沈阳市科学技术计划项目(1032043-1-01-05)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
- 相关作者：宋今丹冯慧方瑾刘芙蓉曾艳更多>>
- 相关机构：中国医科大学沈阳医学院更多>>
- 发文基金：沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肿瘤相关抗原在人大肠癌中的表达被引量：6
- 2007年
- 目的应用ND-1单抗和抗CEA单抗对大肠癌细胞的标记情况对比,探讨LEA在大肠癌中的表达及意义。方法采用流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测大肠癌细胞系LEA和CEA的表达。并采用间接ELISA法测定LEA和CEA单抗对大肠癌细胞系的特异性。应用免疫组化检测其在大肠癌组织中的表达。结果流式细胞仪检测显示,LEA抗原在CCL-187、CX-1、CLone A和CCL-229细胞表达的阳性峰平均荧光强度呈递减趋势,并且强于CEA的表达量(P<0.01)。LEA在高分化大肠癌细胞系CCL-187和CX-1高度表达,并且低侵袭大肠癌细胞系CCL-187和CX-1LEA表达量高于高侵袭大肠癌细胞系CLoneA和CCL-229(P<0.01)。ELISA检测表明,与抗CEA单抗相比,ND-1单抗对大肠癌细胞具有很强的特异性结合力(P<0.01)。LEA的表达阳性率随大肠腺癌组织分化程度降低而下降(P<0.01),而且对高分化腺癌表现出更高的选择性。抗CEA单抗对高、中、低分化癌选择性相似(P>0.05)。结论LEA是更加特异的高分化大肠癌相关抗原。LEA可能与癌细胞的分化程度、侵袭力、恶性程度有关,LEA可作为早期诊断和判断大肠癌恶性程度的有用指标。
- 冯慧伊德林曾艳刘芙蓉方瑾宋今丹
- 关键词：肿瘤相关抗原大肠癌细胞
- 亲和层析法纯化抗大肠肿瘤相关抗原的单克隆抗体被引量：4
- 2006年
- 目的制备和纯化鼠源性抗人大肠肿瘤单克隆抗体(单抗),分析其相应抗原在大肠肿瘤细胞中的表达。方法常规方法免疫BALB/c小鼠制备腹水,应用G蛋白亲和层析柱对小鼠腹水样品进行分离纯化。采用SDS-PAGE、间接免疫荧光(IFA)、间接ELISA检测纯化后抗体的纯度、活性、效价和特异性。用免疫细胞化学、流式细胞术和免疫组织化学技术S-P法检测其相应抗原在大肠肿瘤细胞株和组织中的表达。结果还原性SDS-PAGE显示所获抗体为单一组分。应用间接ELISA检测抗体效价为1∶106,纯化后的抗体对大肠肿瘤细胞株具有特异结合活性,并在高分化大肠腺癌组织中表现出更高选择性(P<0.01)。结论G蛋白亲和层析法操作简便,所得单抗的纯度高,特异性强,生物学活性好。对临床上早期诊断大肠肿瘤将具有较大的意义。
- 冯慧伊德林曾艳刘芙蓉方瑾宋今丹
- 关键词：肿瘤相关抗原
- 抗人大肠癌单克隆抗体的制备及应用
- 2006年
- 目的制备和纯化抗人大肠癌单克隆抗体(ND-1),分析其在大肠癌诊断中的应用价值。方法常规免疫小鼠制备腹水,腹水经离心和过滤后,应用G蛋白亲和层析法进行纯化。采用SDS-PAGE、间接免疫荧光(IFA)、间接ELISA检测纯化后抗体的纯度、活性、效价和特异性。并用免疫组织化学SP法检测在大肠癌组织中的表达。结果经SDS-PAGE分离可见两条相对分子质量(Mr)分别为55 000和25 000明显的两条蛋白条带。间接ELISA检测抗体效价为1∶1 000 000,ND-1抗体对表达相应抗原的大肠癌细胞株具有特异结合活性。人大肠癌组织切片经ND-1抗体免疫组织化学染色阳性率为82.9%,其中高分化腺癌阳性率为100%。结论应用G蛋白亲和层析法可以很好分离纯化鼠腹水中的IgG1亚型的单克隆抗体,抗体的纯度高,特异性强,生物学活性好,可望成为有效的肿瘤诊断和治疗的手段。
- 冯慧宋今丹
- 关键词：人大肠癌单克隆抗体纯化大肠癌
