东莞市高等院校科研机构科技计划项目(2011108101007)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 相关作者：张志珍马卫列罗芬丁航贺贞更多>>
- 相关机构：广东医学院海南通用三洋药业有限公司深圳市龙岗区人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲型流感病毒RNA聚合酶——抗病毒药物靶点被引量：4
- 2014年
- 甲型流感病毒的RNA聚合酶由PB1、PB2和PA三个亚基组成,在病毒的生命周期中负责行使病毒基因组的转录与复制等多方面功能.甲型流感病毒由于频繁变异,导致其对传统抗病毒药物的敏感性降低,因此开发疗效好、针对性强、毒性低的新型抗病毒药物已成为当前亟待解决的问题.由于RNA聚合酶是甲型流感病毒生命周期重要的调控蛋白,并且编码聚合酶各亚基的基因序列具有高度保守性,故成为当前抗病毒药物的重要靶点.
- 罗芬马卫列张志珍
- 关键词：甲型流感病毒RNA聚合酶药物靶点
- 黄连水提物抗甲型流感病毒活性初步研究被引量：13
- 2014年
- 目的观察黄连水提物对甲型流感病毒（IAV）活性的影响。方法 CCK-8法检测黄连水提物对狗肾传代（MDCK）细胞的毒性作用。采用反向遗传8质粒病毒拯救系统制备IAV后,CCK-8和CPE法检测黄连水提物抗IAV活性。利用荧光素酶编码基因报告系统研究黄连水提物对IAV感染性和RNA聚合酶活性的影响。结果黄连水提物在0.25~2.0g/L质量浓度内,对MDCK细胞有一定安全性。黄连水提物有较好的抗IAV作用。与对照组比较,黄连水提物处理组细胞的相对荧光强度明显降低（P〈0.01）。结论黄连水提物对IAV活性及感染性有较强抑制作用,可能与抑制病毒RNA聚合酶活性有关。
- 马卫列罗芬李锦云陈潇楷林东子丁航张志珍
- 关键词：黄连甲型流感病毒抗病毒活性
- H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的获取H5N1亚型禽流感病毒NS1蛋白的多克隆抗血清,制备NS1蛋白的多克隆抗体。方法利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白GST-NS1,采用Glutathione-sepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白。纯化的GST-NS1蛋白以不同剂量皮下注射免疫BALB/c小鼠,收集抗血清,采用Protein A-sepharose和CNBr-sepharose 4B亲和层析从抗血清中纯化抗NS1蛋白的多克隆抗体。Western blot和免疫荧光法鉴定多克隆抗体的特异性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗体的效价。结果 SDS-PAGE结果表明,融合蛋白GST-NS1以可溶形式表达,诱导4 h的表达量占细菌可溶性蛋白的32.6%,融合蛋白的纯度达到90%以上。Western blot分析显示,亲和层析制备的多克隆抗体对NS1蛋白具有高度特异性。ELISA结果表明,皮下注射25、50、100μg GST-NS1融合蛋白的BALB/c小鼠血清光密度D(450)值均明显增高(P<0.01),其滴度达到1∶3 200。免疫荧光观察到病毒感染的A549细胞中,有内源性NS1蛋白的表达。结论成功地从抗血清中制备出NS1蛋白的多克隆抗体,制备的抗体具有高度特异性。
- 贺贞林东子李观强马卫列丁航张志珍
- 关键词：禽流感病毒NS1融合蛋白多克隆抗体
