天津市卫生局科技基金(11KG114)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：梁芳芳司玉玲庞华孙雯雯窦金霞更多>>
- 相关机构：天津市第四中心医院天津医科大学中国医学科学院更多>>
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- 来源于干细胞的树突细胞激活免疫细胞对同源白血病干细胞的杀伤作用被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨白血病干细胞(LSC)来源的树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共同培养对自身LSC的杀伤作用。方法:提取慢性粒细胞白血病加速期(CML-AP)患者的骨髓单个核细胞(BMMC),再应用CD34+CD38-CD44+标记BMMC,流式分选仪分选出LSC并扩增、诱导出DC。取同源的单个核细胞诱导出CIK。用流式细胞技术检测DC和CIK细胞免疫表型、DC的P-糖蛋白(P-gp)耐药蛋白表达。荧光原位杂交(FISH)技术检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达,乳酸脱氢酶释放法测定效应细胞对靶细胞的杀伤效应。结果:CIK与DC共培养后,CD40、CD80、CD83及人类白细胞抗原(HLA-DR)的构成均高于共培养前;CD3、CD3CD8、CD3CD56的成熟表型表达率高于共培养前,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。干细胞来源DC的P-gp表达阳性率为(60.61±12.38)%。3种效靶比对应的杀伤率差异有统计学意义(P<0.01),随着效靶比的增加,细胞杀伤作用增强。结论:白血病干细胞来源DC功能正常,与CIK共培养对自身LSC有杀伤作用。
- 张丽莉李世俊司玉玲梁芳芳庞华王玫
- 关键词：白血病干细胞
- 干细胞来源DC与CIK共培养抗K562／A02干细胞的体外研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究慢性粒细胞白血病(CML)源干细胞体外诱导生成树突细胞(DC)与同来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,对白血病耐药株K562/A02干细胞(LSC)的杀伤作用。方法提取BCR/ABL阳性CML患者骨髓单个核细胞(BMMC),流式分选技术分离纯化CD34+CD38-干细胞,体外扩增诱导生成DC。取同来源的CML患者BMMC诱导出CIK。DC与CIK共培养,流式细胞术(FCM)检测其对K562/A02干细胞的凋亡及杀伤情况。光镜下观察细胞形态,FCM分析DC和CIK免疫表型、K562/A02及DC的P-糖蛋白(P-gp)表达情况,荧光原位杂交(FISH)检测BCR/ABL融合基因在LSC及DC中的表达。结果 LSC能成功诱导为成熟DC,且LSC来源DC的P-gp阳性表达率约为51.8%。DC免疫表型CD40、CD80、CD83、CD86以及HLA-DR的表达率均高于共培养前;共培养后CIK免疫表型CD3、CD8、CD56的表达率高于单独培养的CIK,差异均有统计学意义(P<0.01)。DC与CIK共培养后对CD34+CD38-干细胞的杀伤效应明显高于单独培养的CIK。CIK、DC-CIK均可诱导K562/A02细胞凋亡,凋亡率分别为(32.56±3.20)%、(40.21±3.09)%,且2组比较差异有统计学意义(P<0.01),但对CD34+CD38-干细胞无明显的诱导凋亡作用。结论来源LSC的DC功能正常,同时该来源DC联合CIK能杀伤K562/A02干细胞,但对其无明显凋亡作用。
- 梁芳芳庞华司玉玲孙雯雯窦金霞
- 关键词：干细胞P糖蛋白
- LSC-DC-CIK对慢性粒细胞白血病干细胞杀伤作用的体外试验研究被引量：3
- 2013年
- 目的研究慢性粒细胞白血病(CML)患者来源的干细胞体外扩增诱导生成树突细胞(DC),与同来源的细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,对慢性粒细胞白血病细胞株K562干细胞的杀伤作用。方法提取CML患者的骨髓单个核细胞(BMMC),利用流式细胞术(FCM)分选纯化白血病干细胞(LSC)CD34+CD38-CD44+,体外扩增诱导生成LSC-DC。取同一患者骨髓的BMMC诱导出CIK。LSC-DC与CIK共培养,用光学显微镜观察细胞形态,FCM分析LSC-DC和CIK细胞免疫表型,荧光原位杂交(FISH)检测BCR/ABL融合基因在LSC及LSC-DC中的表达,FCM检测LSC-DC-CIK对慢性粒细胞白血病细胞株K562干细胞的杀伤及凋亡情况。结果白血病干细胞能成功诱导为LSC-DC,其DC成熟免疫表型CD40、CD80、CD83、CD86及受体(HLA-DR)的表达均高于诱导前;共培养后CIK表面标志CD3、CD8、CD56的表达率高于单独培养CIK,差异有统计学意义(P<0.01)。LSC-DC与CIK共培养后对慢性粒细胞白血病细胞株K562干细胞的杀伤率(66.94%)明显高于单独培养的CIK(31.89%),差异有统计学意义(P<0.01)。LSC-DC-CIK可诱导K562细胞凋亡,凋亡率为52.28%±3.71%,与CIK组(37.51%±1.89%)相比,差异有统计学意义(P<0.01);但对其中白血病干细胞无明显的诱导凋亡作用。结论 CML来源LSC-DC保留有干细胞特征,其与CIK共培养能杀伤慢性粒细胞白血病细胞株干细胞,但无明显的诱导干细胞凋亡作用。
- 庞华孙雯雯梁芳芳司玉玲窦金霞
- 关键词：白血病干细胞树突状细胞
