创新研究群体科学基金(50621063)
- 作品数：12 被引量：85H指数：5
- 相关作者：周洪波夏金兰张成桂邱冠周赵伟更多>>
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- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌ATCC23270周质蛋白的选择性提取及差异表达被引量：3
- 2009年
- 通过考察萃取时间、高渗液与低渗液的摩尔比以及总的渗透液体积对细胞质苹果酸脱氢酶的比活性(相对于细胞蛋白质总量)的影响,建立选择性提取Acidithiobacillus ferrooxidans ATCC23270周质蛋白的渗透休克实验方法;结合透射电镜和双向电泳实验方法,分析渗透处理前后细胞的形态和不同生长期的细胞周质空间蛋白表达差异。研究结果表明,合适的渗透休克实验条件为:细胞质量为0.1g(湿重),渗透液的总体积为10mL,渗透液的作用时间为15min,高渗液与低渗液的摩尔比为1:1;在高渗环境下,细胞收缩,周质空间变小;在低渗液环境下,细胞周质空间膨胀,外膜被胀破,周质空间内蛋白释放出来;双向电泳显示周质蛋白总体上以小相对分子质量蛋白为主,在不同的生长时期内的周质蛋白表达存在差异。
- 夏金兰王晶张倩张瑞永张成桂欧阳叙东邱冠周
- 关键词：ACIDITHIOBACILLUS周质蛋白双向电泳
- Chlorella sorokiniana rbcL基因的克隆与序列分析及其与18S rRNA基因在分类学上的比较被引量：3
- 2010年
- Rubisco大亚基基因(rbcL)广泛用于系统学分析中,在本文中以Chlorella sorokiniana CS-01叶绿体基因组DNA为模板,PCR扩增rbcL全长编码区序列,序列分析表明:该片段全长1428 bp,其中包括1425 bp的编码区序列,编码475个氨基酸,经BLAST比对发现同源性最高的为Chlorella sp.IFRPD 1018,同源性达到99.2%。同时构建系统发育树,结果显示Chlorellasorokiniana CS-01与Chlorella sp.IFRPD 1018在同一分支中。18S rDNA序列分析表明:该片段全长1740 bp,经BLAST比对发现同源性最高的为Chlorella sorokiniana,同源性达到99.7%,构建系统发育树显示Chlorella sorokiniana CS-01与两株Chlorellasorokiniana在同一分支中,支持率达到100%。但是18S rDNA序列构建的系统发育树鉴定的主要分支很少,即使鉴定出分支,该分支的支持率也比较弱,而rbcL基因序列构建的系统发育树则分支清晰且支持率较高。可见18S rDNA序列比rbcL基因序列保守性更强,进化速度更慢,因此rbcL基因序列适合亲缘关系更近的微藻的系统研究。
- 夏金兰刘鹏万民熙王润民李丽邱冠周
- 关键词：小球藻RBCL
- 矿物作用下A.ferrooxidans中磁小体相关基因的差异表达
- 2010年
- 目的:研究氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans,A.f)中与磁小体形成相关的mpsA、magA、thy和mamB基因分别在黄铁矿、黄铜矿、磁黄铁矿和闪锌矿的作用下的表达差异,寻找有利于磁小体形成的最佳培养矿物能源。方法:测量以不同硫化矿为能源时的菌体生长特性,用实时定量PCR方法研究与磁小体形成相关基因的表达差异。结果:在以磁黄铁矿为能源时,菌的生长量及多数基因的表达量优于其它三种矿,四个基因相对表达量分别为1.15、2.35、1.32、2.68。结论:磁黄铁矿是A.f中磁小体形成的最佳矿物能源。
- 刘新星张剑郭玉洁郭宁
- 关键词：氧化亚铁硫杆菌磁小体硫化矿实时定量PCR
- 大肠杆菌外膜蛋白的分离及其双向电泳图谱的建立被引量：12
- 2009年
- 本文利用温度诱导的两相分离萃取技术选择性分离未经机械破碎的大肠杆菌细胞外膜蛋白,研究Triton X-114的浓度及处理时间对提取外膜蛋白的影响。实验结果表明,Triton X-114的使用浓度和作用时间均显著影响外膜蛋白的提取效率。SDS-PAGE结果表明不同Triton X-114的使用浓度和作用时间只是影响了外膜蛋白的提取效率而对外膜蛋白提取的种类没有影响。实验发现8%的Triton X-114处理3小时为最佳分离条件,分离得到的样品可用于双向电泳分析。通过对比实验发现样品裂解液中包含低浓度的Tris是外膜蛋白双向电泳成功的关键因素,CHAPS与ASB-14或NP-40结合使用可显著提高外膜蛋白的溶解能力,缩短聚焦时间,从而优化了大肠杆菌外膜蛋白双向电泳技术体系,建立了其双向电泳图谱。
- 夏金兰欧阳叙东张成桂彭安安王晶
- 关键词：大肠杆菌外膜蛋白双向电泳
- 产脂肪酶菌株的分离、鉴定及其产酶条件优化被引量：13
- 2010年
- 从长沙岳麓山和湘江等地富含油脂的样品中分离得到一株产脂肪酶菌株CS 1-1,经18S rDNA序列分析,确定该菌株为黑曲霉(Aspergillus niger).对该菌株的产酶条件进行优化,发现该菌株在以体积分数为1%的橄榄油为诱导物,5 g/L蔗糖为碳源,40 g/L蛋白胨为有机氮源,1 g/L(NH4)2SO4为无机氮源,pH为6.5的培养基中,于28℃,180 r/min摇床培养48 h,可达最大酶产量(37.6±0.8)mmol.min-1.L-1.
- 赵伟王俐琼郑甲周洪波
- 关键词：脂肪酶黑曲霉产酶条件
- 利用Minitab优化耐高温淀粉酶发酵培养条件被引量：31
- 2010年
- 利用Minitab软件中的Plackett-Burman实验设计和响应面分析法,对耐高温α-淀粉酶产生菌Bacillus subtilis C1的发酵培养条件进行优化。在单次单因子法得出的适宜条件基础上,综合考虑所有影响因素,对培养条件进行统计分析,得到Bacillus subtilis C1产耐高温α-淀粉酶的最佳培养条件。研究结果表明:优化培养基的组成(200 mL)为麸皮2.16 g,棉粕粉1.98 g,酵母粉0.40 g,NaCl 1.00 g,CaCl2 0.40 g,淀粉0.10 g。培养基优化后的酶活为2 329 U/mL,约是培养基优化前酶活的12.55倍,酶活得到显著提高。
- 赵伟陈晨刘倩冯婷婷周洪波
- 关键词：PLACKETT-BURMAN设计Α-淀粉酶
- 嗜酸氧化亚铁硫杆菌doxDA操纵元的鉴定与分析被引量：1
- 2008年
- 本文利用RT-PCR方法从转录水平上分别对A.ferrooxidans ATCC23270基因组中可能编码硫酸盐-硫代硫酸盐结合蛋白基因sbp、膜结合硫代硫酸盐-辅酶Q氧化还原酶基因doxDA以及类硫氰酸酶基因p21等开放阅读框所在的基因座之间的联系进行了鉴定和分析,结果表明它们分别从属于预测的doxDA-1操纵元和doxDA-2操纵元。在此基础上,本文对doxDA操纵元的可能启动子序列也进行了预测和分析。
- 张成桂彭安安罗炎杰张瑞永夏金兰邱冠周
- 关键词：嗜酸氧化亚铁硫杆菌基因组
- 好氧条件下Sphingomonas sp.XJ1降解DBP途径的研究被引量：3
- 2010年
- 在三角瓶中采用Sphingomonas sp.XJ1对邻苯二甲酸丁酯(DBP)进行好氧降解,以考察DBP的降解途径。分别对降解16h、32h和40h的DBP样品进行代谢产物分析,可判定保留时间为4.79min和5.11min所对应的代谢产物分别为原儿茶酸和邻苯二甲酸。由此可知,菌株Sphingomonas sp.XJ1对DBP的降解遵循DBP好氧生物降解途径的一般途径。即在菌株XJ1的作用下,DBP首先水解为MBP,继而水解为PA,经由PCA最终完全降解为CO2和H2O。
- 张新胡培磊周洪波
- 关键词：DBP生物降解代谢途径
- 产β-甘露聚糖酶Aspergillus sp. LQ21的分离、鉴定及发酵条件的研究被引量：2
- 2010年
- β-甘露聚糖酶是一类能够水解甘露聚糖、葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖的半纤维素酶类,广泛存在于动植物和微生物中,此酶在食品、医药、饲料、造纸、石油等方面已得到广泛应用;近年来,其作为食品和饲料添加剂方面倍受关注。对采自土壤和树皮的样品通过富集培养、平板初筛和摇瓶复筛,得到1株具产β-甘露聚糖酶能力的曲霉属菌株LQ21,结合形态特征、培养特征及18S rRNA基因序列分析,将该菌株鉴定为Aspergillussp.真菌。考察了培养时间、起始pH、培养温度、碳源和氮源对该菌株产酶的影响。初步确定了其最适产酶培养基组成:魔芋粉0.5%,蛋白胨1%,NaNO30.2%,K2HPO40.1%,KCl 0.05%,MgSO4.7H2O 0.05%,FeSO4.7H2O 0.001%;最适培养条件:初始pH4.5,温度35℃,转速200 r/min,培养60 h发酵液上清中酶活达到最高。
- 赵伟郑甲周洪波
- 关键词：Β-甘露聚糖酶曲霉属RRNA
- 喜温嗜酸硫杆菌YN12菌株的鉴定及其镉抗性能被引量：7
- 2008年
- 自云南酸性热泉水样中分离出一株中度嗜热硫氧化菌YN12。对其形态特征和生理生化特性以及16S rDNA序列分析结果证明,该菌株归属于喜温嗜酸硫杆菌(Acidithiobacillus caldus)。重金属抗性实验表明,YN12菌株对3CdSO4.8H2O具有超强抗性,其最高初始Cd2+耐受浓度达4.8 g/L。在此基础上,不断提升3CdSO4.8H2O浓度,其最终Cd2+耐受浓度可达31.5 g/L(相当于3CdSO4.8H2O 210 g/L)。在该最终Cd2+耐受浓度下,经过连续3代的适应性生长,YN12菌株的生长速度和硫氧化活性均能得到较好的恢复。
- 丁建南朱若林康健张成桂吴学玲邱冠周
