国家质检总局科技计划项目(2006IK038)
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 相关作者：吴绍强李海艳刘建林祥梅梅琳更多>>
- 相关机构：中国检验检疫科学研究院内蒙古农业大学福建出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 贝类派琴虫实时荧光PCR检测方法的建立和应用
- 派琴虫病(Perkinsosis)是影响贝类养殖业的主要疾病之一,传统的液体巯基乙酸盐培养基(FTM)培养方法耗时过长,而且敏感性较低。本研究在FTM培养方法的基础上,选择派琴虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物...
- 李海艳吴绍强林祥梅郑腾李西峰
- 关键词：贝类实时荧光PCR
- 文献传递
- 一株诺如病毒的3’RACE扩增及基因序列分析
- 2008年
- 诺如病毒是严重危害人类健康的重要食源性病原。作者应用3’RACE(rapid amplification of cDNA 3’ends)技术对一株诺如病毒分离株的基因组3’末端进行扩增,并对其核苷酸序列进行比较分析,从而可为该病的分子生物学检测提供阳性物质,并从分子水平上推测该病的来源。经过提取病毒总RNA、以3’RACE锚定引物进行反转录、用特异引物进行3’RACE,琼脂糖凝胶电泳检测结果表明成功扩增了诺如病毒基因组约3282 bp的基因片段,测序及序列BLAST分析证实该分离株属GⅡ-4型,与日本分离株同源。3’RACE扩增序列为诺如病毒的实验室检测及深入研究奠定了基础。
- 李雅静林祥梅吴绍强刘建梅琳
- 关键词：诺如病毒
- 牡蛎包拉米虫病的研究进展被引量：5
- 2008年
- 作者从病原分类学、形态学、流行病学、病理学、检测手段的角度,阐述了牡蛎包拉米虫病的现状及研究进展,为进一步研究牡蛎包拉米虫病提供参考。
- 李海艳吴绍强
- 关键词：病原流行病学
- 贝类派琴虫LUX荧光PCR检测方法的建立
- 派琴虫(Perkinsus)是影响世界贝类养殖业发展的主要病原,为OIE规定的必报水生动物疫病之一。我国农业部2008年也将主要感染蛤仔的奥尔森派琴虫病列入了《一,二,三类动物疫病病种名录》。目前,派琴虫已经成为影响我国...
- 许遐王彩霞吴绍强林祥梅李海艳郑腾李西峰刘建梅琳韩雪清贾广乐
- 文献传递
- 贝类派琴虫LUX荧光PCR检测方法的建立被引量：2
- 2009年
- 为满足贝类派琴虫病的快速检测需要,本研究选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物,通过对反应体系和反应条件的优化,首次建立了LUX荧光PCR检测派琴虫的方法。试验表明,所建立方法检测质粒模板DNA的动态范围为1.0×101-1.0×108,敏感性为10拷贝质粒DNA。采用模拟阳性样品试验,可检测到100拷贝质粒DNA。而且与贝类的包拉米原虫、隐孢子虫等其它寄生性原虫无交叉反应,也不受组织DNA的干扰。50份采集样品的检测结果与RFTM培养方法一致。本研究所构建的派琴虫LUX荧光PCR检测方法具有快速、灵敏、特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。
- 许遐王彩霞吴绍强林祥梅李海艳刘建
- 关键词：贝类LUX荧光PCR敏感性特异性
- 贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用被引量：17
- 2009年
- 选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×101～2.6×107拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰。利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份。研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。
- 吴绍强李海艳林祥梅郑腾李西峰刘建梅琳韩雪清贾广乐
- 关键词：贝类实时荧光PCR
- 贝类派琴虫LUX荧光PCR检测方法的建立
- 为了满足贝类派琴虫病的快速检测需要,本研究选择派琴虫保守的核糖体DNA ITS-2区域设计引物,通过对反应体系和反应条件的优化,首次建立了LUX荧光PCR检测派琴虫的方法。试验表明,所建立方法检测质粒模板DNA的动态范围...
- 许遐李海艳王彩霞吴绍强
- 关键词：贝类LUX荧光PCR敏感性特异性
- 文献传递
