国家自然科学基金(81270211)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：佘强杜建霖邓松柏刘亚杰颜玉玲更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院云南省第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- Tbx18^+心外膜祖细胞参与成年小鼠部分心脏组织形成被引量：1
- 2016年
- 转录因子Tbx18在胚胎心脏发育过程中起重要调控作用,是心外膜祖细胞标记之一;故以Tbx18为标记的阳性祖细胞群被称为:Tbx18+心外膜祖细胞(epicardial progenitor cells,EPCs)。小鼠胚胎、新生和成年期心脏组织细胞的特性区别较大,成年小鼠的心脏属于终末分化组织。但是,Tbx18+EPCs对成年小鼠心脏组织的贡献大小尚存争议。本研究拟定量分析Tbx18+EPCs对成年小鼠心脏组织的贡献大小。采用整体和组织切片X-gal染色检测成年心脏组织Lac Z的表达;荧光激活细胞分选法(fluorescence activated cell sorting,FACS)分离成年Tbx18Cre/R26EYFP小鼠心脏组织EYFP+细胞。结果显示,在Tbx18+EPCs遗传谱系示踪小鼠,报告基因Lac Z和EYFP在成年小鼠心脏的心室、心房、冠状动脉、室间隔等处表达;成年Tbx18Cre/R26EYFP小鼠心脏组织细胞用FACS分离,分选的EYFP+细胞比例平均约为33.94%。由此可见,成年小鼠心脏的心室、心房、冠状动脉、室间隔等心脏组织均可来源于Tbx18+EPCs;约1/3成年小鼠心脏组织细胞来源于Tbx18+EPCs。故Tbx18+EPCs参与成年小鼠心脏组织的部分形成。
- 杜建霖邓松柏刘亚杰佘强
- 关键词：成年
- Tbx18通过下调EMT信号分子参与调控心脏发育
- 2016年
- 转录因子Tbx18(Tbx18)在小鼠胚胎心外膜上皮细胞表达并调控心外膜上皮细胞向心系细胞分化.上皮间充质转化(EMT)过程是器官发育和形成的重要机制.为阐述Tbx18通过调控下游EMT关键信号分子参与心外膜上皮细胞分化和心脏发育,本研究运用Tbx18-Cre/Rosa26R-EYFP双杂合基因敲入小鼠和免疫荧光共聚焦,证实Tbx18+心系细胞和EMT关键信号分子Snail1、Smad、Slug、Twist在发育后期胚鼠心外膜和心外膜下间充质发生共聚焦.同时还发现,Tbx18在胚鼠不同发育阶段的表达模式和Tbx18+心系细胞内上述EMT关键信号分子的表达模式相似.Tbx18和EMT关键信号分子在发育心脏存在相似的时空表达模式,因此,它们之间可能存在相互调控作用.运用Tbx18突变技术揭示了Tbx18突变型胚鼠心脏EMT关键信号分子表达水平均较野生型显著下调,直接证实了上述4个EMT信号分子是Tbx18的可能靶点.理解Tbx18参与心脏发育的下游靶点有助于改善成年心脏损伤后的再生修复.
- 张进佘强范洁魏飞宇
- 关键词：心脏发育
- Tbx18-Cre基因敲入小鼠Cre基因保真性研究
- 2013年
- 目的揭示Tbx18-Cre基因敲入小鼠cre基因表达的保真性。方法用实时荧光定量PCR（Real—timePCR）快速检测基因敲入小鼠外源基因Cre的相对拷贝数；JunctionPCR验证基因敲入小鼠整合位点Th。18-Cre的纯合性：利用Tbx18Cre。一纯合子小鼠模型验证Cre基因对下游基因的影响；利用Tbx18-Cre／Rosa26R．LacZ示踪模型，通过检测LacZ的表达，验证Cre基因的时空保真性。结果实时荧光定量PCR验证rkl8基因敲入小鼠外源基因Cre的相对拷贝数准确，JunctionPCR验证其整合位点特异。Thx18Cre-/-纯合子小鼠模型能特异性阻断转录因子Tbx18的表达，引起信号下游基因CX40、CX43、CX45的表达明砂升高。Tbx18-Cre／Rosa26R—LacZ示踪模型LacZ蛋白表达部位与Tbx18mRNA表达部位一致。结论7阢18一Cre基因敲入小鼠中Cre基因具有高度准确的时空保真性和特异性。
- 颜玉玲翁敏杰杜建霖佘强
- 关键词：整合位点
