国家科技攻关计划(2004BA717B-01-03)
- 作品数：17 被引量：35H指数：4
- 相关作者：王爱德兰干球郭亚芬钱宁吴曙光更多>>
- 相关机构：广西大学贵阳中医学院遵义医药高等专科学校更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 广西巴马小型猪不同年龄生殖激素水平的分析被引量：3
- 2007年
- 目的探讨广西巴马小型猪不同年龄生殖激素水平。方法利用ELISA酶免疫试剂盒和多功能标记免疫测定系统,对不同年龄的雌雄巴马小型猪血清生殖激素浓度进行测定。结果雄性巴马小型猪血清TESTO、FSH浓度从2月龄到6月龄呈上升趋势,在6月龄时达到最大值(分别为12.2 ng±8.9 ng/mL和64.6 ng±6.1 ng/mL),6月龄后浓度呈下降趋势;血清LH浓度从2月龄到4月龄呈上升趋势,在4月龄时达到最大值(46.8 ng±12.5 ng/mL),4月龄后呈下降趋势。雌性巴马小型猪从2月龄到4月龄,血清FSH、LH、E2浓度都呈现出显著升高趋势,到4月龄时达到最大值(分别为51.9 ng±54.0 ng/mL,23.2 ng±31.6 ng/mL,79.3 pg±93.0 pg/mL),4月龄后又都呈现较明显下降趋势。
- 卢晟盛罗龙兴郭亚芬兰干球王爱德
- 关键词：广西巴马小型猪生殖激素
- 广西巴马小型猪生长期日粮蛋白与能量水平需要的测定被引量：2
- 2007年
- 目的本试验对生长期（45～117日龄）的广西巴马小型猪进行了生长饲养实验。方法试验一：选择40头40日龄断奶广西巴马小型猪，按平均体重随机分为四组（10头／组）。在45～80日龄，四个组分别喂以含蛋白质水平为13％、14％、16％、18％的日粮；在81～117日龄，仍以上面的40头广西巴马小型猪为实验材料，分别喂以含蛋白质水平为11％、12％、13％、14％的日粮。试验二：选择40头40日龄断奶广西巴马小型猪，按平均体重随机分为四组（10头／组）。分别喂以日粮1（CPl5％、DEl2．95MJ／kg），日粮2（CPl5％、DEl3．37MJ／kg），日粮3（CPl3％、DEl2．95MJ／kg）和日粮4（CPl3％、DEl3．37MJ／kg）。结果在45～80日龄，上述不同蛋白质含量的日粮对广西巴马小型猪的总增重影响差异不显著（P〉0．05）；在81～117日龄，蛋白水平为12％、13％、14％的日粮对小型猪的总增重影响差异不显著（P〉0．05），但蛋白质水平为11％的日粮组总增重显著低于前面三组（P〈0．05）。试验二的结果表明，4种不同能量与蛋白组合的日粮对生长期（45～75日龄）小型猪的总增重影响差异不显著（P〉0．05）。结论本实验结果表明广西巴马小型猪生长期（45～117日龄）日粮营养需要水平为粗蛋白12％～13％，消化能12．95MJ／kg。日喂料量为体重的2．O％～2．25％即可维持广西巴马小型猪的生长期（45～117日龄）较缓慢的生长速度。
- 兰干球郭亚芬王爱德
- 关键词：广西巴马小型猪粗蛋白质消化能
- 护肾Ⅰ号对顺铂致贵州小型猪肾损伤的预防作用及机制探讨被引量：3
- 2008年
- 将12只贵州小型猪随机分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,各4只。3组均行膀胱造瘘后,Ⅲ组给予护肾Ⅰ号灌服5d,其余两组给予等量生理盐水。然后Ⅱ和Ⅲ组给以4mg/kg顺铂一次性腹腔注射建立贵州小型猪肾损伤模型,Ⅰ组注射等量生理盐水。测定注射顺铂前1h,注射后24、48、96h时三组血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及尿β2-微球蛋白(β2-MG)。结果:与Ⅰ组比较,Ⅱ组血清BUN、Cr、MDA含量明显升高,血清SOD活力降低,尿β2-MG浓度升高(P均(0.05)。Ⅲ组的各项指标较Ⅱ组明显改善。认为护肾Ⅰ号可预防顺铂所致的肾损伤,其机制可能与抑制顺铂致血液脂质过氧化反应增强有关。
- 钱宁董小君郭科男吴曙光李术钗
- 关键词：顺铂贵州小型猪肾损伤
- 广西巴马小型猪活化素β_A/β_B基因cDNA克隆与序列分析被引量：2
- 2007年
- 目的通过克隆广西巴马小型猪活化素(activin)βA/βB基因cDNA,分析其序列,为研究活化素的生物学功能打下基础。方法提取广西巴马小型猪发情母猪的卵巢总RNA,并以其为模板,以下游特异性引物为反转录引物,在AMV酶作用下合成cDNA;用LA-Taq进行PCR扩增出包括成熟肽在内的activinβA及βB基因的部分序列,把两个序列分别连接到PMD-18载体进行克隆和序列分析。结果包括成熟肽在内的activinβA及βB基因的部分序列长度分别为964 bp和791 bp,两个亚基的序列比较保守,与GenBank上发表的猪activin两个亚基同源性达到99.79%和99.62%。activinβA基因有两个碱基发生突变,其中一个在成熟肽序列上,一个在非编码序列上;βB基因信号肽序列上有三个碱基发生突变,其中一个是同义突变。
- 兰干球黄雄军郭亚芬李芳芳王爱德蒋和生
- 关键词：巴马小型猪
- 广西巴马小型猪促生长激素释放激素成熟肽的克隆及序列分析被引量：4
- 2007年
- 目的扩增广西巴马小型猪促生长激素释放激素(GHRH),分析其序列结构特点。方法以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,用特异性引物扩增GHRH外显子3,再用引物延伸悬挂PCR法扩增GHRH成熟肽,纯化后,连接、转化到大肠杆菌,筛选阳性克隆,测序。结果经测序证实广西巴马小型猪GHRH外显子3及其成熟肽的基因序列与相关文献报道一致。克隆得到的广西巴马小型猪GHRH序列全长为132 bp,其中外显子3基因序列长105bp。同源性比较发现,广西巴马小型猪GHRH外显子3基因序列与GenBank(NCBI)中报到的猪GHRH外显子3相比,同源性为97.14%,有3处发生碱基变化。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列。
- 郭亚芬李芳芳兰干球黄雄军王爱德秦小娥
- 关键词：广西巴马小型猪克隆
- 广西巴马小型猪生长素(Ghrelin)cDNA的克隆及序列分析被引量：3
- 2007年
- 目的扩增广西巴马小型猪生长素(Ghrelin)cDNA序列,分析其序列结构特点,为进一步从分子水平上对广西巴马小型猪的生长发育提供理论依据,也为日后构建原核表达载体、研究Ghrelin基因的生物功能奠定基础。方法以广西巴马小型猪胃底组织总RNA为模板,用特异性引物扩增Ghrelin的cDNA,纯化连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆体,鉴定后测序。结果经测序证实克隆得到的广西巴马小型猪Ghrelin cDNA序列全长为357 bp,与相关文献报道一致。同源性比较发现,广西巴马小型猪Ghrelin cDNA基因序列与GenBank报道的猪相应序列同源性为99.7%,只有一处发生碱基突变。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪Ghrelin cDNA。
- 郭亚芬罗琴王世凯兰干球王爱德
- 关键词：生长素广西巴马小型猪克隆
- 广西巴马小型猪肌肉生长抑制素(Myostatin)cDNA克隆和序列分析被引量：5
- 2007年
- 目的通过RT-PCR扩增广西巴马小型猪Myostatin cDNA序列,经过连接、转化、克隆测序后,与NCBI中发表的猪Myostatin序列进行同源性比较,分析广西巴马小型猪Myostatin的cDNA序列结构特点及与其他物种间的聚类关系,为日后构建Myostatin高效表达载体及进一步研究Myostatin对广西巴马小型猪肌肉生长的影响奠定基础。方法以广西巴马小型猪的肌肉组织总RNA为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),利用合成的特异性引物,扩增得到巴马小型猪肌肉生长抑制素(Myostatin)cDNA的全序列。该扩增片段经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增,经一系列鉴定后,测序。结果本实验克隆到巴马小型猪Myostatin基因cDNA序列长度为1128 bp,与GenBank报道的猪Myostatin基因cDNA序列同源性高达99.7%,与人、奶牛、家鼠等物种的cDNA序列间同源性可达到92.3%以上,证明Myostatin基因具有较高的保守性。同时发现广西巴马小型Myostatin基因cDNA序列有三处存在碱基突变,两个为同义突变,一个为错义突变。
- 王世凯兰干球罗琴郭亚芬王爱德
- 关键词：广西巴马小型猪MYOSTATIN基因克隆
- 广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列克隆及序列分析被引量：3
- 2007年
- 目的克隆广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列,并与已发表的其它品种猪的生长激素(pGH)基因全序列进行比较,探讨该基因在广西巴马小型猪中可能存在的变异。方法以广西大学巴马小型猪基因组DNA为模板,扩增巴马小型猪生长激素基因的全序列,将该扩增片段亚克隆到pMD18-T载体后测序。再将测序结果在NCBI进行BLAST。结果测序结果证明克隆得到了巴马小型猪GH基因,全长为2 007 bp。同源性比较发现,巴马小型猪GH基因全序列与GenBank中发表的五指山猪、太湖猪及普通猪的GH基因全序列的同源性分别为99.4%、98.3%、93.9%。
- 杨秀荣兰干球郭亚芬王爱德
- 关键词：生长激素基因广西巴马小型猪克隆
- 广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)克隆及原核表达被引量：1
- 2007年
- 目的通过RT-PCR扩增获得广西巴马小型猪Follistatin的cDNA全序列,经克隆测序分析其cDNA序列结构,进而构建pET-Fo原核表达质粒,使用IPTG诱导表达获得其融合蛋白,为将来进一步研究Follistatin对广西巴马小型猪肌肉生长和繁殖性能的影响奠定基础。方法从广西大学巴马小型猪卵巢中提取总RNA,并以其为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),在合成的特异性引物引导下,扩增获得广西巴马小型猪卵泡抑素(Follistatin)cDNA的全序列,长度为1 035 bp。将PCR产物克隆到pMD18-T载体后进行序列测定及分析。结果广西巴马小型猪卵泡抑素cDNA序列与GenBank中已报道的家猪卵泡抑素同源性高达99.4%。同时,将目的基因插入到原核表达载体pET 32a+多克隆位点中,构建了Follistatin的原核表达载体,并转化于大肠杆菌BL21。转化菌经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质免疫印迹(Western blotting)分析。结论实验已成功地表达了Follistatin的融合蛋白(约58.4 ku)。
- 郭亚芬兰干球莫毅梁方方杨秀荣蒋钦杨蒋和生王爱德
- 关键词：广西巴马小型猪卵泡抑素克隆原核表达
- 广西巴马小型猪雄性初情期和精液性状的分析被引量：2
- 2007年
- 目的探讨广西巴马小型猪雄性初情期和精液品质性状。方法将15、20、25、26、27、28、29、30、45、55、62、75日龄巴马小型猪睾丸制作成切片,检查其曲细精管中是否已经产生精子;采集巴马小型猪精液,检测其物理性状和化学成分。结果初步判断雄性巴马小型猪的初情期为45日龄左右。巴马小型猪精液的主要物理性状:射精量107.5 mL±39.0 mL、酸碱度7.6±0.3、精子密度0.732亿/mL、精子活率0.754±0.079、精子活力0.376±0.168、精子畸形率0.256±0.159。主要化学成分:Na+1.56 mg±0.13 mg/mL、K+0.78 mg±0.06 mg/mL、Cl-1.62 mg±0.18 mg/mL、磷脂8.7 mg±0.2 mg/100 mL、果糖117.4 mg±81.0 mg/100 mL、柠檬酸45.6 mg±77.6 mg/100 mL。
- 卢晟盛罗龙兴兰宗宝黎宗强郭亚芬兰干球王爱德
- 关键词：巴马小型猪初情期精液
