天津市科技攻关项目(05YFGPNC01900)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：王立红邢克智刘鼎阔张勇徐大为更多>>
- 相关机构：天津农学院天津市禽病诊断培训中心鼎正动物药业(天津)有限公司更多>>
- 发文基金：天津市科技攻关项目天津市科技创新能力与环境建设平台项目天津市科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 干扰素γ在鸡体内的消长规律被引量：2
- 2007年
- 以不同剂量的重组cIFNγ对SPF鸡进行免疫注射,用ELISA法检测cIFNγ在体内的消长。研究结果表明:注射给药后2 h即可在多个器官中检测到cIFNγ;8～24 h,cIFNγ在体内的分布达到高峰;2～4 d后,cIFNγ在体内的分布显著下降;cIFNγ的注射剂量与血药浓度并不呈线性相关,但高剂量的cIFNγ具有显著诱导体内自身cIFNγ表达的能力,尤其是诱导脾脏和淋巴器官中cIFNγ的表达;在高剂量cIFNγ的作用下,鸡体内cIFNγ可维持30 d以上。在接种新城疫疫苗后的2～8 d,也可在鸡的各个组织和器官中检测到cIFNγ低剂量的表达。
- 王立红王鸿英张立新邢克智张军李睿义
- 鸡IFN-γ基因在大肠杆菌中的表达及表达产物对鸡的免疫保护被引量：6
- 2008年
- 将鸡干扰素-γ(ChIFN-γ)成熟肽基因编码区序列亚克隆到原核表达载体pQE30上,并转化大肠杆菌M15感受态细胞。经诱导后,以镍金属亲和层析法对表达蛋白进行纯化,采用SDS-PAGE与Western-blot对表达蛋白进行鉴定。结果显示,经诱导的转化子在体外获得了高效表达,表达蛋白约占菌体蛋白的23%。0.5ng/mL以上的重组ChIFN-γ(rChIFN-γ)能显著抑制鸡新城疫病毒对细胞的侵染与伤害;但是,细胞先感染病毒后,再以不同剂量rChIFN-γ作用于细胞,则不具有对细胞的保护作用,说明rChIFN-γ对细胞的保护是通过调节机体免疫能力、干扰病毒入侵实现的。1ng/mL的rChIFN-γ可显著提高新城疫疫苗的免疫效价,具有较强的免疫协同作用。表明,原核表达的rChIFN-γ具有显著的生物学活性。
- 王立红高春萍邢克智王红英郭永军
- 关键词：体外表达生物学活性
- 饲料中大豆凝集素的分离纯化与生物活性测定
- 2012年
- 采用不同纯化方法制备大豆凝集素,其产率略有不同,其中采用N-乙酰基-D-半乳糖胺-Epoxy-Sepharose6B法制备产率最高,且N-乙酰基-D-半乳糖胺对大豆凝集素的亲和力较高,所制备的大豆凝集素活性测定与标准品一致,试验结果表明,该法是目前制备大豆凝集素的最优方法。
- 王立红周玉凤张勇张俊霞董惠峰刘鼎阔
- 关键词：大豆凝集素生物活性饲料
- 鸡IFN-γ基因重组蛋白复性条件的优化及生物活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 为提高鸡IFN-γ基因重组蛋白的复性效率,用18种不同的复性缓冲液对在大肠埃希菌中表达的cIFN-γ进行复性处理,通过SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝定量、对鸡胚成纤维细胞以及对鸡胚的保护试验检测复性产物的得率和生物学活性。结果表明,去污剂和疏水剂能保证蛋白的复性得率和复性效率,重组表达产物得率可高达94.7%;氧化还原电势是cIFN-γ成功复性的关键,有生物学活性的复性产物的复性液中均存在氧化还原对GSSG/GSH;经去污剂处理后再复性的产物对细胞保护的有效浓度显著低于直接复性的蛋白。
- 刘鼎阔王立红徐大为杨爱华王建春秦操张勇
- 关键词：生物学活性
- 鸡干扰素γ(c-IFNγ)重组蛋白的稳定性研究
- 2011年
- 以保护鸡胚成纤维细胞(CEF)抵御新城疫病毒(NDV)侵袭的能力为主要检测指标,考察鸡干扰素γ(c-IFNγ)的热稳定性、酸碱稳定性及冻融耐受性。在37℃及以上的热处理中,c-IFNγ样品迅速失活,其中60℃处理1 h活性即降低约70﹪;酸性环境中的样品极不稳定,在pH=2的液体制剂中1 h,蛋白质全部失活,但在碱性制剂中,96 h内其生物活性未发生明显变化;c-IFNγ液体制剂对冻融极为敏感,其生物学活性随冻融次数的增加呈线性下降。鸡干扰素γ重组蛋白对热及酸性环境不稳定,且不易冻存冻融。
- 王立红刘鼎阔徐大为郭立力王建春杨爱华张勇
- 关键词：热稳定性生物活性
