“十五”国家科技攻关计划(2004BA501A16)
- 作品数：4 被引量：74H指数：4
- 相关作者：黄飚陶文沂金坚时瑾张莲芬更多>>
- 相关机构：江苏省原子医学研究所江南大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项无锡市社会发展科技计划项目国家科技型中小企业技术创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 黄曲霉毒素B_1的高灵敏时间分辨荧光免疫分析被引量：28
- 2006年
- 采用时间分辨荧光技术建立了高灵敏的黄曲霉毒素B1(AFB1)间接竞争免疫分析法(AFB1-TRFIA)。以AFB1-BSA为免疫原免疫新西兰大白兔制备抗AFB1抗体;AFB1与辣根过氧化酶的联结物(AFB1-HRP)包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1共同竞争有限的抗AFB1抗体;用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪。该方法的灵敏度为0.01μg/L,测量范围为0.01—100μg/L,批内和批间变异分别为4.1%和6.8%,平均回收率为97.2%,与黄曲霉毒素B2的平均交叉反应为10%左右;黄曲霉毒素G2、赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B及HRP基本不干扰本方法对AFB1的检测。8条不同时间进行的AFB1-TRFIA的效应点值ED80、ED50、ED20分别为(0.07±0.01)μg/L、(0.63±0.02)μg/L和(12.5±0.47)μg/L。比较AFB1-TRFIA和AFB1-ELISA检测AFB1,两者的相关系数为0.917。研究表明,AFB1-TRFIA是目前报导的AFB1检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景。
- 黄飚陶文沂张莲芬时瑾赵晓联金坚
- 关键词：真菌毒素
- 赭曲霉毒素A的高灵敏时间分辨荧光免疫分析被引量：36
- 2005年
- 采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立快速的高灵敏度的赭曲霉毒素A(OTA)全自动检测方法.将OTA-BSA作为免疫分子免疫Balb/c小鼠,OTA-KLH为筛选用抗原包被板,用间接酶联免疫分析(ELISA)法筛选出专一针对OTA的高效价的阳性克隆3G9,用杂交瘤细胞制备抗OTA单克隆抗体.用OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立OTA-TRFIA.该方法的灵敏度为0.03μg/L,测量范围为0.03￣1000μg/L,批内和批间变异分别为3.7%和5.3%,平均回收率为94.2%,与赭曲霉毒素B的平均交叉反应为3.7%,与黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白和苯基丙氨酸无交叉反应,说明抗体的特异性很好.8条不同时间进行的间接竞争OTA-TRFIA的效应点均值ED80、ED50、ED20分别为(0.33±0.02)μg/L、(1.44±0.08)μg/L和(5.22±0.12)μg/L,说明方法的稳定性好,样品经TRFIA和ELISA试剂盒同时检测OTA,两者的相关系数为0.925,结果相符.研究表明,OTA-TRFIA是目前报道的OTA检测中最灵敏的方法,该分析方法稳定性好,可测范围宽,具有很好的应用前景.
- 黄飚陶文沂张莲芬时瑾杨海麟金坚
- 关键词：真菌毒素单克隆抗体
- 赭曲霉毒素A时间分辨荧光免疫分析法的建立及其考核被引量：7
- 2008年
- 采用稀土离子标记技术,应用多克隆抗体建立高灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)时间分辨荧光免疫分析法(OTA-TRFIA)。以OTA-KLH为免疫原制备抗OTA抗体;OTA与BSA的联结物(OTA-BSA)为固相抗原,与游离OTA共同竞争有限的兔抗OTA抗体;用Eu3+标记的羊抗兔抗体。该方法的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02μg/L^400μg/L,批内和批间CV分别为2.6%和5.2%,平均回收率为95.8%,与赭曲霉毒素B对OTA的检测有5.6%交叉反应,而黄曲霉毒素B1及BSA则没有交叉反应。不同时间进行的OTA-TRFIA的ED80、ED50、ED20效应点值分别为0.2μg/L、1.0μg/L和5.3μg/L。研究表明,OTA-TRFIA是目前OTA检测中最灵敏的方法之一,该分析方法稳定性好、可测范围宽,具有很好的应用前景。
- 黄飚时瑾朱岚谢敏浩
- 关键词：赭曲霉毒素A时间分辨荧光免疫分析多克隆抗体
