中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302011002)
- 作品数:3 被引量:6H指数:2
- 相关作者:刘长军张艳萍杨文闯赵洪海刘芳萍更多>>
- 相关机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江民族职业学院东北农业大学更多>>
- 发文基金:中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 马立克氏病病毒miRNA缺失株的构建及其体外生长规律
- 2011年
- 为了研究马立克氏病病毒(MDV)编码的miRNA与致瘤性的关系,采用同源重组的方法构建了1株缺失MDV1-miR-M9、MDV1-miR-M5和MDV1-miR-M12的重组MDV,命名为rMS△miR9-12。经PCR和测序分析鉴定,证实该重组病毒编码MDV1-miR-M9、MDV1-miR-M5和MDV1-miR-M12的基因片段已缺失。将纯化后的病毒在鸡胚成纤维细胞上连续传20代,对第10代和第20代进行PCR鉴定,证明该重组病毒的遗传性状稳定。用荧光定量PCR方法比较重组病毒rMS△miR9-12与原始毒株MS的体外生长规律,发现rMS△miR9-12株比MS株有更快的生长速度。重组病毒rMS△miR9-12的获得为下一步研究MDV编码的miRNA与致瘤机制关系提供了一个新的平台,同时为获得免疫原性较好的疫苗候选毒株提供了新的途径。
- 杨文闯刘长军张艳萍李志杰张锋侯广玉丛锋
- 关键词:马立克氏病病毒MIRNA致瘤性
- 缺失部分miRNA的重组马立克氏病病毒致病性研究被引量:2
- 2011年
- 马立克氏病(MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的T淋巴细胞增生性疾病。为了研究MDV编码的miRNA与致瘤性的关系,通过对缺失部分miRNA的MDV-MS毒株进行动物感染试验,并将其结果与MDV-MS强毒株的致病性的试验结果进行比较。结果表明:缺失miRNA的重组MDV对无特定病原体(SPF)鸡无致病性,而接种MDV-MS毒株的SPF鸡却显示出很强的MD典型症状。此结果证实MDV编码的miRNA对MDV的致瘤性起到重要的作用。另外,通过对重组MDV感染鸡的羽髓病毒载量的动态检测,发现此处编码MDV-miRNA的基因为复制非必须区,但重组病毒rMS△miR9-12比亲本病毒MDV-MS的体内复制能力有所下降。
- 杨文闯刘长军刘芳萍赵洪海
- 关键词:马立克氏病病毒MIRNA
- 鸡马立克氏病病毒HC135分离株的致病性被引量:4
- 2011年
- 从辽宁省某鸡场疑似马立克氏病发病鸡外周血淋巴细胞中分离到1株适应鸭胚成纤维细胞生长的马立克氏病病毒(MDV),经蚀斑克隆和细胞传代,成功培育了1株增殖性能稳定的MDV细胞毒株,命名为HC135株;将HC135株第4代细胞培养物分别人工感染非免疫和不同疫苗免疫的SPF鸡,分析其对鸡的致病力,分离毒株攻毒对照组鸡的发病率为100%(10/10),死亡率为30%(3/10);HVT疫苗及HVT/SB1双价疫苗对分离毒株的保护指数分别为22.2和40.0。结果表明,该毒株可以突破HVT疫苗和HVT/SB1双价疫苗的免疫保护,具有特超强毒株(vv+MDV)的特点;也证实了我国商品鸡群中存在vv+MDV毒株。同时比较了HC135株与14株参考毒株的Meq基因序列,发现其Meq基因的ORF内没有基因片段的插入或缺失,推导的氨基酸存在点突变,这种突变符合高毒力毒株的变异规律。
- 张艳萍刘长军
- 关键词:马立克氏病病毒MEQ基因分离毒株