江苏省自然科学基金(Q200443)
- 作品数：5 被引量：49H指数：3
- 相关作者：侯加法姚静张皎张建峰钱存忠更多>>
- 相关机构：南京农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究
- 2006年
- 应用RT—PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子I基因cDNA进行扩增，然后将特异性片段连接到pMD18-T载体，测序结果表明，与已知序列同源性为100％。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达，经Tricine—SDS—PAGE分析，原核表达产物为7．6ku的重组蛋白，占菌体总蛋白的23％，Western印迹表明重组蛋白具有IGF—Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在，经7moL／L盐酸胍的变性液溶解及0．5moL／L精氨酸复性液处理，表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应，结果表明重组鸡IGF—Ⅰ具有较高的生物学活性。
- 张建峰
- 关键词：中鸡WESTERN印迹克隆基因CDNA
- 鸡骨保护素(chOPG)编码区基因的克隆和序列分析
- 根据GenBank中收录预测的鸡OPG(Oseteoprotegerin)序列设计特异性引物,以体外培养至对数期的鸡胚成骨细胞总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆得到了鸡OPG的编码区基因(GenBank登录号,DQ0...
- 姚静邓益锋周振雷侯加法
- 关键词：骨保护素基因克隆
- 文献传递
- 鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究被引量：11
- 2005年
- 应用RT-PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子Ⅰ基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经Tricine-SDS-PAGE分析,原核表达产物为7.6kD的重组蛋白,占菌体总蛋白的23%,Western印迹表明重组蛋白具有IGF-Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在,经7mol·L-1盐酸胍的变性液溶解及0.5mol·L-1精氨酸复性液处理,表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对NIH3T3和鸡胚成骨细胞的增殖效应,结果表明重组鸡IGF-Ⅰ具有较高的生物学活性。
- 张建峰侯加法张皎姚静
- 关键词：MTT法活性研究中鸡SDS-PAGE分析
- OPG/RANKL/RANK系统的研究进展被引量：28
- 2006年
- OPG/RANKL/RANK系统是近年来骨科研究领域中的重大突破,研究发现许多激素、细胞因子等均通过直接或间接的调节骨保护素(osteoprotegerin,OPG),核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator ofNF-κB ligand,RANKL)的表达,调控OPG、RANKL和核因子-κB受体活化因子(recep-tor activator of NF-κB,RANK)之间的比例,从而介导破骨细胞的分化和功能而达到抗骨质疏松或致骨质疏松的作用。现就OPG/RANKL/RANK系统在骨质疏松中的作用做一综述。
- 姚静侯加法
- 关键词：骨保护素核因子-ΚB受体活化因子配体
- 鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定被引量：8
- 2005年
- 从18日龄鸡胚长骨(股骨和胫骨)中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)对其形态和功能进行观察鉴定。结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点:属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝。结论:鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞。
- 姚静钱存忠张皎张建峰侯加法
- 关键词：鸡胚破骨细胞
- 计算机X线片骨放射密度法在蛋鸡骨质疏松症研究中的应用被引量：2
- 2006年
- 应用灰度对比法的原理建立了计算机X线片蛋鸡骨放射密度法。结果表明,铝阶厚度与灰度之间呈显著的线性关系(P<0.01,r=0.997),铝阶厚度变化可准确反映蛋鸡骨骼骨量变化,不同曝光条件对骨量值无明显的影响(p>0.05)。该方法简便,精确,重复性好,经济,为研究蛋鸡骨质疏松症提供重要的检测手段。
- 陶庆树周振雷王艳胡丹侯加法
- 关键词：蛋鸡骨量
