北京市自然科学基金(7133247)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
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- 蚂蟥酶解工艺研究被引量：6
- 2014年
- 目的确定蚂蟥的最佳酶解工艺。方法选取活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)3种抗凝活性指标,以外翻肠囊实验筛选蚂蟥酶解物在肠吸收前后最佳活性测定指标。采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合酶(先胃蛋白酶后胰蛋白酶)对蚂蟥进行酶解,以筛选得到的最佳活性指标考察酶的种类、酶底比、酶解时间以及酶解温度对蚂蟥酶解工艺的影响。结果 TT是测定蚂蟥酶解物抗凝活性的最佳指标,采用胰蛋白酶对蚂蟥酶解可获得高活性的酶解产物,最佳的酶解条件为温度73℃,酶底比10%,酶解时间8 h。结论 TT作为抗凝指标进行酶解工艺考察,可反映整个凝血过程,结果更可靠,且该法操作简便,灵敏度高。所优选的酶解工艺简单可行,可为蚂蟥合理提取提供依据。
- 孙雪袁瑞娟赵智婕詹雪艳王雄飞段天璇
- 关键词：蚂蟥胃蛋白酶活化部分凝血活酶时间凝血酶原时间凝血酶时间
- 一种凝血酶亲和色谱介质的制备方法被引量：2
- 2013年
- 对凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质的制备方法进行了研究。首先使用凝血酶和溴化氰活化的琼脂糖制备凝血酶-琼脂糖亲和色谱介质,然后用生色底物法考察亲和色谱介质上凝血酶的活性,以凝血酶活性为指标对最佳偶联条件进行了优化。结果表明最佳条件为使用pH8.3的Na2CO3-NaHCO3溶液(含0.5 mol/L NaCl)为缓冲溶液,凝血酶用量为每1 g色谱介质加入凝血酶200 U,室温反应10 h。在最佳条件下所制备的色谱介质有较好的稳定性,在4℃条件下存放40天,亲和介质上的凝血酶活性仍有70.6%保留。该亲和色谱介质可广泛用于含凝血酶抑制剂的天然药物筛选和分离纯化。
- 王雄飞张玉杰叶静罗志强詹雪艳袁瑞娟
- 关键词：凝血酶生色底物法
- 常见无机盐对aPTT、PT、TT测定的影响被引量：4
- 2014年
- 目的探讨常用无机盐对活化部分凝血酶时间(aPTT)、凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)的影响。方法以不同浓度的NaCl、KCl、NaHCO3、NaH2PO4为样品测定aPTT、PT和TT。结果四种无机盐能够明显延长aPTT、PT、TT时间,呈现出体外抗凝作用,作用强度与浓度呈正相关。四种盐抗凝能力强弱如下:NaH2PO4>NaHCO3>NaCl>KCl。结论无机盐会参与到凝血过程,对aPTT、PT和TT产生影响,如果样品中含有无机盐,应考虑到其影响。
- 孙科孙雪王雄飞詹雪艳袁瑞娟
- 关键词：无机盐活化部分凝血酶时间凝血酶原时间凝血酶时间
