科技部科研院所社会公益研究专项(2005DIB1J094)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：冷希岗宋丽萍董霞朱敦皖刘兰霞更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院天津大学更多>>
- 发文基金：科技部科研院所社会公益研究专项全球变化研究国家重大科学研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生一般工业技术更多>>
- 多壁碳纳米管及其修饰物细胞毒性机制的考察
- ＜正＞目的近年来,碳纳米管应用于药物、疫苗和基因转运等方面的研究日益引起人们广泛的关注,但功能化的碳纳米管是否会对机体产生不利影响尚存在争议。碳纳米管能在肝脏与脾脏中大量积累,目前用人正常肝细胞评价多壁碳纳米管细胞毒性还...
- 刘珍宝周波王海燕张海玲刘兰霞朱敦皖宋丽萍冷希岗
- 文献传递
- 羟基化多壁碳纳米管对RAW264.7细胞增殖及功能影响研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究羟基化多壁碳纳米管对巨噬细胞RAW264.7的活性、吞噬功能及氧化应激的影响。方法将质量浓度分别为1、10、100、200μg/mL的羟基化多壁碳纳米管与原始多壁碳纳米管分别与小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞共育24、48、72 h,采用CellTiter-GloR发光法进行细胞活性测定,用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐法(DCFH-DA)检测细胞内活性氧自由基(ROS)的生成。选24只小鼠,雌雄不限,鼠龄5～6周,体质量18～25 g,随机分为4组,同时通过鸡红细胞吞噬实验检测细胞吞噬能力的变化。结果CellTiter-GloR发光法检测显示碳纳米管的细胞毒性作用呈现浓度依赖性,只有在质量浓度为10μg/mL时,羟基化多壁碳纳米管比原始碳纳米管细胞毒性小,其他浓度两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。鸡红细胞吞噬实验证实两种碳纳米管具有促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用。结果还显示,在碳纳米管质量浓度为1μg/mL和10μg/mL时,羟基化多壁碳纳米管诱导细胞内ROS含量升高程度高于原始多壁碳纳米管,而在高浓度组(100μg/mL和200μg/mL),随着孵育时间延长,原始多壁碳纳米管诱导细胞内ROS含量不断增加,明显高于羟基化多壁碳纳米管对细胞的作用。结论两种碳纳米管可显著抑制巨噬细胞增殖并提高细胞吞噬活性;不同浓度的多壁碳纳米管与细胞相互作用时,羟基化多壁碳纳米管与原始多壁碳纳米管诱导细胞内ROS升高机制不同。
- 董霞宋丽萍冷希岗
- 关键词：细胞毒性RAW264.7细胞
- N-亚甲基磷酸化壳聚糖与DNA相互作用的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨双亲性壳聚糖衍生物与质粒DNA通过自组装的方式形成基因纳米粒子的可行性,考察载体与质粒DNA的相互作用机制,为开发安全高效的非病毒载体提供新的途径。方法合成了一种双亲性壳聚糖衍生物N-亚甲基磷酸化壳聚糖(NMPCS),利用复凝聚的方法制备NMPCS/DNA纳米粒子复合物。用傅立叶变换红外光谱、核磁共振谱等手段对NMPCS进行了表征,通过凝胶电泳阻滞实验、动态光散射、原子力显微镜、圆二色谱等实验对NMPCS与质粒DNA之间的相互作用进行研究。结果经傅立叶变换红外光谱及核磁共振谱分析表明,改性后的壳聚糖的特征基团有显著变化,证明了亚甲基磷酸基团成功的引入。NMPCS与DNA能自组装形成类似球形的基因纳米粒子。结论壳聚糖基双亲性分子可能与细胞膜中的双亲性分子具有潜在相容性,使得载体/DNA复合物通过一种膜的去组装过程跨越细胞膜而最终表达,从而有望研制出高效的非病毒载体。
- 朱敦皖宋丽萍刘兰霞张海玲董霞王海柏金根姚康德冷希岗
- 关键词：DNA自组装
- 功能化多壁碳纳米管对L02细胞的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨羧基化及羟基化多壁碳纳米管对肝细胞的毒性及相关机制。方法利用透射电镜、扫描电镜、X-射线光电子能谱仪对原始多壁碳纳米管、羧基化多壁碳纳米管和羟基化多壁碳纳米管进行表征。将浓度分别为12.5、25、50、100、200μg/ml的3种碳纳米管分别与人正常肝细胞系L02细胞共育24、48、72h。采用水溶性四氮唑法进行细胞毒性评价,用2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐法检测细胞内活性氧(ROS)的生成。结果透射电镜显示3种碳纳米管平均管径均为10～20nm,长度均为10～30μm;扫描电镜显示碳纳米管形貌相似;X-射线光电子能谱仪分析显示功能化多壁碳纳米管分别在289和286ev处特征峰峰值明显增高。水溶性四氮唑法检测显示碳纳米管的细胞毒性作用呈现浓度依赖性并与作用时间具有一定关系。羧基化多壁碳纳米管比原始多壁碳纳米管及羟基化多壁碳纳米管的细胞毒性小。诱导细胞内ROS升高的次序为原始多壁碳纳米管>羧基化多壁碳纳米管>羟基化多壁碳纳米管;碳纳米管诱导细胞内活性氧含量与共育时间有关:碳纳米管与细胞作用36h以内时,细胞内ROS含量随时间逐渐增加,36h后细胞内ROS含量随作用时间延长逐渐降低。结论羧基化多壁碳纳米管比原始多壁碳纳米管在低浓度时具有更好的生物相容性,羟基化多壁碳纳米管比原始多壁碳纳米管在48h后表现出稍好的生物相容性。不同化学表面性质的碳纳米管对细胞活力的影响不同,其与细胞的相互作用可能存在不同机制。
- 刘珍宝周波王海燕张海玲刘兰霞朱敦皖冷希岗
- 关键词：多壁碳纳米管化学修饰细胞毒性
- 精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子对血小板GMP-140表达的影响
- 2010年
- 目的 考察精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子（ACGN）对血小板GMP-140表达的影响.方法 制备精氨酸修饰的壳聚精（ACS）并朋红外光谱对其进行表征;用共沉降的方法制备精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子,用凝胶电泳阻滞实验对精氨酸修饰壳聚精与DNA的相互作用进行研究;用酶联免疫双抗夹心法测定血小板α颗粒膜蛋白-140（GMP-140）表达来考察精氨酸修饰壳聚糖基因纳米粒子对血小板激活的影响.结果 红外光谱结果显示精氨酸成功地接枝到壳聚糖上,在正负电荷比≥2：1时,ACS能完全阻滞DNA的迁移,表明所有的DNA均已被ACS完全包覆.壳聚糖基因纳米粒子（CGN）和ACGN在体外均不引起血小板的激活,但在体内则都引起轻微血小板激活.结论 精氨酸修饰壳聚糖纳米粒子对血小板GMP-140的表达没有引起明显的变化,有望成为一种新型的、安全的非病毒基因载体.
- 朱敦皖宋丽萍刘兰霞董霞张海玲王海冷希岗
- 关键词：壳聚糖基因纳米粒子血小板Α颗粒膜蛋白-140
