国家重点基础研究发展计划(2004CB117204)
- 作品数：23 被引量：327H指数：11
- 相关作者：万建民江玲翟虎渠罗利军梅捍卫更多>>
- 相关机构：南京农业大学中国农业科学院作物科学研究所上海市农业生物基因中心更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1的原核表达、纯化及鉴定被引量：19
- 2008年
- 脂氧合酶是动植物体内催化脂质降解的关键酶,也是茉莉酸合成途径的第一个关键酶。以先前克隆到的水稻种子脂氧合酶基因OsLOX1全长cDNA为模板,用含有特异酶切位点的P1、P2为引物,通过PCR方法将它构建到大肠杆菌表达载体pET30a(+)上并转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。经过20℃条件下的IPTG诱导,OsLOX1重组蛋白在BL21(DE3)菌株中得到表达,经生化特性分析,发现该重组蛋白具有LOX催化活性,其最适pH和温度分别为4.8和30℃。该重组子可进一步应用于体外生产茉莉酸和研究植物种子LOX结构与功能的关系。
- 汪仁沈文飚江玲刘玲珑翟虎渠万建民
- 关键词：水稻种子脂氧合酶原核表达纯化
- 水旱条件下近红外发射光谱预报水稻直链淀粉含量与粗蛋白含量的QTL分析被引量：1
- 2007年
- 以水稻珍汕97B和旱稻IRAT109杂交F9代重组自交系群体为材料,分别在水旱两种处理条件下,用近红外光谱回归模型预测群体的直链淀粉含量及粗蛋白含量。分析结果表明,两种处理条件下直链淀粉含量无显著差异,水分胁迫处理条件下粗蛋白含量显著降低。利用QTL Mapper共检测到22个主效QTL和66对显著互作位点与直链淀粉含量和粗蛋白含量有关。主效QTL对直链淀粉和蛋白质含量的联合贡献率在非胁迫条件下为35.34%和37.33%,在胁迫条件下分别为53.40%和58.10%;互作位点对直链淀粉和蛋白质含量的联合贡献率在正常水分条件下分别为66.74%和57.49%,在胁迫条件下分别为48.65%和36.59%。
- 李荧梅捍卫吴金红张洪江冯芳君徐小艳罗利军
- 关键词：水稻直链淀粉含量粗蛋白含量数量性状座位
- 水稻脂氧合酶-3基因启动子的特性分析被引量：4
- 2008年
- 从栽培水稻品种越光中克隆了水稻脂氧合酶-3基因(Lox-3)的启动子,长度为1343bp,其序列与日本晴对应的序列完全相同。生物信息学分析表明,该启动子序列中包含受信号诱导的元件(G-box)、温度响应元件(CCGAAA)和水分胁迫响应元件(CACATG)等顺式作用元件;进一步构建了Lox-3基因启动子与gus和gfp基因的融合表达载体并获得转基因植株,发现报告基因在转基因植株的根、茎、叶、花药、种胚及种皮中均有表达,在萌发种子的胚和胚芽中也有表达,但在胚乳中不表达。此外,经ABA、NaCl及人工陈化处理后对报告基因的表达进行了定量分析,发现这些非生物胁迫可能通过诱导启动子顺式元件致使报告基因表达活性增强。
- 刘南南张文伟江玲沈文飚翟虎渠万建民
- 关键词：启动子水稻转基因植株逆境胁迫
- 水稻谷蛋白的一个新基因克隆及表达分析被引量：11
- 2007年
- 与其他禾本科作物以醇溶蛋白为主不同,水稻种子含有醇溶蛋白和谷蛋白两种主要蛋白质贮藏形式。其中,谷蛋白约占胚乳蛋白总量的70%-80%。水稻谷蛋白是由多基因家族编码合成的,到目前为止至少已克隆获得了9个全长cDNA,根据这些cDNA编码的氨基酸序列同源性可将谷蛋白分为A、B两个亚家族。B亚族谷蛋白成员富含赖氨酸等人体必需氨基酸,与稻米的营养品质直接相关,因此挖掘、利用B亚族基因成员对于改良稻米蛋白品质性状至关重要。本文报道了以32P标记的谷蛋白基因GluB-2cDNA片段为探针筛选水稻胚乳cDNA文库获得1个新的水稻谷蛋白基因全长cDNA。序列分析显示该基因核苷酸序列共1588 bp,含有1个由495个氨基酸残基组成的开放阅读框,编码蛋白分子量约为56 kD。推导的氨基酸序列与其他已知谷蛋白基因家族成员间序列相似性介于57.8%-97.8%之间,并与B亚族谷蛋白基因的同源性更高,因此命名为GluB-7(GenBank注册号AY987390)。Northern杂交显示,GluB-7具有高度的胚乳表达特性。
- 牛洪斌覃怀德王益华翟虎渠万建民
- 关键词：水稻谷蛋白基因克隆
- 水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫中的作用被引量：9
- 2008年
- LOX3是主要的水稻种胚脂氧合酶同工酶。为了研究水稻LOX3基因在逆境胁迫中的作用,构建了LOX3基因的反义植物表达载体,用农杆菌介导法转化水稻品种武运粳7号和Kasalath,获得了转基因植株。PCR和Southern鉴定证实基因已经导入水稻基因组中,种胚LOX3缺失鉴定和半定量RT-PCR分析证实反义RNA抑制了LOX3基因的表达。对T2代转基因植株进行了水分胁迫处理及稻瘟病和白叶枯病的接种鉴定。结果显示,与非转基因对照相比,反义LOX3转基因植株对水分胁迫、稻瘟病和白叶枯病都表现敏感,说明水稻种胚LOX3基因在逆境胁迫反应中发挥一定的作用。
- 刘南南江玲张文伟刘玲珑翟虎渠万建民
- 关键词：水稻反义RNA转基因植株逆境胁迫
- 水稻低温发芽力的QTL定位被引量：20
- 2006年
- 以珍汕97B与多年生稻种质AAV002863的DH群体（198个株系）构建了包含140个SSR标记的连锁罔谱，检测了影响水稻低温发芽力性状的数量性状座位（QTL）。15℃下处理6d，两亲本珍汕97B与多年生稻AAV002863的发芽率分别为79．7％和30．1％，DH群体间的发芽率变化在0％～100％。QTL定位分析检测到2个与低温发芽力相关的基因座。分别位于第3和第10染色体上，贡献率分别为12．6％和12．9％，增效等位基因分别来自多年生稻AAV002863和珍汕97B。上位性分析结果显示。第1与第10染色体上存在影响低温发芽力的互作位点，其互作可以提高低温发芽力，参与互作的第10染色体上的位点也具有加性主效应。
- 陈亮楼巧君孙宗修邢永忠余新桥罗利军
- 关键词：水稻数量性状座位
- 利用回交重组自交系群体检测水稻抗灰飞虱数量性状基因座
- ＜正＞水稻灰飞虱（Laodelphax striatellus Fallén）,属同翅目（Homoptera）,飞虱科（Delphacide）,是水稻生产上的一种重要害虫,广泛分布于我国各地。灰飞虱除直接刺吸水稻汁液造成...
- 段灿星翟虎渠万建民
- 关键词：水稻灰飞虱抗性数量性状基因座
- 文献传递
- Role of LOX3 Gene in Alleviating Adverse Effects of Drought and Pathogens in Rice被引量：2
- 2008年
- Nan-nan LIULing JIANGWen-wei ZHANGLing-long LIUHu-qu ZHAIJian-min WAN
- 关键词：RICE
- 水稻种质资源抗灰飞虱评价及抗性机制分析被引量：27
- 2007年
- 通过改进的苗期集团筛选法,对138份水稻种质进行了抗灰飞虱鉴定与评价。筛选出对灰飞虱具有不同程度抗性的材料25份,占总鉴定材料的18.1%,其中高抗种质2份,抗性种质9份,中抗材料14份,粳稻品种明显比籼稻感虫。对部分材料进行的排驱性、抗生性试验及相关分析表明,RathuHeenati(RHT)、Mudgo、Kasalath和IR36对灰飞虱具有强的排驱性和抗生性,其抗性水平与这两种抗虫机制密切相关;道人桥、羊毛谷的抗生性强,但排驱性弱,其主要抗虫机制表现为抗生性;Dular、ASD7和密阳23对灰飞虱具有较强的排驱性和抗生性,表明排驱性和抗生性是这3个品种的重要抗性类型;DV85具有较强的排驱性,但抗生性较弱,窄叶青8号和鬼衣谷具有中等水平的抗生性和排驱性,推测这3个材料具有较好的耐害特性。中抗材料9311的抗性水平由中等排驱性和抗生性控制,V20A的抗性主要表现为排驱性,明恢63和扬粳9538的排驱性和抗生性均较弱,暗示其抗性机制主要是耐害性。上述具有强抗生性或排驱性的材料是理想的抗灰飞虱资源。
- 段灿星张世贤陈青程治军翟虎渠万建民
- 关键词：水稻种质灰飞虱抗性评价抗性机制抗生性
- 稻米直链淀粉含量和胶稠度对高温耐性的QTL分析被引量：26
- 2006年
- 利用由98个家系组成的Nipponbare/Kasalath//Nipponbare回交重组自交系群体,以直链淀粉含量耐热指数(高温下直链淀粉含量/适温下直链淀粉含量×100)和胶稠度耐热指数(高温下胶稠度/适温下胶稠度×100)为评价指标,采用混合线性模型的QTL定位方法,在南昌和南京两个试验地点对水稻蒸煮食用品质性状的高温耐性QTL进行了检测。两个性状在两个试验地点共检测到9个QTLs,其中直链淀粉含量高温耐性QTL3个,胶稠度高温耐性QTL6个。两个性状中共有3个QTLs在两个地点同时被检测到。其中位于第6染色体上与Wx基因相同的染色体区域和第8染色体G1073-R727区域分别是控制直链淀粉含量和胶稠度高温耐性的重要区域。
- 朱昌兰江玲张文伟王春明翟虎渠万建民
- 关键词：稻米直链淀粉含量胶稠度高温耐性数量性状基因座位
