浙江省自然科学基金(Y204510)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
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- 单纯疱疹病毒2型ICP4基因荧光实时定量PCR检测方法的建立被引量:3
- 2008年
- 目的建立实时荧光PCR定量检测单纯疱疹病毒2型(HSV2)ICP4基因的方法。方法依据HSV2ICP4基因序列设计引物,PCR纯化后克隆到pMD-18T载体上进行测序,抽提重组质粒作为标准品。根据测序结果设计荧光定量PCR的引物和探针,质粒标准品10倍稀释后进行扩增,建立标准曲线,并进行灵敏度和可靠性分析。结果测序结果显示在扩增的PCR片段中有在A-G无和T-C的无义突变。标准品101以下没有检测信号,101具有明确的检测信号,因而检测的灵敏度为10。可靠性测定结果:107~101进行10次重复Ct值的平均值分别为14.275±0.137、17.988±0.162、22.081±0.259、25.957±0.345、29.565±0.203、33.269±0.287、37.737±0.698,变异系数分别为0.965%、0.902%、1.174%、1.329%、0.686%、0.862%、1.851%。Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系。回归系数为0.998。结论成功建立了HSV2ICP4基因实时定量荧光PCR检测的方法,灵敏度高,重复性好,可用于HSV2ICP4基因的定量分析。
- 刘继峰关翠萍唐旭徐田红许爱娥
- 关键词:单纯疱疹病毒2型实时定量荧光PCR
- RNA干扰技术在某些性传播疾病中的研究进展被引量:1
- 2008年
- RNA干扰现象是生物界古老而且进化的高度保守的现象之一,是由双链RNA介导的序列特异性的mRNA降解过程。RNA干扰不仅可特异性地高效抑制基因表达,而且能够抑制侵入宿主的病原微生物基因表达,尤其在抑制病毒方面具有强大作用。艾滋病、生殖器疱疹和尖锐湿疣均由不同病毒感染所致,为此对近年来有关RNA干扰在这几种性传播疾病中的研究进展做一概述。
- 刘继峰许爱娥
- 关键词:艾滋病尖锐湿疣