国家自然科学基金(30771960)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：耿建国林志新裴新辉王尽淘张雪洪更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 重组活性小鼠组织因子及其阻断性单抗的制备与应用被引量：2
- 2009年
- 组织因子是一种位于细胞膜上的糖蛋白,是外源性凝血过程的关键启动因子,近年来其在肿瘤细胞迁移等其他过程中的重要作用也已逐渐被揭示.构建了融合有His标签的小鼠组织因子胞外区段重组蛋白基因,利用昆虫杆状病毒蛋白表达系统成功表达并得到大量可溶性重组小鼠组织因子.利用血浆凝集实验和鼠尾流血时间实验对此重组小鼠组织因子进行的活性检测表明,此重组蛋白具有良好的生物活性,可以引起血浆凝血或缩短鼠尾流血时间.同时,利用此重组蛋白为抗原,制备了小鼠组织因子的小鼠源功能阻断性单克隆抗体,在血浆凝集实验中证明其对小鼠组织因子的活性有明显抑制作用.利用此阻断性单抗,成功地在小鼠深静脉血栓模型中减轻了血栓形成,证明组织因子在深静脉血栓的病程发展中起重要作用,这也是组织因子阻断性单抗在此类动物模型中的首次成功应用.通过此项工作,成功地建立了大量制备具有良好生物活性的重组小鼠组织因子蛋白的方法,并进而得到了小鼠组织因子功能阻断性单抗,为利用各种小鼠动物模型对组织因子在各项生命活动中的作用进行深入研究奠定了良好的基础.
- 裴新辉池姗王尽淘林志新张雪洪耿建国
- 关键词：昆虫杆状病毒昆虫细胞SF9
- Scribble调控β-catenin的入核
- 2010年
- Scribble(Scrib)是富含亮氨酸重复序列及PDZ结构域蛋白(LAP)家族的一员,以脚手架蛋白的方式与多种分子相结合并整合多种信号通路协同发挥作用。β-catenin是一种多功能蛋白质,在介导细胞粘附及信号转导中起中心分子作用。为研究Scrib与β-catenin间是否存在联系及何种联系,我们做了一系列实验。研究发现,如果HEK293/HEK293T细胞中过表达Scrib,β-catenin的转录活性报告基因LEF-1-1uciferase的活性则显著减弱;而如果HEK293/HEK293T细胞中稳定下调Scrib,LEF-1-luciferase的活性则显著增强。表明Scrib可抑制β-catenin的转录活性。我们同时利用免疫共沉淀(Co-IP)实验发现Scrib与β-catenin存在特异结合作用。另外,细胞组分分离实验表明HEK293/HEK293T细胞中稳定下调Scrib,细胞中β-catenin蛋白总量不变,而胞浆及胞核内β-catenin量增多即表明Scrib可抑制β-catenin的入核。本研究在分子机制上表明Scrib可通过与β-catenin的结合,抑制β-catenin入核,从而影响β-catenin的下游调控基因。
- 李苏瑞牛晓峰陈铭
- 关键词：SCRIBBLEΒ-CATENIN
