云南省应用基础研究基金(2006C0042M)
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
- 相关作者：高倩阮永华金克炜何永文边莉更多>>
- 相关机构：昆明医学院第一附属医院昆明医学院云南医学高等专科学校更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究基金国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化过程中FHIT蛋白和Ki-67抗原的表达及意义被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化过程中脆性组胺酸三联体（FHIT）蛋白和Ki-67抗原的表达及意义.方法 选用100 μg/ml的云锡矿粉染毒永生化人支气管上皮细胞BEAS-2B（B）及人胚肺成纤维细胞WI-38（W）,每次染毒72 h,隔代染毒直至第9代.自第11代起将上述细胞分组共培养.B100表示100μg/ml矿粉诱导的B细胞,W100表示100 μg/ml矿粉诱导的W细胞.分组如下：B组;B（W）组：与W共培养的B细胞;B（W100）组：与W100共培养的B细胞;B100组：100 μg/ml矿粉诱导的B细胞;B100（W）组：与W共培养的B100细胞;B100（W100）组：与W100共培养的B100细胞.应用免疫细胞化学法检测第16、26及36代各组上皮细胞中FHIT蛋白和Ki-67抗原的表达,以Ki-67蛋白阳性细胞数计算细胞增殖指数（PI）.结果 BEAS-2B上皮细胞中存在FHIT蛋白表达,各代B组、B（W）及B（W100）组细胞FHIT蛋白表达水平无明显差异.第16代,B100组细胞FHIT蛋白表达水平低于B组细胞,B100（W）组及B100（W100）组FHIT蛋白表达水平较B100组进一步降低.第26代,B100、B100（W）及B100（W100）组细胞FHIT蛋白表达水平进一步降低,而至第36代,经矿粉诱导转化的上皮细胞重现FHIT蛋白的表达,且B100组、B100（W）组、B100（W100）组表达强度呈递增趋势.第16、26及36代未经矿粉诱导的各组肺上皮细胞Ki-67阳性细胞数PI均＜3%.第16代,B100组、B100（W）组及B100（W100）组细胞Ki-67阳性细胞PI分别为4.40%、4.97%和7.87%,第26代时分别增加为7.33%、7.87%和12.66%,第36代时分别进一步提高为12.60%、19.73%和24.80%.与B100、B100（W）组比较,第16、26、36代B100（W100）组阳性细胞PI明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 FHIT可能是云锡矿粉诱导BEAS-2B上皮细胞转化的一个作用靶点,云锡矿粉诱导可导致BEAS-2B上皮细胞Ki-67阳性细胞数增加,增殖活性增强.
- 边莉何永文付红梅阮永华高倩王春艳金克炜
- 关键词：抗原
- 云锡矿粉诱发F344大鼠肺癌的病理改变被引量：7
- 2007年
- 目的建立云锡矿粉(无氡)诱发F344大鼠肺癌的动物模型,探讨其肺癌发生过程及不同阶段的病理变化。方法190只大鼠随机分为矿粉组(100只)、呋喃甲醛组、生理盐水组及正常对照组(各30只)。除正常对照组外,其他3组分别以质量分数为6%的矿粉悬液、体积分数为2%的呋喃甲醛及生理盐水每次0.2 ml经气管灌注,每周1次,从灌注1周后定期分批处死大鼠,最后处死的1只大鼠染尘100周。光学显微镜及电子显微镜观察矿粉作用下肺组织的形态改变,免疫组化检测高分子和低分子角蛋白确定诱发肺癌的组织类型,Pollak染色观察肺纤维化的进展。结果矿粉组大鼠最早期出现肺部炎症,随着炎症消退见肺间质纤维增生,肺泡及支气管上皮单纯性增生、乳头状增生及鳞状化生,继而出现肺泡非典型腺瘤样增生、鳞状上皮非典型增生,最终出现肺癌。共发生肺癌14例,其中腺癌9例、鳞癌2例、复合癌3例,其他3组均未发生肺癌,矿粉组癌变率与其他3组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。鳞状化生及鳞癌也可发生于肺泡并表达高分子角蛋白。矿粉组肺纤维化31例,纤维化程度随矿粉沉着增多而呈进行性加重。结论无氡云锡矿粉具有诱癌性,F344大鼠矿粉诱发性肺腺癌及鳞癌都可发生于肺泡,Ⅱ型肺泡上皮是否是肺腺癌及外周型肺鳞癌的起源细胞值得深入研究。
- 阮永华华海蓉高倩宋精玲梁锐金克炜
- 关键词：肺肿瘤上皮细胞肺泡
- 云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化和成纤维细胞活化过程中的相互作用被引量：4
- 2009年
- 目的探讨云锡矿粉诱导人肺上皮细胞转化及成纤维细胞活化过程中的相互作用。方法常规培养永生化人支气管上皮细胞（BEAS-2B）及人胚肺成纤维细胞（WI-38），每6天传代1次；100μg／ml的云锡矿粉隔代诱导BEAS-2B及WI-38至第9代，共诱导5次，自第11代分组共培养至第40代。刀豆凝集素A及锚着独立性生长实验检测细胞恶性转化，流式细胞术检测细胞周期变化，免疫细胞化学法检测成纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）表达。结果（1）与正常BEAS-2B细胞相比，矿粉诱导的BEAS-2B细胞单独培养至第28代细胞形态开始出现改变；与WI-38细胞共培养后，细胞形态改变提早至第20代；与矿粉诱导的WI-38细胞共培养后，细胞形态改变进一步提早至第16代。矿粉诱导的BEAS-2B细胞培养至第26代时凝集实验出现阳性；与WI-38细胞及矿粉诱导的WI-38细胞共培养后，细胞凝集时间缩短。与WI-38细胞共培养的矿粉诱导BEAS-2B及与矿粉诱导WI-38细胞共培养的矿粉诱导的BEAS-2B细胞分别在第26及第36代锚着独立性生长实验出现阳性，第36代的克隆形成率分别为6．00‰±1．00‰和15．33‰±2．52‰，且差异有统计学意义（P〈0．05）。矿粉诱导的各组上皮细胞S期细胞所占比例随培养代数增加逐渐升高，细胞发生恶性转化。（2）100μg/ml矿粉诱导的成纤维细胞培养至第26代出现α—SMA表达；与上皮细胞共培养后，成纤维细胞α-SMA表达增强，且随培养代数的增加，阳性表达细胞数明显增多，着色程度增强。结论个旧矿粉能诱导支气管上皮细胞恶性转化及成纤维细胞活化；肺上皮细胞是矿粉诱癌的主要靶细胞；肺上皮细胞的转化和成纤维细胞的活化相互影响，相互促进。
- 边莉何永文阮永华唐莹高倩王春艳金克炜
- 关键词：上皮细胞成纤维细胞
- 云南个旧及宣威地区肺癌p14^ARF和E2F-1水平的改变
- 2009年
- 目的探讨阅读框架基因p14^ARF和核转录因子E2F-1在云南个旧地区矿工肺癌，宣威地区农民肺癌组织中的表达及相互关系，寻找肺癌早期诊断特异性标记物及为治疗提供实验依据。方法采用免疫组化S-P法，检测30例个旧地区矿工肺癌和30例宣威地区农民肺癌及20例正常肺组织中p14^ARF和E2F-1蛋白的表达；采用原位分子杂交方法随机检测上述标本中25例个旧地区矿工肺癌、25例宣威地区肺癌及10例正常肺组织中E2F—1mRNA的表达。两种检测结果应用HPIAS-100计算机图文分析系统进行定量分析。结果个旧和宣威地区肺癌组织的p14^ARF蛋白表达明显低于正常肺组织，而E2F-1蛋白表达和mRNA表达均明显高于正常肺组织。p14^ARF和E2F-1蛋白表达的阳性单位在个旧肺癌组为16．44±4．85和47．39±5．43，宣威肺癌组为16．79±3．55和48．15±9．11，与正常肺组织组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。个旧肺癌组E2F-1mRNA表达的阳性单位为48．58±7．75，宣威肺癌组为49．41±8．53，明显高于正常肺组织组，差异有统计学意义（P〈0．01）。在个旧、宣威肺癌组和正常肺组织组中，E2F—1mRNA和E2F-1蛋白表达的阳性单位呈正相关（r=0．833，P〈0．01），p14^ARF和E2F-1蛋白表达的阳性单位呈负相关（r=-0．830，P〈0．01）。结论个旧和宣威两地区肺癌组织中存在E2F-1基因的表达上调和p14^ARF基因的表达下调。
- 杨志鸿阮永华金克炜高倩张林
- 关键词：肺肿瘤P14^ARF转录因子E2F-1
