国家高技术研究发展计划(2001AA218051)
- 作品数：47 被引量：266H指数：7
- 相关作者：王国斌陶凯雄陈道达蔡明蔡昌学更多>>
- 相关机构：华中科技大学华中科技大学同济医学院附属协和医院山东大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划湖北省科技攻关计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- c-myc靶向siRNA真核表达载体的构建和鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的:设计构建重组体为转染肿瘤细胞,观察癌基因的沉默效果,为探索肿瘤基因治疗的新途径打好基础。方法:以c-myc为靶基因,以pEGFP-C1/U6质粒为载体,设计构建重组体,根据c-myc癌基因cDNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pEGFP-C1/U6中,转化DH5а菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析。结果:经酶切鉴定筛出的重组体测序结果与目的序列相同,重组载体构建成功。结论:利用RNAi技术可成功构建小干扰RNA重组体。
- 翟荣林王国斌夏泽峰
- 关键词：PEGFP-C1C-MYC癌基因靶向CDNA序列RNAI技术酶切鉴定
- Survivin靶向小干扰RNA诱导大肠癌细胞凋亡的作用
- 2008年
- 本研究拟用基因克隆技术构建Survivin靶向的小干扰RNA（SiRNA）重组表达载体，探讨用RNA干扰的方法下调大肠癌细胞中Survivin基因的表达，从而抑制肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡，为大肠癌的基因治疗提供理论依据。
- 蔡明王国斌陶凯雄蔡昌学
- 关键词：大肠癌细胞癌细胞凋亡靶向基因克隆技术
- Livin基因和Survivin基因联合靶向siRNA抑制大肠癌细胞增殖的作用被引量：5
- 2009年
- 采用1个载体编码2个shRNA技术,构建Livin基因和Survivin基因联合靶向的siRNA重组表达载体,研究其对人大肠癌细胞生长协同抑制的增效作用。构建Livin基因和Survivin基因联合靶向的siRNA重组表达载体并转染大肠癌细胞,通过RT-PCR和Western blotting方法检测Livin基因与Survivin基因的表达,利用流式细胞仪检测处理后细胞的凋亡效应。经酶切鉴定和测序分析证实Livin基因和Survivin基因联合靶向的siRNA重组表达载体构建成功,它对大肠癌细胞Livin和Survivin mRNA的抑制率分别为27.90%和32.24%,对Livin和Survivin蛋白表达的抑制率分别为22.28%和40.86%,诱导肿瘤细胞凋亡率为(11.69±1.37)%,但协同干扰作用比单独干扰Livin基因或Survivin基因弱。Livin基因和Survivin基因联合靶向的siRNA重组表达载体构建成功并能抑制Livin基因和Survivin基因的表达,但协同抑制作用比单独干扰Livin基因或Survivin基因弱。
- 蔡明王国斌陶凯雄蔡昌学
- 关键词：LIVIN基因SURVIVIN基因RNA干扰基因治疗
- 改进的自乳化溶剂挥发法制备的核/壳型Me.PEG-PLA纳米粒的表征被引量：6
- 2004年
- 目的 表征甲氧基封端的聚乙二醇/聚乳酸共聚物(Me.PEG-PLA)纳米粒。方法 采用本体聚合合成了亲水改性的Me.PEG-PLA,用改进的自乳化-溶剂挥发法制备了该共聚物纳米粒。结果与结论 HNMR和FT-IR表征了共聚物结构为嵌段共聚物。原子力显微镜(AFM)对纳米粒的形态研究表明,未经PEG改性的PLA纳米粒呈规整的球形,而PEG改性的PLA纳米粒为核/壳结构,外壳为亲水性的PEG链段,内核为疏水的PLA。激光粒度仪测定共聚物纳米粒的zeta电势为零,进一步证明其核/壳结构。共聚物纳米粒的粒径在70-160 nm,并呈正态分布。
- 董静刘明星杨亚江徐辉碧杨祥良
- 关键词：聚乳酸聚乙二醇纳米粒
- 胃癌组织中核因子-κB,ICAM-1和COX-2的表达及其临床意义被引量：7
- 2005年
- 目的探讨核因子-κB,ICAM-1和COX-2的表达在胃癌发生、转移中的作用及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测1 4 2例胃癌中核因子-κB,ICAM-1和COX-2蛋白的表达情况,以相应癌旁组织(3 0例)作对照。结果核因子-κB在胃癌组织的阳性表达率为6 2.0%,显著高于对照组(P<0.0 1);其表达与淋巴结转移、组织学类型和远处转移的临床病理指标有明显关系(P<0.0 5)。ICAM-1和COX-2在胃癌组织中阳性表达率分别为7 2.5%和6 4.1%,均显著高于对照组,差异有极显著性(P<0.0 1),且其在淋巴结是否转移的两组之间差异均有统计学意义(P<0.01)。核因子-κB与ICAM-1,COX-2的表达呈显著正相关(rs=0.4 7 7,P<0.0 1;rs=0.3 8 0,P<0.0 1)。结论核因子-κB通过对ICAM-1和COX-2的转录调控,在胃癌的发生、转移过程中发挥重要作用,可能成为胃癌治疗的一个新靶点。
- 童强王国斌卢晓明肖勇舒晓钢陶凯雄陈道达
- 关键词：核因子-ΚB环氧化酶-2细胞间黏附分子-1
- Livin靶向siRNA对结肠癌细胞的抑制作用被引量：2
- 2009年
- 目的构建Livin靶向si RNA重组表达载体,研究其对人结肠癌细胞生长的抑制作用。方法构建Livin靶向si RNA重组表达载体并转染结肠癌细胞,通过RT-PCR和Western blot方法检测Livin的表达。结果经酶切鉴定和测序结果证实Livin靶向si RNA重组表达载体构建成功,它对结肠癌细胞Livin mRNA和蛋白的表达抑制率分别为30.18%和28.88%。结论Livin靶向si RNA重组表达载体构建成功并能显著抑制Livin基因的表达。
- 蔡明王国斌陶凯雄蔡昌学
- 关键词：LIVIN基因RNA干扰基因治疗
- 纳米技术在肿瘤治疗中的应用
- 2007年
- 纳米技术是指在纳米空间尺度水平操纵原子和分子，对物质和材料进行加工处理的技术。纳米科技的发展是多学科交叉融合的表现，纳米生物技术是医学领域研究的热点，尤其是纳米靶向载体系统、纳米生物传感器、纳米成像技术等等。本文就纳米技术的特点及其在肿瘤治疗中的应用作一简要阐述。
- 蔡明王国斌陶凯雄蔡昌学
- RP-HPLC测定雷公藤甲素聚乳酸纳米粒的包封率及载药量被引量：2
- 2004年
- 本文研究了反相高效液相色谱和超速冷冻离心测定雷公藤甲素聚乳酸纳米粒包封率和载药量的方法。实验结果表明,在优化色谱条件下雷公藤甲素与辅料及溶剂峰分离良好,雷公藤甲素在1.84～46μg·mL-1范围内本法有良好的线性关系(r=1.0,n=6),方法日内及日间精密度分别为0.09%～1.01%及0.5%～2.12%,在空白聚乳酸纳米粒中雷公藤甲素的加样回收率为98.85%～100.48%,聚乳酸包裹的雷公藤甲素纳米粒的包封率分别为74.27%、60.37%、46.6%,其相对应的载药量分别为1.36%、1.95%、2.57%。此方法准确可靠、简单、重现性好。
- 刘明星董静杨亚江杨祥良徐辉碧
- 关键词：RP-HPLC雷公藤甲素纳米粒包封率载药量
- 短发卡样RNA抑制c-myc癌基因在乳腺癌细胞中的过度表达
- 2005年
- 目的构建人cmyc癌基因特异性短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体,抑制靶基因cmyc在乳腺癌细胞中的过度表达。方法设计有小发夹结构的三条寡核苷酸序列,克隆至空载体pEGFPC1/U6中构建重组体并体外转染乳腺癌细胞株MCF7,48h后分别用RTPCR和Westernblot方法检测胞内cmyc癌基因mRNA水平和蛋白水平。结果①成功构建shRNA真核表达载体;②shRNA表达载体转染MCF7细胞48h后,pEGFPC1/U62能明显下调胞内cmycmRNA水平和蛋白水平(P<0.01)。结论构建的shRNA真核表达载体能显著抑制cmyc癌基因在MCF7细胞中的过表达。
- 翟荣林王国斌
- 关键词：C-MYC癌基因乳腺癌细胞株MCF-7PEGFP-C1基因特异性体外转染重组体
- 胃癌组织中核因子-κB和环氧合酶-2的表达及其临床意义被引量：2
- 2006年
- 背景:有关核因子(NF)-κB和环氧合酶(COX)-2在肿瘤组织中表达的研究虽然较多,但其临床意义和相互关系尚无定论。目的:研究NF-κB和COX-2在胃癌组织中的表达及其关系。方法:采用免疫组化SP法检测142例胃癌组织中NF-κB和COX-2蛋白的表达,以相应的癌旁正常组织(30例)作对照。结果:NF-κB在胃癌组织中的阳性表达率为62.0%,显著高于对照组(P<0.01);NF-κB的表达与组织学类型、淋巴结转移和远处转移的临床指标呈显著相关(P<0.05)。COX-2在胃癌组织中的阳性率为64.1%,在对照组中无表达,两者比较有显著性差异(P<0.01),且在淋巴结转移组阳性率显著高于无转移组(P<0.01)。胃癌组织中NF-κB和COX-2的表达呈显著正相关(r=0.380,P<0.01)。结论:NF-κB和COX-2在胃癌的发生、发展中起重要作用,NF-κB可能促进了COX-2的表达。
- 童强王国斌卢晓明陶凯雄陈道达
- 关键词：胃肿瘤NF-KB环氧合酶-2
