江苏省自然科学基金(BK2012170)
- 作品数：8 被引量：31H指数：4
- 相关作者：闵玮骆丹钱齐宏林秉奖余秀琴更多>>
- 相关机构：苏州大学江苏省人民医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金苏州市“科教兴卫”专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄芪甲苷对HaCaT细胞的光保护效能及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的 观察黄芪甲苷对于中波紫外线（UVB）损伤的人表皮细胞的保护作用,探讨其相关机制.方法 将培养的永生化人皮肤角质形成细胞（HaCaT细胞）分为对照组、UVB组、黄芪甲苷组和UVB＋黄芪甲苷组,其中UVB组和UVB＋黄芪甲苷组细胞接受50 mJ/cm2 UVB照射,加药组加入不同浓度的黄芪甲苷（10、20、50、100、200 mg/L）进行干预,24 h后CCK8法检测细胞活性.根据CCK8法检测结果选择最佳药物浓度（20 mg/L）进行后继实验.照光后继续培养24 h,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,Western印迹法检测HaCaT细胞中p53、p38、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和高迁移率族蛋白A1（HMGA-1）的表达.结果 与对照组相比,10 mg/L和20 mg/L黄芪甲苷组对HaCaT细胞的增殖活性无明显影响（F=1.32,P＞0.05）,50、100和200 mg/L黄芪甲苷对细胞增殖活性有一定抑制作用（F=20.20,P＜ 0.05）;UVB组与对照组比较,HaCaT细胞增殖活性显著下降（F=99.00,P＜ 0.01）.与UVB组相比,UVB＋黄芪甲苷（10～ 200 mg/L）组HaCaT细胞增殖活性不同程度升高（F=19.08,P＜ 0.01）,其中UVB＋ 20 mg/L黄芪甲苷组升高程度最高.进一步实验表明,与UVB组相比,UVB＋ 20 mg/L黄芪甲苷组ROS产生受到明显抑制（f=21.12,P＜ 0.01）.Western印迹结果表明,与对照组比较,UVB组p53、p38、MMP-9和HMGA-1蛋白的表达升高（均P＜ 0.01）,而UVB＋ 20 m/L黄芪甲苷组细胞内p53、p38、MMP-9和HMGA-1蛋白的表达水平较UVB组显著降低（P＜0.01）.结论 黄芪甲苷可有效抑制UVB引起的表皮细胞光损伤.
- 杨子良骆丹钱齐宏杜纳余秀琴王淼淼闵玮
- 关键词：紫外线角蛋白细胞活性氧
- siRNA沉默NPM对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖能力的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察siRNA沉默NPM基因的表达对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法培养A431细胞,针对NPM mRNA序列设计合成特异性siRNA,转染A431细胞;采用实时定量PCR(Real-timePCR)法检测NPM基因的表达情况,CCK8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期变化。结果实时定量PCR法的结果显示:细胞NPM基因的表达受到明显抑制,并筛选出沉默效率最高的特异性siRNA片段进行后继实验;CCK8法检测结果显示NPM基因沉默后,细胞增殖活性显著降低(P<0.05);流式细胞术检测结果显示细胞发生S期阻滞,G2/M期细胞减少。结论沉默NPM基因的表达可明显抑制A431细胞的增殖活性,并导致细胞周期阻滞。提示NPM基因可能成为皮肤肿瘤防治的调控靶点。
- 余秀琴骆丹林秉奖钱齐宏闵玮
- 关键词：NPM皮肤鳞状细胞癌SIRNA
- 黄芩苷和核磷蛋白基因沉默对人皮肤鳞癌细胞增殖的影响被引量：4
- 2013年
- 目的观察黄芩苷及小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默核磷蛋白(nucleophosmin,NPM)基因对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法针对NPM信使RNA(messenger RNA,mRNA)序列设计合成特异性siRNA,转染A431细胞,并加入50 mg/L黄芩苷孵育;采用细胞增殖/毒性检测试剂盒(cell countingkit-8,CCK-8)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果黄芩苷孵育可使细胞增殖活性降低(P<0.05),发生S期阻滞;NPM基因沉默可明显增强黄芩苷的作用。结论黄芩苷可抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖生长,其机制可能与调控NPM基因表达有关。
- 余秀琴骆丹林秉奖钱齐宏王勤闵玮
- 关键词：黄芩苷核磷蛋白皮肤鳞癌
- 黄芩苷对皮肤鳞癌细胞生长和迁移能力的影响被引量：7
- 2014年
- 目的探讨黄芩苷对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及迁移能力的影响及其机制。方法 50 mg·L-1黄芩苷孵育A431细胞,Western blot检测细胞中cofilin-1蛋白的表达水平;设计合成cofilin-1特异性siRNA并转染A431细胞,使用CCK8法检测细胞增殖活性,细胞划痕试验检测细胞的迁移能力。结果 Western blot结果显示,与对照组相比,细胞cofilin-1蛋白表达下降了49.3%;单独黄芩苷处理和cofilin-1-siRNA沉默均可抑制A431细胞生长与迁移,合并cofilin-1-siRNA则明显增强黄芩苷的作用效能。结论黄芩苷可有效降低肿瘤细胞的增殖活性和迁移能力,cofilin-1基因可能成为增强药物作用的调控靶点之一。
- 杨子良骆丹林秉奖钱齐宏余秀琴王淼淼闵玮
- 关键词：黄芩苷SIRNA细胞迁移
- 神经性皮炎患者皮损中CD276的表达及其临床意义被引量：4
- 2019年
- 目的:本研究旨在观察共刺激分子CD276(B7-H3)在神经性皮炎组织中的表达情况,并探讨其临床意义。方法:应用免疫组化技术检测正常人皮肤组织和神经性皮炎患者皮损组织中CD276分子的表达水平,并分析CD276分子表达水平与神经性皮炎病程、炎症浸润及复发间的关系。结果:与正常皮肤组织相比,CD276在神经性皮炎组织中的表达水平显著升高(P<0.05),且CD276的表达水平与局部炎性细胞浸润程度呈正比,但与神经性皮炎的病程及复发率无相关性。结论:CD276可能在神经性皮炎发病过程中起着重要作用,并为临床免疫治疗提供了潜在的靶点。
- 王玫玲裴东宋琳毅王蓉朱月倩钱齐宏闵玮冯雪梅
- 关键词：神经性皮炎
- 绿茶多酚对人皮肤成纤维细胞UVA氧化损伤的保护作用及机制研究被引量：5
- 2014年
- 目的观察茶多酚(EGCG)对长波紫外线(UVA)引起的人皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用,并探讨其相关机制。方法以强度为10 J/cm2的UVA照射原代培养的人皮肤成纤维细胞,并在照光前后加入浓度为50 mg/L的EGCG干预处理,照光后24 h收集细胞,以比色法检测细胞上清液中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)含量变化;实时定量PCR(Real-time PCR)法检测p66ShcmRNA表达水平变化。结果 UVA照射后可引起细胞中SOD和GSH-Px水平下降,MDA活性增加,并增强细胞p66ShcmRNA表达;加入EGCG干预可明显恢复SOD和GSH-Px活性,降低MDA水平,并抑制p66Shc表达(P<0.05)。结论 EGCG可有效保护人皮肤细胞免于UVA氧化损伤,其机制可能与调控p66Shc基因表达有关。
- 杨子良骆丹林秉奖宋琳毅王淼淼闵玮
- 关键词：成纤维细胞
- 丝切蛋白-1的表达对人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和迁移能力的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨丝切蛋白-1的表达对人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖及迁移能力的影响。方法丝切蛋白-1特异性小干扰RNA(siRNA)转染人皮肤鳞状细胞癌A431细胞;实时定量PCR和Western blot检测丝切蛋白-1表达,CCK-8法检测细胞增殖活性,细胞划痕试验检测细胞的迁移能力。结果靶向抑制丝切蛋白-1后,A431细胞丝切蛋白-1表达水平下降,同时细胞增殖活性降低(P<0.05),划痕试验结果显示细胞迁移愈合能力下降。结论抑制丝切蛋白-1表达可降低皮肤鳞状细胞癌细胞的活性与迁移能力,可作为皮肤肿瘤防治的靶点。
- 杜纳骆丹钱齐宏林秉奖王淼淼余秀琴闵玮
- 关键词：皮肤鳞状细胞癌细胞迁移
- 黄芪甲苷对长波紫外线影响人成纤维细胞的干预研究被引量：8
- 2013年
- 目的探讨黄芪甲苷对于长波紫外线(UVA)辐射导致人皮肤成纤维细胞老化的保护作用的机制。方法体外培养人皮肤成纤维细胞,以10 J/cm2UVA进行照射,并加入20 mg/L黄芪甲苷干预处理。在照射后24、72 h,流式细胞仪测定细胞周期分布变化;在照射后24 h,实时定量聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测细胞衰老相关基因p53 mRNA、p16 mRNA和c-myc mRNA表达水平。结果与对照组相比,UVA照射作用下成纤维细胞出现了显著G1期阻滞(P<0.01),照射后24 h,G1期细胞比率由对照组的59.31%升高至81.36%,至照射后72 h,G1期细胞比率进一步升高至89.09%。黄芪甲苷可明显减轻UVA引起的细胞周期阻滞(P<0.01),G1期细胞比率下降为69.14%。RT-PCR检测显示UVA诱导p53 mRNA和p16 mRNA表达水平升高,而c-myc mRNA表达下降(P<0.01);黄芪甲苷干预处理可抑制UVA引起的p53 mRNA和p16 mRNA表达(P<0.01);黄芪甲苷干预可下调c-myc mRNA表达,UVA照射合并黄芪甲苷干预可进一步降低c-myc mRNA表达水平(P<0.01)。结论 UVA可诱导皮肤成纤维细胞出现G1期阻滞而启动老化进程,加入黄芪甲苷可有效减轻细胞周期阻滞延缓光老化进程,其具体机制可能与调控p53、p16、c-myc等老化相关基因表达有关。
- 刘铭骆丹林秉奖钱齐宏闵玮
- 关键词：长波紫外线黄芪甲苷成纤维细胞
