广东省自然科学基金(9151051501000048)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：张绍衡陈烨姜泊唐源淋徐智民更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两种方法定量分析肝硬化患者肠道菌群改变的比较被引量：3
- 2012年
- 目的观察肝硬化患者肠道菌群改变,探讨传统培养法与实时定量PCR检测结果的一致性。方法纳入73名肝硬化患者及55名健康人,对其粪便细菌进行传统培养及定量PCR,比较两种方法检测结果的一致性。结果细菌培养结果显示,与正常对照组比较,肝硬化患者肠杆菌、肠球菌、葡萄球菌、酵母菌数量显著增加(P分别为0.004、0.002、0.044、0.026),拟杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌、梭菌数量显著降低(P分别为0.029、0.046、0.045、0.045)。定量PCR结果显示,肝硬化组肠杆菌、肠球菌数量显著增高(P分别<0.01、0.012),乳酸杆菌、双歧杆菌、拟杆菌及梭菌数量显著降低(P均为<0.01)。结论肝硬化患者存在不同程度肠道菌群失衡,可能影响病情发展。传统细菌培养与荧光定量PCR的结果具有良好的一致性,但定量PCR更精确、灵敏、省时、省力。
- 唐源淋张绍衡郭亚兵姜泊陈烨
- 关键词：肠道菌群肝硬化实时定量PCR
- Syndecan-1高表达载体及不脱落突变体的构建及表达鉴定
- 2012年
- 目的:建立小鼠syndecan-1的pcDNA3.0高表达和不脱落的真核表达载体并进行表达鉴定。方法:(1)PCR扩增syndecan-1编码序列,构建载体pcDNA3.0-widetype-synde-can-1(WT-sdc1),经定点突变技术构建载体pcDNA3.0-unshedding-syndecan-1(uS-sdc1);(2)设立阴性对照组、转染组(分别为pcDNA3.0转染组、WT-sdc1转染组及uS-sdc1转染组,转染48 h),予1μmol/L的佛波酯(PMA)刺激15 min后经RT-PCR、Western blot及Dot blot鉴定刺激前后syndecan-1表达的情况。结果:(1)真核表达载体WT-sdc1测序完全正确;载体uS-sdc1目的突变点已成功突变,除了一处无义突变外,其余序列与GenBank中的序列完全一致;(2)转染48 h后,WT-sdc1和uS-sdc1转染组细胞均强表达syndecan-1mRMA和蛋白,细胞上清中仅检测出少量脱落的syndecan-1。PMA刺激后,各组mRMA表达无显著改变;WT-sdc1转染组syndecan-1蛋白表达量较uS-sdc1转染组显著减弱,上清中脱落的syndecan-1含量显著增加。结论:成功构建了WT-sdc1载体和uS-sdc1载体,为深入研究syndecan-1及其脱落在胃肠道疾病中的具体作用及基因治疗奠定了基础。
- 刘俊王继德邝杰思张绍衡唐源淋王中秋秦和平陈烨
- 关键词：SYNDECAN-1突变胃肠道疾病
