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禽白血病病毒斑点杂交检测方法的建立被引量：11: 2010年; 为建立禽白血病病毒(ALV)斑点杂交检测方法,本研究采用RT-PCR技术扩增ALV群特异性p27抗原基因的部分片段,并以纯化的p27PCR产物为模板,合成地高辛标记探针,以此建立了ALV的斑点杂交检测方法。用该方法对4份疑似感染ALV的现地病鸡组织样品和18枚鸡胚进行检测,结果表明所有样品均为阳性,而且与PCR检测结果的符合率达到100%。该方法具有良好的特异性和敏感性,适应于ALV临床大规模检测。; 周刚牛成明司昌德韩凌霞; 关键词：禽白血病病毒杂交检测 RT-PCR技术地高辛标记探针 PCR产物 ALV

不同MD免疫抗性鸡羽髓中疫苗毒与超强毒的复制动力学及相关性研究被引量：2: 2011年; 为研究具有不同抗性的马立克氏病(MD)疫苗免疫鸡羽髓后,疫苗毒和超强毒(vvMDV)的复制动力学及两种病毒载量的相关性,本实验对经火鸡疱疹病毒(HVT)FC126疫苗株免疫1周后(1wpv),攻击vvMDV Md5株G3系和G7系鸡羽髓中的HVT和vvMDV载量进行定量检测及相关性分析。结果显示,G3系和G7系鸡群羽髓中的vvMDV载量始终高于疫苗毒。其中,G3系鸡群在免疫和攻毒后的相同时间内,疫苗毒与vvMDV载量的消长规律基本一致,均在感染后第4周(4wpi)出现峰值,6wpi降至最低水平,两种病毒载量多表现为正相关,6wpv～8wpv为持续显著正相关;G7系的两种病毒的复制动力学存在差异:vvMDV载量从攻毒后第6周呈增长趋势,而疫苗毒在4wpv出现峰值后迅速下降,两种病毒载量多表现为负相关。本研究表明,免疫遗传基因在对病毒的抵抗中起主要作用,为MDV的感染机制和疫苗免疫机理的研究提供实验依据。; 蔡文博牛成明高彩霞李行司昌德张伟韩凌霞; 关键词：HVT

内源和外源性禽白血病病毒鉴别PCR检测方法的建立被引量：8: 2010年; 为建立简单快捷的内、外源性禽白血病病毒(ALV)的鉴别检测方法,本研究根据外源性ALVA亚群标准株RAV-1的p27、env基因以及内源性ALVE亚群标准株ev1的env基因的保守序列,设计3对特异性引物,可分别对ALV、外源性ALV(A、B亚群)和内源性ALV(E、J亚群)进行扩增,扩增产物分别为793bp、387bp和234bp,通过对各反应条件的优化建立了同时检测并鉴别内、外源性ALV的多重PCR方法。该方法特异性良好、灵敏度可达到2×103copies,利用该方法和ELISA对5份现地病鸡组织样品和10枚疑似感染内源性ALV的鸡胚进行检测,结果表明:4份病鸡样品均扩增出3条特异性片段;而9枚鸡胚仅扩增出793bp和234bp的特异性片段,2种检测方法的符合率为100%。该方法为内、外源性ALV的临床鉴别诊断奠定了基础。; 周刚牛成明司昌德韩凌霞; 关键词：禽白血病外源性内源性复合PCR

Th1、Th2型细胞因子在鸡马立克氏病中的研究进展: 2011年; 马立克氏病（Marek’s disease,MD）是由马立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）引起的一种鸡淋巴组织增生性疾病,以免疫抑制、多发性神经炎、内脏和组织中形成T淋巴瘤为特征[1]。根据血清学不同,MDV可分为致瘤性的Ⅰ型MDV、非致瘤性的血清Ⅱ型以及可作为疫苗用的火鸡疱疹病毒血清Ⅲ型（HVT）[2]。MDV在体内感染可分为4个时期：早期溶细胞感染期,感染后3~7 d,病毒处于生产性感染。; 蔡文博韩凌霞; 关键词：MDV TH1细胞 TH2细胞细胞因子

Th1和Th2型细胞因子在不同MHC-B单倍型鸡群中的转录分析被引量：7: 2011年; 目的研究鸡体内细胞因子的基础转录水平。方法利用双重荧光定量RT-PCR(dqRT-PCR)技术,对70日龄的5种主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex,MHC)单倍型无特定病原体(special pathogen free,SPF)鸡群G1、G2、G3、G5和G7的肺组织(包括气管)、胸腺、法氏囊、脾脏和外周血淋巴细胞(PBL)中Th1型(IFN-γ、IL-18)和Th2型(IL-4、IL-10)细胞因子mRNA含量进行定量检测。结果 IFN-γ和IL-4在各鸡群的胸腺中转录水平最高,IL-18和IL-10在法氏囊中最高,Th2型细胞因子在脾脏中最低;初级免疫器官(胸腺、法氏囊)中IFN-γ和IL-10转录水平在G3鸡群中最高。结论 70日龄时Th1型和Th2型细胞因子在SPF鸡的初级免疫器官中转录水平较高,且为制衡状态,胸腺中表现为IFN-γ和IL-4相互制衡,法氏囊中为IL-18与IL-10;不同MHC单倍型鸡体内细胞因子转录水平有所差异,但未达到显著水平。; 蔡文博李行高彩霞武永淑杨柳张伟韩凌霞; 关键词：MHC 细胞因子

两种MHC-B单倍型鸡群在发育过程中四种细胞因子转录水平的变化被引量：3: 2012年; 目的:从分子水平探讨鸡免疫系统的个体发生学。方法:利用双重荧光定量RT-PCR(dqRT-PCR)技术,对14～35日龄主要组织相容性复合体(MHC)单倍型鸡品系G2(B15单倍型)和G5系(B5单倍型)鸡群的肺组织(包括气管)、脾脏和外周血淋巴细胞(PBL)中IFN-γ、IL-18、IL-4和IL-10的mRNA含量进行定量检测。结果:随日龄增长,两鸡群脾脏中IFN-γ转录水平升高,PBL中IL-18和IL-10整体下降。G5系鸡群脾脏中IFN-γ转录水平始终高于肺组织和PBL。两鸡群脾脏中IL-18转录水平均高于肺组织和PBL,脾脏中IL-4在孵化后早期转录水平较高,而肺组织中则出现较晚。两鸡群肺组织、脾脏和PBL中IL-10均在35日龄降到最低。结论:14～35日龄无特定病原体(SPF)鸡脾脏中IFN-γ转录水平随生长发育而增多,而肺组织和PBL中未见明显随生长发育变化的规律;PBL中IL-18和IL-10转录水平随生长发育而下降;18～35日龄,肺组织、脾脏和PBL中IL-10转录水平均随日龄增长而降低;不同MHC-B单倍型鸡群细胞因子转录水平受日龄调节相似。; 蔡文博李行武永淑杨柳张伟韩凌霞; 关键词：IL-18 IL-4 MHC

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