国家自然科学基金(30771861)
- 作品数：8 被引量：56H指数：5
- 相关作者：邓小昭张云姚苹苹王忠灿杨占秋更多>>
- 相关机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所浙江省疾病预防控制中心武汉大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划“十一五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 东南沿海地区地理景观与恙虫病流行特征关系被引量：24
- 2010年
- 目的查明东南沿海地区恙虫病的流行特征,为采取预防措施提供依据。方法在福建、浙江、江苏省选择有代表性的调查点,收集地理景观及流行病学资料;进行现场调查及实验研究,了解鼠类、恙螨与恙虫病的关系。结果东南沿海地区恙虫病按季节分布主要有2型。夏季型:流行于福建、浙江省;主要宿主动物为黄毛鼠、黄胸鼠;主要媒介为地里纤恙螨;流行于5-10月;恙虫病东方体为G illiam型。秋冬型:流行于江苏省;主要宿主动物为黑线姬鼠、褐家鼠;主要媒介为小盾纤恙螨;流行于10-12月;恙虫病东方体为Kawasak i型。结论福建、浙江、江苏省恙虫病的病原体型别、储存宿主、媒介恙螨与流行特征均有所不同,因此,采取的预防措施亦应有所区别。
- 张云吴光华邓小昭王忠灿曹广文
- 关键词：恙虫病地理景观
- 东南沿海地区地理景观与HFRS流行特征关系被引量：6
- 2010年
- 目的东南沿海地区是肾综合征出血热(HFRS)的主要疫区;了解该地区HFRS自然疫源地的地理景观结构,分析流行特征、为预防措施提供理论依据。方法根据以往资料和疫区类型选择14个地区应用地理景观和血清流行病学方法进行调查,分析该病的流行特征。结果该地区景观特点是以平原和丘陵为主,多湿润,位于多水带,属亚热带和温带气候,具有广阔的农作物,为HFRS主要宿主动物提供了良好的栖息繁殖和食物条件。黑线姬鼠和褐家鼠是HFRS的主要宿主动物和传染源,数量多,带毒率高;14个出血热疫区共检查鼠形动物4 386只,出血热抗原阳性267只,阳性率为5.1%;出血热抗体阳性364只,阳性率8.3%。近5年来该地区HFRS发病率较2000年以前有所上升。结论东南沿海地区仍是HFRS的主要疫区。
- 邓小昭张云王忠灿姚苹苹朱涵坪吴光华曹广文
- 关键词：东南沿海肾综合征出血热地理景观
- 同一疫区汉坦病毒、恙虫病东方体共有宿主和媒介的分子流行病学研究被引量：1
- 2008年
- 目的了解汉坦病毒（HV）和恙虫病东方体（OT）在宿主和媒介体内的共生和自然感染情况。方法采用现场流行病学调查，捕鼠166只、采螨3829只，用组织细胞培养和聚合酶链反应（PCR）技术从宿主和媒介体内分离和检测HV和OT病原体，以及HV．RNA、OT-DNA。结果其中，捕获的105只黑线姬鼠中HV阳性3只，OT阳性2只，HV、OT同时阳性2只；41只褐家鼠中HV阳性2只，OT阳性1只，HV、OT同时阳性1只。从15份双重感染HV和OT阳性鼠体螨中分离到HV病原体2株，OT2株，同时分离到HV和OT有1份。结论HV和OT可同时自然感染并共生于宿主（鼠类）体内，而HV和OT能否同时感染媒介（恙螨）尚待证实。研究结果对HV和OT的流行和预防有重要的理论意义。
- 邓小昭张云孔晶王忠灿杨占清黄尉初苏德茂严国进杨占秋
- 关键词：恙螨科汉坦病毒恙虫病东方体流行病学研究
- 汉坦病毒部分S基因在毕赤酵母中的分泌表达
- 2009年
- 目的构建并表达汉坦病毒（HV）Z10株（HV-Z10）S基因蛋白编码区前300bp核苷酸序列，研究该基因在毕赤酵母（Pichia pastoris）中的表达及其产物的生物活性。方法根据HV-Z10 S基因前300bp（S300）的核苷酸序列，按照编码氨基酸的密码子转换成酵母偏爱的形式，设计合成8条引物，通过连续PCR，获得人工合成Z10株S基因前300bp的基因序列SP300，经测序，SP300与S300的核苷酸相似性为76.2％，但编码的氨基酸序列完全一致。将SP300克隆到酵母穿梭载体pPICZaA，构建含α-factor分沁信号肽的重组表达载体pPICZaA-SP300。将pPICZaA-SP300、pPICZaA-S300化学法转化酵母GS115菌株，筛选重组转化子。结果重组了SP300与S300的酵母转化子经甲醇诱导，表达出重组蛋白rNP300及rN300，SDS-PAGE显示相对分子质量为12×10^3左右。经ELISA检测及Western Blot分析，表达产物能与抗汉坦病毒抗体起免疫反应。结论SP300和S300基因在毕赤酵母中获得分泌表达，使用酵母偏爱密码子的SP300基因在毕赤酵母中的表达量与S300的表达量基本一致，表达量在诱导24h后最高。
- 朱函坪姚苹苹邓小昭徐芳谢荣辉朱智勇张云
- 关键词：汉坦病毒属基因基因表达毕赤酵母
- 浙江省慈溪市啮齿动物中汉坦病毒分子流行病学研究被引量：8
- 2008年
- 目的研究浙江省慈溪市啮齿动物中汉坦病毒（HV）流行情况及病毒型别。方法采用间接免疫荧光法（IFA）检测鼠肺中HV抗原；用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法扩增阳性样品中HV的部分S片段；构建系统发生树进行系统发生分析及分型。结果在慈溪市肾综合征出血热（HFRS）疫点共捕获啮齿动物243只，在7份鼠肺样品中检测到HV抗原，其中4只为褐家鼠，3只为黄胸鼠，病毒携带率为2．88％。用汉城型病毒（SEOV）特异性引物从6份HV抗原阳性样品中扩增出部分S片段（620～999nt）并测定了序列。对扩增出的部分S片段核苷酸序列分析表明，6株病毒与现有的SEOV有最高的同源性，均为SEOV。用部分S片段核苷酸序列所构建的系统进化树显示，6株病毒构成两个单元支，其中由褐家鼠携带的3株病毒与BjHD01株病毒的亲缘关系最近，分在同一分支，由黄胸鼠携带的3株病毒构成另一分支，与L99、R22及Hb8610株的亲缘关系较近。结论慈溪市的褐家鼠与黄胸鼠分别携带一种不同亚型的SEOV，表现出SEOV在同一地区的遗传多样性，并支持宿主与汉坦病毒共进化的理论。
- 范飞能杨鹏飞施南峰高娜陈国华李明慧邹洋邓小昭张永振
- 关键词：汉坦病毒系统发生分析基因分型
- 汉坦病毒ZJ5株M和S全片段的分子特性及序列的比较分析被引量：1
- 2008年
- 目的对浙江新分离的汉坦病毒疫苗后备筛选毒株ZJ5株的M和S全片段进行基因序列测定与基因分型，了解该毒株分子基础，并分析与其他病毒株以及20年前浙江分离的汉坦病毒Z10、Z37疫苗株的差异。方法提取汉坦病毒ZJ5株感染细胞总RNA，进行逆转录PCR扩增，产物纯化后克隆于T载体并测定序列。结果扩增出ZJ5病毒M和S全片段并测定了序列，经对核苷酸和氨基酸序列分析表明，与汉城型（SEO）病毒有最高的同源性，为SEOV，但与国内外已知的SEOV核苷酸差异高达11．7％～19．2％和6．7％～14．5％；用M和S片段核苷酸序列所构建的系统进化树显示，病毒株分在SEOV发生群，与SEOV的Gou3株亲缘关系最近，但独自构成一进化支。结论ZJ5株为一不同于现已报道的SEO型毒株的新亚型．
- 姚苹苹朱函坪徐芳谢荣辉梅玲玲陆群英朱智勇邓小昭张云
- 关键词：汉坦病毒系统发生树
- 小盾纤恙螨自然双重感染汉坦病毒和恙虫病东方体及叮刺传播的研究被引量：13
- 2010年
- 目的了解汉坦病毒（HV）和恙虫病东方体（OT）可否在小盾纤恙螨体内双重自然感染及通过叮刺传播的状况。方法在肾综合征出血热（HFRS）和恙虫病混合流行区，将采集的3459只鼠体恙螨和用小黑板诱集的3265只游离恙螨，按1、5、10只螨数分组，每组叮刺6只小白鼠。15d后取小白鼠肺和脾脏制成悬液，经脑内途径接种小白鼠传6代，每代均采用间接免疫荧光法（IFAT）和Giemsa法检测HV和OT病原体；取不同恙螨数的螨制成无菌悬液接种Vero—E6细胞传代，分离检测HV和OT病原体。采用PCR法检测HV．RNA和OT—DNA。结果经传代后HV和OT双重感染鼠的检测情况为，HV单纯阳性鼠体螨5、10只组在第6代各检测到1只，OT单纯阳性鼠体螨10只组在第6代检测到1只，HV、OT双重阳性鼠体螨1只组在第5、6代均检测到1只，HV、OT双重阳性鼠体螨5、10只组在第6代各检测到1只。1、5、10只游离螨组叮刺小白鼠后，在第6代各检测到1只。Vero—E6细胞在第4代时，HV、OT双重阳性的鼠体螨5、10只螨组，各有1份检测到HV和OT双重阳性的感染细胞。传至第6代时，HV、OT双重阳性的鼠体螨1只螨组和游离螨1、5、10只螨组均检测到HV和OT双重阳性的感染细胞。经PCR检测到HV—RNA、OT—DNA。结论小盾纤恙螨体内可自然双重感染HV和OT病原体，并可经叮刺传播。
- 于娟邓小昭杨占秋姚苹苹朱涵坪熊海蓉李春雷张云
- 关键词：汉坦病毒恙螨科组织培养技术
- 浙江省汉坦病毒基因分子进化分析被引量：6
- 2010年
- 为了分析浙江省汉坦病毒分子流行病学的特点,本文应用分子生物学软件对1981～2007年从浙江省不同地区不同宿主分离的12株汉坦病毒的S、M基因序列进行分子进化分析,结果显示:浙江省属汉滩(HTN)型和汉城(SEO)型的混合型疫区,病毒的基因差异和亲缘远近关系主要表现在地区性,而与病毒分离的年代与宿主关系并不大,表现出明显的地理聚集现象,该现象在HTNV中的表现尤为明显,同一地区分离的病毒表现为较高的基因同源性,系统进化树上分布于同一或临近分支。另外发现分离自浙江省建德地区的Gou3和ZJ5株在SEOV进化枝中构成一独立分支,而且与国内外SEOV其他毒株的基因差异均较大,在浙江省建德地区存在着SOEV的特殊亚型病毒。
- 姚苹苹朱函坪邓小昭徐芳谢荣辉姚晨辉翁景清张云杨占秋朱智勇
- 关键词：肾综合征出血热汉坦病毒分子进化分析
