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传代培养对供核细胞胰岛素样生长因子Ⅱ基因表达的影响被引量：4: 2008年; 目的通过建立一种简便可靠的胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF2)基因实时荧光定量PCR检测方法来探讨传代培养对供核细胞中IGF2基因表达的影响。方法通过实时荧光PCR,选择合适的"相对标准品"绘制相对标准曲线,检测来源于鼠耳的成纤维样细胞IGF2的表达。结果通过实时PCR的相对定量检测出在鼠耳成纤维样细胞的传代培养中,随着培养代数的增加,IGF2的表达减弱。结论双标准曲线的实时荧光PCR相对定量法用于检测IGF2的表达是可行的;培养代数影响IGF2基因的表达,为体细胞克隆研究中供核细胞的选择及后续的基因印迹研究奠定基础。; 杨晓煜黄燕芳; 关键词：IGF2 基因表达成纤维样细胞

5-氮脱氧胞苷及曲古抑菌素A影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性及浓度依赖性: 2008年; 目的:探讨甲基转移酶抑制剂——5-氮脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-dC)和组蛋白去乙酰基酶抑制剂——曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)影响供核细胞H19基因表达的时间依赖性和浓度依赖性。方法:用不同浓度5-aza-dC及TSA按不同作用时间处理供核细胞(鼠尾尖成纤维样细胞),利用实时定量PCR法检测处理后H19基因的表达。结果:不同浓度的5-aza-dC处理组之间H19的表达无明显差异,但延长作用时间可使H19表达增强;TSA使H19的表达下降,但无时间依赖性。结论:长时间低浓度的5-aza-dC能增强供核细胞中H19基因的表达,而TSA则使H19的表达减弱,为体细胞克隆中表观遗传修饰抑制剂的选择及后续基因印迹研究提供了依据。; 杨晓煜姚建凤黄燕芳张更徐榕清郑鸣; 关键词：甲基转移酶抑制剂组蛋白脱乙酰基酶抑制剂 5-AZA-DC TSA 供核细胞

胚胎早期发育体外共培养体系的比较被引量：1: 2008年; 目的探讨共培养体系中体细胞对胚胎早期发育的影响及比较2种常用共培养体系的优劣。方法实验分3组:同种不同类型体细胞,受精卵分别在含颗粒细胞和成纤维细胞的M199培养液中培养;异种同类型体细胞,受精卵分别在含牛颗粒细胞和小鼠颗粒细胞中M199培养液中培养;2种共培养体系比较,受精卵分别在"M199+颗粒细胞"和"B2+Vero细胞"的共培养体系中培养。结果颗粒细胞组较成纤维细胞组囊胚率高(P<0.05);牛颗粒细胞组和小鼠颗粒细胞组在卵裂率和囊胚率方面差别无统计学意义;"M199+颗粒组"在卵裂率和囊胚率方面与"B2+Vero组"差别无统计学意义,但囊胚细胞数较少(P<0.05)。结论在一定的条件下,共培养体系中体细胞对胚胎早期发育有一定影响;"B2+Vero细胞"的共培养体系优于"M199+颗粒细胞"的共培养体系。; 陈鹏杨晓煜郑鸣黄燕芳张更; 关键词：胚胎发育共培养

实时荧光定量PCR检测传代培养细胞Grb10的表达被引量：2: 2008年; 目的建立一种可靠的Grb10印迹基因实时荧光定量PCR方法,检测传代培养鼠尾成纤维样细胞中Grb10表达的差异。方法通过实时荧光PCR,选择合适的"相对标准品"绘制相对标准曲线,检测传代培养细胞中印迹基因Grb10的表达水平。结果相对标准曲线有较好的线性(r=0.999及0.984);实时荧光定量PCR方法检测出随着细胞培养代数的增加印迹基因Grb10表达水平上升。结论双标准曲线的实时荧光定量PCR法用于检测Grb10的表达准确可靠;传代培养可能影响鼠尾成纤维样细胞中印迹基因Grb10的表达水平。; 杨晓煜姚建凤黄燕芳张孟璋; 关键词：聚合酶链反应等位基因基因表达蛋白质类

生殖周期不同阶段子宫内膜上皮凝集素受体的表达被引量：2: 2007年; 目的探讨生殖周期不同阶段子宫内膜上皮凝集素受体的变化。方法将生殖周期不同阶段子宫内膜标本行凝集素亲合组织化学ABC法。结果随着着床期的到来,RCA受体数量增多,PNA和DBA仍保持着动情期的高水平。种植后进入妊娠中期PNA、DBA和ConA受体水平则迅速下降,到妊娠末期DBA和ConA受体水平再次升高,分娩后再次下降,而RCA和PNA从妊娠中期到分娩一直保持不变。结论子宫内膜凝集素受体的改变与胚泡的着床及妊娠分娩有关。; 黄燕芳杨晓煜郑鸣张更; 关键词：凝集素生殖周期子宫内膜

Igf2r及Mest印迹基因在供核细胞中的表达及意义: 2008年; 目的:探讨细胞传代培养对胰岛素样生长因子Ⅱ受体(insulin-like growth factor Ⅱ receptor,Igf2r)和Mest基因表达的影响,以及它们在不同部位来源的成纤维样细胞(fibroblast-like cells)中的表达。方法:利用实时定量PCR法检测印迹基因Igf2r和Mest在来源于鼠耳和尾尖的成纤维样细胞中的表达。结果:在鼠尾成纤维样细胞的传代培养中,随着培养代数的增加,Igf2r的表达减弱,Mest的表达无明显变化;Igf2r在鼠尾成纤维样细胞中的表达高于鼠耳。结论:传代培养影响Igf2r基因的表达,Igf2r在不同部位来源的成纤维样细胞中的表达具有差异,为供核细胞的选择及后续的基因印迹研究奠定了基础。; 杨晓煜黄燕芳姚建凤; 关键词：基因表达

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国家自然科学基金(30500282)