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柴胡皂甙d对人肝癌细胞STAT3/COX-2信号通路的调节作用被引量：15: 2010年; 目的观察柴胡皂甙d(saikosaponin-d,SSd)对人肝癌细胞STAT3、COX-2表达的影响,探讨其抗肿瘤作用可能的信号通路机制。方法体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,分别经IL-6、AG490和SSd作用后,免疫细胞化学及免疫印迹方法检测STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)以及COX-2蛋白表达的变化,并探讨其关系。结果免疫细胞化学结果显示,IL-6诱导组人肝癌细胞p-STAT3和COX-2蛋白的表达较空白对照组显著升高,而加入AG490或SSd后p-STAT3、COX-2蛋白表达较IL-6诱导组明显减弱,SSd对STAT3蛋白表达则无明显影响;免疫印迹结果亦显示出类似变化:经IL-6作用,人肝癌细胞p-STAT3和COX-2的表达明显增强,AG490或SSd作用的人肝癌细胞p-STAT3表达呈现剂量依赖性下降,COX-2蛋白表达亦出现相应下调。结论p-STAT3参与了人肝癌细胞COX-2表达调节,SSd可能通过抑制STAT3磷酸化下调COX-2的表达而发挥抗肿瘤作用。; 朱占芳和水祥侯和磊卢新兰胡雅楠陈静宏王治沦; 关键词：柴胡皂甙环氧化酶-2 STAT3转录因子

柴胡皂甙d对人肝癌细胞HIF-1α/COX-2信号通路的调节作用被引量：24: 2011年; 目的观察缺氧条件下人肝癌细胞转录因子HIF-1α和COX-2表达的变化以及柴胡皂甙d的干预作用,探讨柴胡皂甙d对HIF-1α/COX-2信号通路的影响。方法①应用氯化钴模拟细胞缺氧,观察氯化钴模拟缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α及COX-2的表达;②应用氯化钴模拟细胞缺氧,以mTOR抑制剂雷帕霉素抑制HIF-1α蛋白合成后,观察SMMC-7721细胞中COX-2表达的改变;③应用不同浓度的柴胡皂甙d作用于氯化钴模拟缺氧条件下培养的人肝癌SMMC-7721细胞,作用24 h后,分别检测肝癌细胞中HIF-1α及COX-2的表达。结果①在正常肝癌SMMC-7721细胞中HIF-1α的蛋白表达较低,氯化钴模拟缺氧显著增加了HIF-1α的蛋白水平;正常SMMC-7721细胞中便有一定量的COX-2蛋白表达,氯化钴模拟缺氧条件下其蛋白水平进一步升高。②雷帕霉素显著降低了氯化钴模拟缺氧条件下HIF-1α的蛋白水平,同时可以观察到该组细胞COX-2蛋白显著降低。③柴胡皂甙d抑制了氯化钴模拟缺氧条件下HIF-1α的蛋白表达,并呈现出剂量依赖性,COX-2的蛋白水平随柴胡皂甙d浓度增加呈下降趋势。结论转录因子HIF-1α参与了缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞COX-2表达的调节,柴胡皂甙d可能通过影响HIF-1α/COX-2信号通路发挥其抗癌作用。; 侯和磊和水祥朱占芳任牡丹李红霞陈静宏王治伦; 关键词：肝癌低氧诱导因子-1Α 环氧合酶-2 柴胡皂甙D

柴胡皂甙d对实验性大鼠肝癌STAT3及COX-2表达的影响被引量：5: 2011年; 目的探讨柴胡皂甙d(saikosaponins-d,SSd)在实验性大鼠肝癌中对信号传导蛋白和转录激活因子3(signal transducerand activator of transcription 3,STAT3)表达的影响及其意义。方法 100只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组:模型组、DMSO对照组和SSd干预组。模型组20只,余两组各40只。各组均以二乙基亚硝胺(Diethyl nitrosamine,DEN)诱癌,SSd干预组在诱癌同时行SSd干预,DMSO对照组在造模的基础上加入同SSd干预组等剂量的DMSO。14周停药,18周末处死所有实验大鼠。取肝脏标本,HE染色观察组织病理学改变,免疫组化方法检测STAT3、p-STAT3和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达。结果组织病理学检查发现SSd干预可以减轻肝脏损害;免疫组化检测结果显示SSd能够下调大鼠肝癌组织中STAT3和COX-2表达,与DMSO对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SSd可下调肝癌组织中STAT3和COX-2的表达,这可能是其抑制DEN诱发大鼠肝癌形成的机制之一。; 张雅欣王艳丽和水祥赵刚胡雅楠卢新兰刘恩岐; 关键词：肝癌环氧化酶-2 柴胡皂甙D

柴胡皂甙d对人肝癌细胞BECN1表达及自噬功能的影响被引量：14: 2017年; 目的观察柴胡皂甙d(SSd)对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖及自噬作用的影响,初步探讨其可能的机制。方法肝癌SMMC-7721细胞株经不同终浓度SSd(5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、和17.5mg/L)作用24、48、72h,MTT法检测细胞增殖,筛选最适作用浓度及时间,RT-PCR测定自噬基因BECN1 mRNA表达水平,Western blot检测BECN1蛋白表达水平。结果 SMMC-7721细胞增殖的抑制率随着SSd浓度的增大而增大,浓度达12.5mg/L时,抑制率最高(60%);SSd作用后BECN1在基因和蛋白水平的相对表达量比对照组明显升高(P<0.05),3-甲基腺嘌呤(3-MA)可降低BECN1基因和蛋白的表达,并可降低SSd作用后的BECN1的表达。结论 SSd对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用呈现浓度和时间的依赖性,基本符合药物剂量-效应关系。SSd可能通过上调自噬基因BECN1的表达诱导自噬性死亡的发生,从而达到抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用。; 肖祎任牡丹卢桂芳赵艳张丹刘亚萍卢新兰和水祥; 关键词：柴胡皂甙D 原发性肝癌自噬

陕西人群环氧化酶-2(COX-2)启动子区基因多态性及与结直肠癌易感性的关联研究被引量：3: 2014年; 目的探讨陕西人群环氧化酶-2（COX-2）基因启动子区的rs20417 G/C及rs2745557 G/A 2个位点的基因多态性并分析其与结直肠癌（CRC）发病风险及病理参数的相关性.方法采用病例-对照研究,利用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术,对198例CRC患者和200例健康人（入组者均长期居住在陕西省西安市及周边县、市）的COX-2基因的2个位点的多态性进行检测,并运用SPSS 19.0软件统计分析各位点的基因型分布和等位基因频率.分析其与CRC发病风险及病理参数的相关性.结果在陕西人群中,COX-2 rs20417 G/C位点多态性的GC或CC基因型频率与对照组的差异无统计学意义,而GC＋ CC基因型频率在病例组的频率显著高于对照组（OR=1.61;95％ CI：1.02～2.56）.病例组含有C等位基因的GC或CC基因型的淋巴结转移以及肿瘤分期与GG基因型比较,差异有统计学意义（P＜0.01及P＜0.01）;两个等位基因频率分布均与发病部位无显著相关性.而COX-2rs2745557 G/A位点多态性结果显示：GA基因型在病例组的频率较对照组显著增高（OR=1.98,95％ CI：1.15～3.40）,AA基因型在病例组中的频率亦较对照组高（OR-1.87,95％ CI：1.09～3.19）,A等位基因携带者在病例组中的频率高于对照组（OR=1.92,95％CI：1.18～3.13）.含有A等位基因的GA或AA基因型相对于GG基因型,淋巴结转移以及肿瘤分期差异均有统计学意义（P均＜0.01）;两个等位基因频率分布均与发病部位无显著相关性.结论相同环境条件下,陕西人群中携带COX-2 rs20417 C等位基因型的个体和rs2745557 A等位基因型的个体患CRC的风险增加,rs20417 C等位基因频率、rs2745557的A等位基因频率与CRC发生发展及淋巴结转移密切相关.两个基因位点的各等位基因频率与CRC的发生部位均无明显相关性.; 李红霞郭秦乐周博和水祥; 关键词：环氧化酶-2 限制性片段长度多态性单核苷酸多态性

DNMT3B基因在肝细胞癌中的表达及其对肝癌细胞增殖和侵袭迁移的影响被引量：2: 2017年; 目的探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3B)基因在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其对肝癌细胞增殖、侵袭迁移的影响及机制。方法收集46例肝癌患者的癌组织与对应癌旁组织,qRT-PCR法检测DNMT3B在肝癌组织及对应癌旁组织中的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系;应用RNA干扰(RNAi)技术合成针对DNMT3B的siRNA并转染MHCC97-H细胞,qRT-PCR和Western blot检测相关基因mRNA和蛋白表达;MTT法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 46例肝癌患者中,DNMT3B基因在肝癌组织中的表达较对应癌旁组织升高者占73.91%,其高表达与肝癌的病理分化类型和肿瘤大小有关(P均<0.05);在细胞水平,抑制DNMT3B基因表达使MHCC97-H细胞增殖及侵袭迁移能力降低;干扰DNMT3B基因可以增加抑癌相关基因RASSFA1、APC、MTSS1mRNA和蛋白表达水平。结论 DNMT3B与肝癌的进展密切相关,它可能通过调控下游抑癌基因甲基化水平影响其表达,从而抑制肝癌细胞的增殖及侵袭迁移能力。; 李雅睿王梦瑶卢桂芳任牡丹卢新兰张丹赵艳和水祥; 关键词：肝细胞癌增殖迁移

柴胡皂甙d对肝癌细胞VEGF和Ang-2表达的影响被引量：14: 2011年; 目的观察柴胡皂甙d(saikosaponins-d,SSd)对人肝癌SMMC-7721细胞血管内皮生成因子(vascular endo-thelial growth factor,VEGF)和血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)表达的影响,探讨其抗癌作用机制。方法肝癌SMMC-7721细胞株经LPS诱导,加入不同终浓度的SSd(2.5、5、10、20 mg/L)作用48 h,并以300μmol/L终浓度的Nimesulide(COX-2选择性抑制剂)作为阳性对照,采用MTT法检测细胞增殖,免疫细胞化学法测定肝癌细胞内VEGF和Ang-2蛋白表达,RT-PCR法检测VEGF mRNA表达,ELISA法检测培养上清中VEGF含量。结果 SSd可显著抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长、增殖。与LPS诱导组比较,10 mg/L SSd作用组肝癌细胞VEGF蛋白表达率、mRNA表达水平和培养上清中VEGF含量均显著降低[VEGF蛋白:80.0%vs 60.0%;mRNA表达:(0.83±0.07)vs(0.09±0.03);培养上清中VEGF含量:(655.00±5.56)vs(446.15±5.05)pg/ml,P<0.05,P<0.01],同时Ang-2蛋白表达亦显著降低(86.67%vs 53.33%,P<0.05)。在2.5～10 mg/L作用终浓度范围内,SSd对培养上清中VEGF含量降低的影响呈现一定的剂量依耐性。结论 SSd可能通过VEGF和Ang-2信号通路,发挥其抗癌作用。; 和水祥朱占芳卢新兰赵刚陈静宏王治伦罗金燕; 关键词：柴胡皂甙血管内皮生长因子类血管生成素2

Saikosaponin D inhibits proliferation and induces apoptosis via C/EBPβ-p53 signal pathway in human hepatoma HepG2 cells被引量：3: 2010年; Objective To investigate the anticancer effects and detailed mechanisms of Saikosaponin D(SSD)in human hepatoma HepG2 cells.Methods Cell proliferation and apoptosis were tested by MTT assay and Annexin-V/PI assay respectively.The expressions of CCAAT enhancer binding protein β(C/EBPβ)and p53 were detected by RT-PCR and Western blotting.Results SSD inhibited cell proliferation in a dose-dependent manner and induced apoptosis at the concentration of 5.0 mg/L.SSD significantly increased the mRNA and protein levels of C/EBPβ and p53 in a dose-dependent manner.Conclusion SSD exerts its anticancer effect by inhibiting cell proliferation and inducing apoptosis partly through C/EBPβ-p53 signal pathway in HepG2 cells.; Xin-Lan Lu,Xi Liang,Ya-Xin Zhang,Ya-Nan Hu,Shui-Xiang He Department of Gastroenterology,the First Affiliated Hospital,Medical School of Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061,China; 关键词：P53 APOPTOSIS

人肝细胞肝癌中STAT3的表达及其临床意义: 2013年; 目的探讨人肝细胞肝癌组织(hepatocellular carcinoma,HCC)中激活转录因子3(signal transducer and activa-tor of transcription 3,STAT3)的表达及其在肝癌发病中的作用。方法利用免疫组织化学方法检测76例HCC组织中STAT3的表达情况,29例肝血管瘤患者手术切除标本中的正常肝组织作为正常对照。同时,检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达情况。结果在HCC组织中STAT3表达较高,阳性表达率为68.4%(P<0.05),并与COX-2的表达呈正相关(r=0.683,P<0.05)。HCC组织中STAT3的表达与饮酒史、肿瘤直径<5cm、静脉侵犯、TNM分期Ⅰ、Ⅱ期显著相关(P<0.05)。结论在HCC发生的早期阶段STAT3与COX-2均呈高表达,STAT3/COX-2信号转导通路可能在肝癌发生早期阶段起一定的作用。; 司望利宋瑛胡雅楠任牡丹张雅欣和水祥; 关键词：环氧合酶2 肝细胞肝癌临床病理指标

柴胡皂甙d对实验性大鼠肝癌Ang-2及VEGF表达的影响被引量：7: 2013年; 目的探讨柴胡皂甙d(saikosaponins-d,SSd)对实验性大鼠肝癌血管形成的影响及其作用机制。方法清洁级雄性SD大鼠100只,随机分为3组:模型组、SSd干预组和DMSO对照组。模型组经口灌注二乙基亚硝胺(diethylinitrosamine,DEN)溶液造模,每周5次至14周;DMSO对照组和SSd干预组在造模的同时分别每日给予腹腔注射SSd 1mg/kg和等体积量的DMSO。至18周末处死所有大鼠,记录大鼠的一般情况,取肝脏标本,HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学法和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测肝癌组织及血清中血管生成素2(Ang-2)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果 SSd可抑制肿瘤形成,减轻肝脏损害,降低死亡率。免疫组化和ELISA法检测结果显示,SSd下调大鼠肝癌组织及血清中Ang-2和VEGF表达,与模型组和对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SSd可以抑制实验大鼠肝癌发生及血管形成,下调Ang-2和VEGF的表达,这可能是其抑制肝癌的作用机制之一。; 王艳丽宋涛胡雅楠卢新兰张雅欣刘恩岐和水祥; 关键词：柴胡皂甙D 肝癌血管生成素2 血管内皮细胞生长因子

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