RT-PCR方法检测GFP的表达产物。在荧光倒置显微镜下可见CEF的胞质和核均呈现绿色荧光,且细胞核的绿色荧光强度强于细胞质,在H342作用下,细胞核呈现蓝色荧光;转染细胞中转录产物经RT-PCR扩增后,在凝胶上可见与GFP基因片段分子量大小一致的条带。可见,GFP基因可以被转染至CEF中,并在CEF中表达。
丁志丽采克俊张易祥刘莉
关键词：绿色荧光蛋白鸡胚成纤维细胞HOECHST33342
Effects of 17beta-estradiol on cell migration in male chicks distribution of primordial germ被引量：1
2008年
瞄准：估计外长的 estradiol 是否在小鸡在初发的细菌房间(PGC ) 的移植上有任何效果。方法：使肥沃的卵与 17beta-estradiol 被对待(在阶段 X (白天 0 孵化) 的 E 2)(80 μg/egg ) ，阶段 8-10 (孵化 30 h ) 和 13-15 (孵化 55 h ) 。控制仅仅收到了车辆(乳剂) 。在 PGC 数字的变化根据发展阶段在不同的天被测量。结果：在男正确性腺，然而并非在女左性腺，在阶段 28-30 (孵化 132 h )，在聚集的 PGC 的吝啬的数字的重要减少与控制相比被观察( P < 0.05 )当在在每个阶段的正确、左的性腺的全部的 PGC 数字没变化时( P > 0.05 )。结论：现在的学习提供 E2 在离开的男权利，然而并非女性在 PGC 的本地化上有重要效果的证据，在阶段 28-30 的鸡胚胎的性腺，与控制相比。
Xiu-Mei JinYi-Xiang ZhangZan-Dong Li
关键词：原生殖细胞男性生殖器男性疾病
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