您的位置： 专家智库 > >

国家教育部博士点基金(20090204110024)

作品数：28 被引量：135H指数：9
相关作者：张改生张龙雨牛娜马守才宋瑜龙更多>>
相关机构：西北农林科技大学河南科技学院宝鸡市农业科学研究所更多>>
发文基金：国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 16篇中文期刊文章

领域

  • 14篇农业科学
  • 3篇生物学

主题

  • 16篇小麦
  • 6篇雄性不育
  • 6篇不育
  • 5篇细胞质
  • 5篇细胞质雄性不...
  • 5篇胞质雄性不育
  • 4篇雄性不育系
  • 4篇不育系
  • 3篇蛋白质
  • 3篇细胞质雄性不...
  • 3篇线粒体
  • 3篇基因
  • 3篇胞质雄性不育...
  • 2篇蛋白
  • 2篇叶绿
  • 2篇叶绿体
  • 2篇育性
  • 2篇杂交
  • 2篇杂交小麦
  • 2篇杂种

机构

  • 16篇西北农林科技...
  • 2篇河南科技学院
  • 2篇宝鸡市农业科...
  • 1篇青海省农林科...

作者

  • 16篇张改生
  • 10篇牛娜
  • 10篇马守才
  • 8篇张龙雨
  • 4篇胡俊敏
  • 4篇李红霞
  • 4篇宋瑜龙
  • 4篇杨书玲
  • 4篇王书平
  • 4篇位芳
  • 3篇李莉
  • 3篇朱启迪
  • 3篇刘红占
  • 3篇张新钵
  • 2篇张明珠
  • 2篇李亚鑫
  • 2篇郭艳萍
  • 2篇王俊生
  • 2篇袁蕾
  • 2篇宋齐鲁

传媒

  • 5篇麦类作物学报
  • 3篇作物学报
  • 2篇中国生物化学...
  • 2篇核农学报
  • 1篇分析化学
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇分子植物育种

年份

  • 3篇2013
  • 2篇2012
  • 6篇2011
  • 5篇2010
共 28 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
黏类小麦细胞质雄性不育系mtDNA消减文库的构建被引量：2
2010年
本研究利用抑制性消减杂交技术,构建了黏类小麦细胞质雄性不育线粒体DNA的消减文库。分别提取相同细胞质背景下的不育和可育等基因系线粒体基因组DNA(mtDNA),用RsaⅠ酶切成大小不等的片段,并各自与不同的接头连接,连续经过两次消减杂交和两次PCR扩增,将PCR产物与克隆载体连接,转化为大肠杆菌感受态细胞DH5α,经蓝白斑筛选后,再用PCR方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建差异DNA消减文库。在构建的不育mtDNA文库中,将SSH文库的全部扩增产物与SSH文库中的单条扩增条带分别进行胶回收和克隆转化,分别挑取54个和6个阳性克隆进行测序分析和相关功能初步比对。结果表明,不育mtDNA的SSH文库差减杂交效率较高,质量较好;回收单条扩增条带分别进行克隆测序的结果准确率较高;对测序序列进行BLASTx比对及功能注释分析发现,约90%的序列来源于线粒体基因nad1和nad5的非编码区。
胡俊敏张龙雨袁正杰张改生韩艳芬李亚鑫盛英位芳王俊生牛娜马守才李红霞
关键词：雄性不育系抑制性消减杂交
小麦生理型和遗传型雄性不育系及其保持系小花完整叶绿体蛋白质组分比较研究被引量：10
2011年
采用固相pH梯度SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳技术,以小麦遗传型雄性不育系ms(S)-1376、杀雄剂SQ-1诱导的生理型雄性不育系ms(A)-1376,以及对应的保持系(A)-1376(杀雄剂诱导前的正常可育系)所构建的等基因和等生理差异系为试材,比较分析了2种分离纯化完整叶绿体的方法。在确立了一套适用的技术方法的基础上,研究了三者在花粉小孢子萌发单核早期小花完整叶绿体蛋白之间的差异。采用30%、45%和60%的不连续蔗糖密度梯度离心的方法能够获得完整且纯度较高的叶绿体,经TCA-丙酮提取蛋白质后,PDQuest软件分析,在分子量14.4～66.2kD,等电点4～7的线性范围内可分辨出2-DE图谱上239个较为清晰的蛋白质点,对其中的6个差异表达蛋白质点进行MALDI-TOF肽质量指纹图谱分析,从生物信息学数据库检索鉴定出6个差异蛋白质点分别是酰基辅酶A脱氢酶结构域蛋白、钙调结合蛋白磷酸酶、多催化功能肽酶、热休克蛋白60、光受体蛋白2及1个未知功能的表达蛋白质。这些蛋白质在供试小麦叶绿体物质能量代谢、叶绿体防卫抵御机制、叶绿体细胞内信号转导及植物极性生长等生理应答反应中起调控作用,它们能在本研究供试两不育系和对应可育系中差异表达,可能与雄性不育相关。
李莉王书平张改生王亮明宋瑜龙张龙雨牛娜马守才
关键词：小麦MALDI-TOF-MS
15个化杀杂交小麦亲本配合力和杂种优势群的初步研究被引量：16
2011年
为给小麦杂种优势利用提供依据,以15份普通小麦为材料,采用NCⅡ设计组配44个组合,研究了8个农艺性状的杂种优势和配合力。结果表明,杂种F1的杂种优势是普遍存在的,各性状大都表现出正向优势;周麦22、西农889、西农375和罗大穗316的产量性状一般配合力相对效应较高,参与组配的强优势组合较多。在44个杂交组合中,(D177×罗大穗316)、(周麦22×花培87-8)、(周98165×西农375)、(周麦22×西农889)、(周麦22×200(1)穗2)、(周麦22×郑育麦9987)、(周麦22×07常-261)、(周98165×西农889)、(周麦22×罗大穗316)、(周麦22×西农375)为强优势组合。利用普通小麦亲本8个性状的一般配合力将15份亲本划分为5类,直接以普通小麦亲本8个性状的表现值亦可将15份普通小麦划分为5类。
陈晓文马守才王志军李清峰朱东旭张改生牛娜
关键词：杂交小麦配合力杂种优势群
小麦TaPDK基因的序列分析、原核表达及纯化被引量：8
2013年
为研究TaPDK蛋白在小麦生理型雄性不育过程能量代谢途径中的调控机制。本试验提取小麦花药总RNA并反转录为cDNA,根据GenBank报道的已知小麦PDK基因序列设计引物,扩增TaPDK基因的编码区,采用生物信息学方法对其进行序列分析与功能预测,得出TaPDK的ORF为1095bp,编码364个氨基酸,蛋白分子量为41kD。进一步构建原核表达载体PET23d-PDK,转化到大肠杆菌表达菌种E.coli BL21(DE3)中进行优化表达,融合蛋白经SDS-PAGE电泳和Western blot验证后利用亲和层析柱初步纯化,针对原核表达过程中出现的非特异蛋白,采用切胶处理的方法进行二次纯化。原核表达结果表明IPTG可诱导一个分子量约40kD的特异蛋白,且主要以包涵体的形式存在,优化表达条件为:28℃、0.8mmol.L-1IPTG、150r.min-1诱导表达4h,表达产物经两次纯化得到2mg的目的蛋白,为下一步制备多克隆抗体、寻找互作蛋白奠定基础。
杨书玲张龙雨张改生桑青刘红占朱启迪张新钵赵新亮
关键词：小麦原核表达蛋白纯化WESTERNBLOT
小麦RPL21基因同源克隆与表达分析被引量：3
2011年
为了解60S核糖体蛋白L21(ribosomal protein L21,RPL21)的基因组结构和表达模式,以GenBank数据库中小麦RPL21基因的部分序列为信息探针,采用RT-PCR和PCR技术从小麦多子房株系幼穗中克隆了RPL21基因的cDNA与DNA片段,并对该基因在小麦多子房近等基因系间的表达差异和多子房株系中的时空表达模式进行了分析。结果表明,所克隆的小麦RPL21基因cDNA序列(GenBank登录号:HM138480)长521bp,编码164个氨基酸;DNA序列(GenBank登录号:HM138481)长1600bp,含有2个外显子和1个内含子。半定量RT-PCR分析显示,该基因在多子房株系幼穗中表达少量上调;在多子房株系不同时期幼穗中的表达量随着幼穗的发育呈上升趋势;不同组织中具体表达模式为茎顶端≈幼根>幼穗>幼叶,生长旺盛部位表达量较高。
栗现芳马守才张改生牛娜
关键词：克隆
超声辅助提取高效液相色谱法检测小麦籽粒中杀雄嗪酸的残留被引量：4
2012年
建立了高效液相色谱法(HPLC)检测小麦籽粒中化学杂交剂SQ-1主成分杀雄嗪酸残留的方法。以75%乙醇为提取剂,正反萃取净化;采用Diamonsil C18不锈钢柱,以甲醇-0.5%(NH4)2HPO4溶液(60∶40,V/V,pH 2.5)为流动相,检测波长283 nm,流速1.0 mL/min。结果表明:化学杂交剂SQ-1主成分杀雄嗪酸在0.75～25.0 mg/L范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999,在3个添加水平(1.0,5.0和10.0 mg/kg)范围内,平均加标回收率在84.2%～95.0%之间,相对标准偏差为1.0%～3.3%,检出限为0.075 mg/L。
朱启迪张改生赵新亮张新钵杨书玲
关键词：小麦高效液相色谱
粘类小麦细胞质雄性不育系恢复性能及其杂种优势和细胞质效应的研究被引量：4
2012年
为更好地揭示粘类小麦细胞质雄性不育系(CMS)的恢复性能、杂种优势和细胞质效应,以推动三系杂交小麦的生产应用,以4类19种异质粘类小麦CMS为母本,与系列恢复系亲本进行不完全双列杂交,获得248个互为同核异质、同质异核、异质异核的杂种F1,对粘类小麦CMS的恢复规律等进行了研究。结果表明:(1)影响粘类CMS恢复性能的主要因素是恢复系、不育系核型、不育系胞质类型,三因素对恢复度的影响表现为:恢复系>不育系核型>不育系胞质类型;(2)粘类CMS与系列恢复系的杂种F1穗长、分蘖均值分别为其亲本的1.129倍和1.273倍,具有很强的杂种优势,株高为亲本的0.997倍,具有一定的负向优势;(3)对粘类小麦CMS产生单倍体的影响表现为:不育系核型>不育系胞质类型>恢复系,单倍体产生程度与不育系核型和不育系胞质类型相关,单倍体产生频率只和不育系核型直接相关,单倍体产生频率与单倍体产生的严重程度没有直接关系,利用特定不育系核型可有效避免产生单倍体。
李建超张改生孙瑞牛娜马守才李红霞
关键词：细胞质雄性不育系恢复度杂种优势细胞质效应单倍体
三例小麦细胞质雄性不育系线粒体DNA的扩增片段长度多态性分析被引量：2
2013年
细胞质雄性不育是小麦杂种优势利用的重要途径,为了鉴定3例小麦雄性不育系的细胞质类型,对其线粒体DNA(mtDNA)进行扩增片段长度多态性(Amplified fragment length polymorphism,AFLP)分析。文中利用差速离心法和不连续蔗糖密度梯度超速离心法提取纯化小麦线粒体。结果表明:通过该提取方法获得的mtDNA,其质量和纯度能够满足PCR反应和遗传学分析。在64对选扩引物中,筛选到了4对特异性引物,其中引物E1/M7在ms(Kots)-90-110不育系扩增出3条特异条带;引物E4/M2在ms(Ven)-90-110不育系扩增出2条特异条带;引物E7/M6在ms(S)-90-110不育系中扩增出2条特异条带;引物E6/M4在ms(Kots)-90-110不育系中扩增出2条特异条带。这些特异引物可以用来作为鉴定具有粘果山羊草Aegilops kotschyi、偏凸山羊草Ae.ventricosa、斯卑尔脱小麦Triticum spelta 3类不育细胞质型小麦雄性不育系的细胞质分子标记,为研究小麦细胞质雄性不育机理奠定了分子基础。
朱启迪张新钵Ejaz M张改生车会学王书平宋齐鲁杨书玲张龙雨
关键词：小麦细胞质雄性不育线粒体DNA扩增片段长度多态性分子标记
粘类小麦CMS育性基因分布区研究被引量：7
2011年
为更有效地选育小麦不育系的高恢复系,以8个粘类小麦细胞质雄性不育系(Cytoplasmic malesterility,CMS)为测验种,对310份来自国内外不同地区的普通小麦品种及亲本材料对粘类小麦CMS系的育性恢保关系进行调查,并采用聚类分析法研究了粘类小麦CMS育性基因的地区分布。结果表明:(1)高恢复能力的品种在中国春麦区和南方冬麦区的分布比例均超过50%,具有保持性的品种在加拿大分布最多,我国北方冬麦区次之,春麦区分布最少。(2)不同地区品种恢复度存在差异。(3)将48个普通品种聚为3类:第1类品种对粘类CMS的平均恢复度均低于20%,属全不育和高不育类型;第2类品种的平均恢复度在20%～55%范围内,基本属于半不育类型;第3类品种的平均恢复度均大于55%,属高可育和全可育类型。(4)对不育系进行聚类:90-110核背景下,K型和V型聚为一类,Ven型和B型聚为一类;224核型下V型和B型聚为一类,再和K型聚为一类,与Ven型距离最远;相同细胞质背景下,90-110和224两种核型分别在一定水平上被分为2个类别。
郭艳萍程海刚张改生张慧成
关键词：小麦育性基因分布区
小麦旗叶高纯度质膜的提取及蛋白质组学双向电泳体系的建立被引量：3
2013年
以生长到Feekes 8.5时期小麦旗叶为试验材料,通过差速离心结合两相法提取并纯化质膜蛋白,进而在裂解液选择、SDS-PAGE胶浓度及蛋白质上样量等方面对质膜蛋白质双向电泳体系进行了优化.结果表明,采用6.4%PEG 3 350/Dextran T-500(W/W)两相体系可以获得纯度高达87.9%质膜微囊.经TCA-丙酮法裂解蛋白,以12%SDS-PAGE分离胶对900μg质膜蛋白进行双向电泳,在2-DE图谱上可分辨出173个蛋白点.建立了一套用于小麦旗叶高纯度质膜的提取方法及其蛋白质组学双向电泳体系.
宋齐鲁王书平张改生陈征郭佳林车会学
关键词：小麦旗叶两相法双向电泳
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0