“重大新药创制”科技重大专项(2009ZX090301-002)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：朱娟娟付汉江朱捷郑晓飞张胜权更多>>
- 相关机构：安徽医科大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 非编码基因MEG3稳定表达细胞株建立及其对p53转录活性的影响被引量：4
- 2011年
- 目的构建人类长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)的真核表达载体,筛选MEG3稳定高表达的肝癌细胞株,分析MEG3过表达对p53转录活性的影响。方法根据GenBank中MEG3的基因序列设计合成特异引物,从肝癌细胞中扩增MEG3的cDNA序列,将其构建入pcDNA3.0真核表达载体中,得到pcDNA3.0-MEG3表达载体,转染肝癌细胞SK-Hep-1,用G418筛选稳定株,采用RT-PCR技术检测转染细胞中MEG3基因表达,采用荧光素酶报告基因技术分析MEG3过表达细胞中对p53介导的基因转录活性的影响。结果成功构建了MEG3真核表达质粒pcDNA3.0-MEG3,筛选获得了稳定高表达MEG3基因的SK-Hep-1肝癌细胞株,双荧光报告实验结果显示MEG3过表达能增强p53介导的转录激活作用。结论本研究获得了稳定高表达MEG3基因的SK-Hep-1肝癌细胞株,为深入分析MEG3的功能及其作用机制奠定了基础。
- 朱娟娟付汉江朱捷张胜权郑晓飞
- 关键词：RNA基因表达肝肿瘤转染逆转录聚合酶链反应
